Analysen des Zellzyklus nach Exposition von Säugetierzellen gegen gentoxische Komponenten zahnärztlicher Werkstoffe:
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2006
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adam_text | Titel: Analysen des Zellzyklus nach Exposition von Säugetierzellen gegen gentoxische Komponenten zahnärzt
Autor: Altmannsberger, Inge
Jahr: 2006
Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 10
1.1 Der Zellzyklus eukaryontischer Zellen 10
1.2 Regulation des Zellzyklus eukaryontischer Zellen 11
1.2.2 Cycline und cyclinabhängige Kinasen 11
1.2.3 Die Kontrollpunkte des Zellzyklus 12
1.2.3.1 Gl-Kontrollpunkt 14
1.2.3.2 S-Kontrollpunkt 17
1.2.3.3 G2-Kontrollpunkt 17
1.3 Veränderungen des Zellzyklus durch genotoxische Agenzien 20
1.4 Mutagenität zahnärztlicher Komposite 23
2 Fragestellung 24
3 Material und Methoden 25
3.1 Material 25
3.1.1 Zelllinie 25
3.1.2 Chemikalien und Reagenzien 25
3.1.3 Verbrauchsmaterial und Geräte 26
3.1.4 Lösungen, Medien und Puffer für die Zellkultur 27
3.1.5 Lösungen für die DNA-Färbung 28
3.2 Methoden 29
3.2.1 Zellkultur 29
9
3.2.2 Testsubstanzen 29
3.2.3 Exposition von V79-Zellen gegen genotoxische Substanzen 29
3.2.3.1 Bestimmung der Zellzahl 31
3.2.3.2 Bestimmung der Vitalität 31
3.2.3.3 Analyse des Zellzyklus 31
3.2.4 Durchflusszytometrie 32
3.2.4.1 Prinzip der durchflusszytometrischen Messtechnik 32
3.2.4.2 DNA-Farbstoffe 32
3.2.4.3 DNA-Bestimmung in der Durchflusszytometrie 33
3.2.4.4 Interpretation der Lichtsignale 34
3.2.4.5 Gerateeinstellungen 35
3.2.4.6 Datenverarbeitung und Darstellung 35
3.2.4.7 Das Computerprogramm Cell Quest 39
3.2.4.8 EXPO32ADC^na/y5W 40
3.2.4.9 Berechnungen mit der Software Multicyclefor Windows 41
3.2.4.10 Datenanalyse und grafische Darstellung 41
4 Ergebnisse 42
4.1 Die Wirkung von Mitomycin C auf den Zellzyklus von V79-Zellen 42
4.1.1 Überlebensraten und Vitalität nach Exposition gegen Mitomycin 42
4.1.2 Veränderungen des Zellzyklus durch Mitomycin 44
4.2 Die Wirkung von 2-Hydroxyethylmethacrylat auf den Zellzyklus 48
4.2.1 Überlebensraten und Vitalität von V79-Zellen nach Exposition gegen
2-Hydroxyethylmethacrylat 48
4.2.2 Veränderungen des Zellzyklus durch 2-Hydroxyethylmethacrylat 50
4.3 Die Wirkung von Triethylenglycoldimethacrylat auf den Zellzyklus 53
4.3.1 Überlebensraten und Vitalität von V79-Zellen nach
Exposition gegen Triethylenglycoldimethacrylat 53
4.3.2 Veränderungen des Zellzyklus durch Triethylenglycoldimethacrylat 55
10
5 Diskussion 60
5.1 Zellen reagieren auf DNA-Schaden durch genotoxische
Substanzen mit einer VerzOgerung des Zellzyklus 60
5.2 Die Wirkung von Mitomycin C auf den Zellzyklus von V79-Zellen 62
5.3 Triethylenglycoldimethacrylat induziert erne VerzOgerung des
Zellzyklus von V79-Zellen 63
5 4 Die Wirkung von 2-Hydroxyethylmethacrylat (HEMA)
auf den Zellzyklus von V79-Zellen 65
5.5 Die Wirkung von TEGDMA und HEMA auf den
Zellzyklus anderer Zelliimen 66
5.6 Vergleich der Effekte von TEGDMA und HEMA
mit anderen genotoxischen Agenzien 69
