Bedeutung der Aufnahme von exogenem Spermidin für die Regulation des intrazellulären Polyaminstoffwechsels beim stimulierten Pankreaswachstum der Ratte:
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|---|---|
| adam_text | 1 Einleitung 1
1.1 Polyaminstoffwechsel 1
1.1.1 Chemische Eigenschaften und Vorkommen von Polyaminen 1
1.1.2 Intrazelluläre Regulation des Polyaminstoffwechsels und Möglichkeiten der
Hemmung einzelner Stoffwechselschritte 2
1.1.2.1 Polyamin de novo-Synthese 2
1.1.2.2 Interkonversionsstoffwechsel 4
1.1.2.3 Oxidativer Abbau von Polyaminen 5
1.1.2.4 Aufnahme extrazellulärer Polyamine 5
1.1.3 Funktion und Bedeutung der Polyamine bei der Regulation von Wachstum 6
1.2 Durch Camostat induziertes Pankreaswachstum 7
1.3 Fragestellungen der vorliegenden Arbeit 8
2 Material und Methoden 9
2.1 Geräte und Chemikalien 9
2.2 Applizierte Substanzen 11
2.3 Versuchstiere 12
2.4 Versuche 13
2.4.1 Dosisfindungsstudie für radioaktiv markiertes Spermidin 13
2.4.2 Effekt von Camostat allein sowie Camostat in Kombination mit potenten
Inhibitoren der intrazellulären Polyaminsynthese auf Polyaminstoffwechsel,
Wachstumsparameter und die Aufnahme von oral zugeführtem Spermidin 13
2.4.2.1 Einsatz des S-Adenosylmethionindecarboxylase (SAM-DC)-Inhibitors
CGP 48664 14
2.4.2.2 Einsatz des S-Adenosylmethionindecarboxylase (SAM-DC)-Inhibitors
MDL 73811 15
2.4.3 Auswirkungen der Fütterung einer mit Antibiotika kombinierten polyaminarmen
Diät 15
2.4.4 Intrazelluläre Aufnahme von oral appliziertem, radioaktiv markiertem Spermin
beim Camostat-induzierten Pankreaswachstum und nach Verabreichung des
intrazellulären Polyaminsynthesehemmstoffes MDL 73811 16
2.5 Tier- und Organpräparation 16
2.6 Parameteranalyse 17
2.6.1 Polyaminkonzentrationen 17
2.6.2 Bestimmung der Enzymaktivitäten 19
2.6.2.1 Omithindecarboxylase (ODC) 19
2.6.2.2 S-Adenosylmethionindecarboxylase (SAM-DC) 19
2.6.2.3 Spermidin- / Spermin-N,-Acetyltransferase (SAT) 20
2.6.3 Messung der trophischen Parameter 21
2.6.3.1 Pankreasgewicht 21
2.6.3.2 Proteingehalt 21
2.6.3.3 DNA-Gehalt 21
2.7 Statistische Analysen 22
3 Ergebnisse 23
3.1 Dosisfindungsstudie für radioaktiv markiertes 3H-Spermidin: Konzentration
von 3H-Spermidin in Pankreas, Dünndarm und Leber 23
3.2 Effekt von Camostat allein sowie Camostat in Kombination mit potenten
Inhibitoren der intrazellulären Polyaminsynthese auf Polyaminstoffwechsel,
Wachstumsparameter und die Aufnahme von oral zugeführtem Spermidin.. 23
3.3 Auswirkungen der Fütterung einer polyaminarmen mit Antibiotika versetzten
Diät 30
3.4 Aufnahme von oral zugeführtem radioaktiv markiertem 14C-Spermin 31
4 Diskussion 36
4.1 Die Bedeutung der Aufnahme von extrazellulärem Spermidin für die
Regulation des intrazellulären Polyaminstoffwechsels beim normalen und
stimulierten Pankreaswachstum der Ratte. 36
4.2 Vergleich der inhibitorischen Potenz der beiden SAM-DC- Inhibitoren MDL
73811 und CGP 48664 in vivo 40
4.3 Auswirkungen der Fütterung einer polyaminarmen Diät 42
4.4 Bedeutung der Aufnahme von oral appliziertem Spermin für die Regulation
des Polyaminstoffwechsels der Pankreaszelle 43
5 Zusammenfassung 44
