Vergleichende Immunphänotypisierung von Monozyten bei symptomatischen und asymptomatischen Atopikern:
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| Published: |
2006
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5
- Inhaltsverzeichnis -
AbkUrzungsverzeichnis: 7
1. Einleitung: 9
1.1 Der hochaffine IgE-Rezeptor FceRI 12
1.2 CD(Clusterofdifferentiation) 16
1.3 Die Allergie 19
1.4 Die allergische Rhinitis (Rhinitis allergica) 21
1.4.1 Rhinitis allergica saisonalis (Heufieber, Heuschnupfen, Pollinosis) 21
1.4.2 Rhinitis allergica perennialis 22
1.5 Zielsetzung dieser Arbeit 23
2. Material und Methoden: 24
2.1 Material 24
2.1.1 Puffer und Lösungen 24
2.1.2 Chemikalien 25
2.1.3 Antikörper für FACS-Färbungen 25
2.1.4 Geräte 28
2.1.5 Sonstiges 29
2.2 Methoden 30
2.2.1 Probanden und diagnositische Kriterien 30
2.2.2 Blutentnahme und Aufbewahrung 33
2.2.3 Isolierung von peripheren mononukleären Zellen (PBMC) 33
2.2.4 Immunfluoreszenz und Durchflußzytometrie 35
2.2.4.1 Allgemein 35
2.2.4.2 Gerateaufbau des Durchflußzytometers 36
2.2.4.3 Messung der Lichtstreuung 37
2.2.4.4 Messung der Fluoreszenz 38
2.2.4.5 Signalverarbeitung 40
2.2.4.6 Datenauswertung 41
2.2.4.7 Durchführung der FACS-Farbung 47
6
2.2.4.7.1 Zweifarbenanalyse 47
2.2.4.7.2 Dreifarbenanalyse 47
2.2.4.7.3 CD14+Monozyten (Zweifarbenanalyse) 47
2.2.4.7.4 FceRI+CD14+Monozyten (Dreifarbenanalyse) 48
2.2.4.7.5 Statistische Analyse 48
3. Ergebnisse: 49
3.1 Klinische Daten der Probanden (SA, AA und NA) 49
3.2 Durchfiusszytometrische Untersuchung der Monozyten 50
3.2.1 Detaillierte phänotypische Analyse von CD 14+Monozyten und FcsRICD14+
Monozyten der 3 Probandengruppen (SA, AA und NA) 50
3.2.1.1 CD14+Monozyten 50
3.2.1.2 Fc£RI+CD14+Monozyten 62
3.2.2 Durchfiusszytometrische Untersuchung der Monozytensubpopulationen 66
4. Diskussion: 70
5. Zusammenfassung: 75
6. Literaturverzeichnis: 77
7. Danksagung: 91
8. Lebenslauf: 92
|
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I
5
- Inhaltsverzeichnis -
AbkUrzungsverzeichnis: 7
1. Einleitung: 9
1.1 Der hochaffine IgE-Rezeptor FceRI 12
1.2 CD(Clusterofdifferentiation) 16
1.3 Die Allergie 19
1.4 Die allergische Rhinitis (Rhinitis allergica) 21
1.4.1 Rhinitis allergica saisonalis (Heufieber, Heuschnupfen, Pollinosis) 21
1.4.2 Rhinitis allergica perennialis 22
1.5 Zielsetzung dieser Arbeit 23
2. Material und Methoden: 24
2.1 Material 24
2.1.1 Puffer und Lösungen 24
2.1.2 Chemikalien 25
2.1.3 Antikörper für FACS-Färbungen 25
2.1.4 Geräte 28
2.1.5 Sonstiges 29
2.2 Methoden 30
2.2.1 Probanden und diagnositische Kriterien 30
2.2.2 Blutentnahme und Aufbewahrung 33
2.2.3 Isolierung von peripheren mononukleären Zellen (PBMC) 33
2.2.4 Immunfluoreszenz und Durchflußzytometrie 35
2.2.4.1 Allgemein 35
2.2.4.2 Gerateaufbau des Durchflußzytometers 36
2.2.4.3 Messung der Lichtstreuung 37
2.2.4.4 Messung der Fluoreszenz 38
2.2.4.5 Signalverarbeitung 40
2.2.4.6 Datenauswertung 41
2.2.4.7 Durchführung der FACS-Farbung 47
6
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2.2.4.7.5 Statistische Analyse 48
3. Ergebnisse: 49
3.1 Klinische Daten der Probanden (SA, AA und NA) 49
3.2 Durchfiusszytometrische Untersuchung der Monozyten 50
3.2.1 Detaillierte phänotypische Analyse von CD 14+Monozyten und FcsRICD14+
Monozyten der 3 Probandengruppen (SA, AA und NA) 50
3.2.1.1 CD14+Monozyten 50
3.2.1.2 Fc£RI+CD14+Monozyten 62
3.2.2 Durchfiusszytometrische Untersuchung der Monozytensubpopulationen 66
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