Der Nachweis humaner Papillomvirus-DNA in Halslymphknotenmetastasen und histologisch karzinomfreien Halslymphknoten des Lymphabflussgebietes HPV-DNA-positiver Kopf-Hals-Plattenepithelkarzinome:
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Seite
1 EINLEITUNG 1
2 MATERIAL UND METHODEN 4
2.1 Material 4
2.1.1 Gewebeproben 4
2.1.2 Patienten und klinische Daten 5
2.2 Methoden 6
2.2.1 Entparaffinisierung des Gewebes 6
2.2.2 DNA-Extraktion 7
2.2.3 Quantitative DNA-Bestimmung 8
2.2.4 Polymerasekettenreaktion (PCR) 9
2.2.4.1 Polymerasekettenreaktion im Allgemeinen 9
2.2.4.2 PCRzurDetektionvonHPV 10
2.2.4.3 Oligonukleotidprimer 11
2.2.4.4 Primer zur Detektion von HPV 11
2.2.4.5 Reagenzien 12
2.2.5 Agarose-Gelelektrophorese 12
2.2.6 DNA-Blot nach Southern 13
2.2.7 Hybridisierung nach Southern 14
3 ERGEBNISSE 15
3.1 ß-Globin-Nachweis 15
3.2 HPV-DNA-Nachweis mittels PCR und SBH 15
3.2.1 HPV-DNA-Nachweis im Primärtumorgewebe 17
3.2.2 HPV-DNA-Nachweis im Metastasengewebe 18
3.2.3 HPV-DNA-Nachweis in histologisch karzinomfreiem
Lymphknotengewebe 18
4 DISKUSSION 20
4.1 Aufbau und Infektionsmodus der humanen Papillomviren (HPV) 20
4.2 Typisierung der humanen Papillomviren 21
4.3 Pathomechanismus der HPV-Infektion und Karzinogenese 22
4.4 HPV-assoziierte Läsionen 23
4.5 HPV und Plattenepithelkarzinome des oberen Aerodigestivtraktes 25
4.5.1 HPV-Prävalenz in Plattenepithelkarzinomen des Kopf-Hals-Bereiches... 25
4.5.2 HPV-Nachweis aus paraffin-eingebettetem Material 27
4.5.3 HPV-Typen 28
4.5.4 HPV-Infektion nach Primärtumor-Lokalisation 29
4.5.5 HPV in Lymphkotenmetastasen von Plattenepithelkarzinomen des
oberen Aerodigestivtraktes 31
4.5.6 HPV in histologisch karzinomfreien Lymphknoten im Lymphabfluss-
gebiet von Plattenepithelkarzinomen des oberen Aerodigestivtraktes 33
5 ZUSAMMENFASSUNG 38
6 LITERATURVERZEICHNIS 41
7 ANHANG 52
8 DANKSAGUNG 57
9 LEBENSLAUF 58
|
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INHALTSVERZEICHNIS
Seite
1 EINLEITUNG 1
2 MATERIAL UND METHODEN 4
2.1 Material 4
2.1.1 Gewebeproben 4
2.1.2 Patienten und klinische Daten 5
2.2 Methoden 6
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2.2.2 DNA-Extraktion 7
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2.2.4.3 Oligonukleotidprimer 11
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3 ERGEBNISSE 15
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3.2.1 HPV-DNA-Nachweis im Primärtumorgewebe 17
3.2.2 HPV-DNA-Nachweis im Metastasengewebe 18
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4 DISKUSSION 20
4.1 Aufbau und Infektionsmodus der humanen Papillomviren (HPV) 20
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4.3 Pathomechanismus der HPV-Infektion und Karzinogenese 22
4.4 HPV-assoziierte Läsionen 23
4.5 HPV und Plattenepithelkarzinome des oberen Aerodigestivtraktes 25
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4.5.2 HPV-Nachweis aus paraffin-eingebettetem Material 27
4.5.3 HPV-Typen 28
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4.5.5 HPV in Lymphkotenmetastasen von Plattenepithelkarzinomen des
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