6 Literaturverzeichnis 46
7 Danksagungen 51
|
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1 Einleitung 1
1.1 Polyaminstoffwechsel 1
1.1.1 Chemische Eigenschaften und Vorkommen von Polyaminen 1
1.1.2 Intrazelluläre Regulation des Polyaminstoffwechsels und Möglichkeiten der
Hemmung einzelner Stoffwechselschritte 2
1.1.2.1 Polyamin de novo-Synthese 2
1.1.2.2 Interkonversionsstoffwechsel 4
1.1.2.3 Oxidativer Abbau von Polyaminen 5
1.1.2.4 Aufnahme extrazellulärer Polyamine 5
1.1.3 Funktion und Bedeutung der Polyamine bei der Regulation von Wachstum 6
1.2 Durch Camostat induziertes Pankreaswachstum 7
1.3 Fragestellungen der vorliegenden Arbeit 8
2 Material und Methoden 9
2.1 Geräte und Chemikalien 9
2.2 Applizierte Substanzen 11
2.3 Versuchstiere 12
2.4 Versuche 13
2.4.1 Dosisfindungsstudie für radioaktiv markiertes Spermidin 13
2.4.2 Effekt von Camostat allein sowie Camostat in Kombination mit potenten
Inhibitoren der intrazellulären Polyaminsynthese auf Polyaminstoffwechsel,
Wachstumsparameter und die Aufnahme von oral zugeführtem Spermidin 13
2.4.2.1 Einsatz des S-Adenosylmethionindecarboxylase (SAM-DC)-Inhibitors
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2.4.2.2 Einsatz des S-Adenosylmethionindecarboxylase (SAM-DC)-Inhibitors
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2.4.3 Auswirkungen der Fütterung einer mit Antibiotika kombinierten polyaminarmen
Diät 15
2.4.4 Intrazelluläre Aufnahme von oral appliziertem, radioaktiv markiertem Spermin
beim Camostat-induzierten Pankreaswachstum und nach Verabreichung des
intrazellulären Polyaminsynthesehemmstoffes MDL 73811 16
2.5 Tier- und Organpräparation 16
2.6 Parameteranalyse 17
2.6.1 Polyaminkonzentrationen 17
2.6.2 Bestimmung der Enzymaktivitäten 19
2.6.2.1 Omithindecarboxylase (ODC) 19
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2.6.2.3 Spermidin- / Spermin-N,-Acetyltransferase (SAT) 20
2.6.3 Messung der trophischen Parameter 21
2.6.3.1 Pankreasgewicht 21
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2.7 Statistische Analysen 22
3 Ergebnisse 23
3.1 Dosisfindungsstudie für radioaktiv markiertes 3H-Spermidin: Konzentration
von 3H-Spermidin in Pankreas, Dünndarm und Leber 23
3.2 Effekt von Camostat allein sowie Camostat in Kombination mit potenten
Inhibitoren der intrazellulären Polyaminsynthese auf Polyaminstoffwechsel,
Wachstumsparameter und die Aufnahme von oral zugeführtem Spermidin. 23
3.3 Auswirkungen der Fütterung einer polyaminarmen mit Antibiotika versetzten
Diät 30
3.4 Aufnahme von oral zugeführtem radioaktiv markiertem 14C-Spermin 31
4 Diskussion 36
4.1 Die Bedeutung der Aufnahme von extrazellulärem Spermidin für die
Regulation des intrazellulären Polyaminstoffwechsels beim normalen und
stimulierten Pankreaswachstum der Ratte. 36
4.2 Vergleich der inhibitorischen Potenz der beiden SAM-DC- Inhibitoren MDL
73811 und CGP 48664 in vivo 40
4.3 Auswirkungen der Fütterung einer polyaminarmen Diät 42
4.4 Bedeutung der Aufnahme von oral appliziertem Spermin für die Regulation
des Polyaminstoffwechsels der Pankreaszelle 43
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