Chronische Urtikaria - eine Autoimmunerkrankung?: Prävalenz und funktionelle Relevanz von Autoantikörpern gegen den hochaffinen Fe epsilon Rezeptor I bei Urtikaria-Patienten
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2005
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Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 1
1.1 Definition der Urtikaria 1
1.2 Ätiologie der Urtikaria 3
1.3 Pathogenese der Urtikaria 4
1.3.1 Hochaffiner Fc epsilon Rezeptor I (FceRI) 4
1.3.2 Autoantikörper 5
2 Zielsetzung der Arbeit 7
3 Material und Methoden 9
Teil I - Datenexploration 9
3.1 Patienten und Probanden 9
3.1.1 Patientenkollektiv und Gruppierung 9
3.1.2 Vergleichsgruppen 12
Teil II - Experimenteller Teil 13
3.2 Herstellung des Fc epsilon Rezeptors I (FceRI) 13
3.2.1 Gentechnologische Konstruktion 13
3.2.2 Heterologe Expression 14
3.2.3 Proteinaufreinigung 15
3.3 Immunoblot Analysen 19
3.3.1 Gel-Elektrophorese 19
3.3.2 Herstellung der Blotstreifen durch Westernblot 19
3.3.3 Serumgewinnung 20
3.3.4 Inkubation der Blotstreifen mit Serumproben 21
3.3.5 Auswertung der Westemblotstreifen 25
3.4 Funktionelle in vitro Histamin-Freisetzung 26
3.5 Material 28
3.5.1 Geräte und Chemikalien 28
3.5.2 Zusammensetzung der Reagenzien 30
3.6 Datenauswertung und statistische Analyse 32
4 Ergebnisse 33
4.1 Epidemiologie 33
4.2 Ergebnisse des Immunoblots 37
4.2.1 Anti-FccRI-Antikörper der Isotypen IgG, IgA und IgM bei Urtikaria-Patienten 37
4.2.2 Anti-FcERI-Antikörper der Isotypen IgG, IgA und IgM bei Vergleichsgruppen 40
4.2.3 Anti-FceRI-Antikörper des Isotyps IgE 43
4.2.4 Sensitivität und Spezifität des entwickelten Immunoblots 44
4.3 FunktionellerHistamin-Freisetzungstest 45
4.4 Andere untersuchte Merkmale 48
4.4.1 Helicobacter pylori Infektionen 48
4.4.2 Schilddrüsenerkrankungen 49
4.4.3 Pathogene Keime und Pilze 50
4.4.4 Weitere Autoantikörperdiagnostik 50
II
5 Diskussion 51
5.1 Methoden 51
5.2 Epidemiologie 54
5.3 Ergebnisse des Immunoblots 54
5.4 Funktioneller Histamin-Freisetzungstest 58
5.5 Andere Merkmale 59
5.6 Ausblick 62
6 Zusammenfassung 63
7 Literaturverzeichnis 65
8 Anhang 74
9 Danksagung 90
10 Lebenslauf 91
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I
Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 1
1.1 Definition der Urtikaria 1
1.2 Ätiologie der Urtikaria 3
1.3 Pathogenese der Urtikaria 4
1.3.1 Hochaffiner Fc epsilon Rezeptor I (FceRI) 4
1.3.2 Autoantikörper 5
2 Zielsetzung der Arbeit 7
3 Material und Methoden 9
Teil I - Datenexploration 9
3.1 Patienten und Probanden 9
3.1.1 Patientenkollektiv und Gruppierung 9
3.1.2 Vergleichsgruppen 12
Teil II - Experimenteller Teil 13
3.2 Herstellung des Fc epsilon Rezeptors I (FceRI) 13
3.2.1 Gentechnologische Konstruktion 13
3.2.2 Heterologe Expression 14
3.2.3 Proteinaufreinigung 15
3.3 Immunoblot Analysen 19
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3.3.2 Herstellung der Blotstreifen durch Westernblot 19
3.3.3 Serumgewinnung 20
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3.3.5 Auswertung der Westemblotstreifen 25
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3.5.1 Geräte und Chemikalien 28
3.5.2 Zusammensetzung der Reagenzien 30
3.6 Datenauswertung und statistische Analyse 32
4 Ergebnisse 33
4.1 Epidemiologie 33
4.2 Ergebnisse des Immunoblots 37
4.2.1 Anti-FccRI-Antikörper der Isotypen IgG, IgA und IgM bei Urtikaria-Patienten 37
4.2.2 Anti-FcERI-Antikörper der Isotypen IgG, IgA und IgM bei Vergleichsgruppen 40
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4.2.4 Sensitivität und Spezifität des entwickelten Immunoblots 44
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4.4.1 Helicobacter pylori Infektionen 48
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4.4.3 Pathogene Keime und Pilze 50
4.4.4 Weitere Autoantikörperdiagnostik 50
II
5 Diskussion 51
5.1 Methoden 51
5.2 Epidemiologie 54
5.3 Ergebnisse des Immunoblots 54
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