5.7 Klinische Relevanz der molekularen Toxikologie von Monomeren 73
6 Zusammenfassung 75
7 Literaturverzeichnis 77
8 Lebenslauf 91
9 Danksagung 92
u
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Titel: Analysen des Zellzyklus nach Exposition von Säugetierzellen gegen gentoxische Komponenten zahnärzt
Autor: Altmannsberger, Inge
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Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 10
1.1 Der Zellzyklus eukaryontischer Zellen 10
1.2 Regulation des Zellzyklus eukaryontischer Zellen 11
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1.2.3 Die Kontrollpunkte des Zellzyklus 12
1.2.3.1 Gl-Kontrollpunkt 14
1.2.3.2 S-Kontrollpunkt 17
1.2.3.3 G2-Kontrollpunkt 17
1.3 Veränderungen des Zellzyklus durch genotoxische Agenzien 20
1.4 Mutagenität zahnärztlicher Komposite 23
2 Fragestellung 24
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3.2 Methoden 29
3.2.1 Zellkultur 29
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3.2.2 Testsubstanzen 29
3.2.3 Exposition von V79-Zellen gegen genotoxische Substanzen 29
3.2.3.1 Bestimmung der Zellzahl 31
3.2.3.2 Bestimmung der Vitalität 31
3.2.3.3 Analyse des Zellzyklus 31
3.2.4 Durchflusszytometrie 32
3.2.4.1 Prinzip der durchflusszytometrischen Messtechnik 32
3.2.4.2 DNA-Farbstoffe 32
3.2.4.3 DNA-Bestimmung in der Durchflusszytometrie 33
3.2.4.4 Interpretation der Lichtsignale 34
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3.2.4.6 Datenverarbeitung und Darstellung 35
3.2.4.7 Das Computerprogramm Cell Quest 39
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3.2.4.9 Berechnungen mit der Software Multicyclefor Windows 41
3.2.4.10 Datenanalyse und grafische Darstellung 41
4 Ergebnisse 42
4.1 Die Wirkung von Mitomycin C auf den Zellzyklus von V79-Zellen 42
4.1.1 Überlebensraten und Vitalität nach Exposition gegen Mitomycin 42
4.1.2 Veränderungen des Zellzyklus durch Mitomycin 44
4.2 Die Wirkung von 2-Hydroxyethylmethacrylat auf den Zellzyklus 48
4.2.1 Überlebensraten und Vitalität von V79-Zellen nach Exposition gegen
2-Hydroxyethylmethacrylat 48
4.2.2 Veränderungen des Zellzyklus durch 2-Hydroxyethylmethacrylat 50
4.3 Die Wirkung von Triethylenglycoldimethacrylat auf den Zellzyklus 53
4.3.1 Überlebensraten und Vitalität von V79-Zellen nach
Exposition gegen Triethylenglycoldimethacrylat 53
4.3.2 Veränderungen des Zellzyklus durch Triethylenglycoldimethacrylat 55
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5 Diskussion 60
5.1 Zellen reagieren auf DNA-Schaden durch genotoxische
Substanzen mit einer VerzOgerung des Zellzyklus 60
5.2 Die Wirkung von Mitomycin C auf den Zellzyklus von V79-Zellen 62
5.3 Triethylenglycoldimethacrylat induziert erne VerzOgerung des
Zellzyklus von V79-Zellen 63
5 4 Die Wirkung von 2-Hydroxyethylmethacrylat (HEMA)
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5.5 Die Wirkung von TEGDMA und HEMA auf den
Zellzyklus anderer Zelliimen 66
5.6 Vergleich der Effekte von TEGDMA und HEMA
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