Untersuchungen zur Genexpression der Chemokinrezeptoren CCR3, CCR4 und CCR5 in Läsionen der Psoriasis:
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2005
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 1
1.1 Die Schuppenflechte 1
1.2 Histologische Charakteristika der Psoriasis vulgaris 2
1.3 Die Rolle der T-Lymphozyten in der Pathogenese der Psoriasis vulgaris 2
1.4 Antigenpräsentierende Zellen in psoriatische Läsionen 3
1.5 Zytokine in psoriatischen Läsionen 4
1.5.1 Chemokine 4
1.5.2 Chemokinrezeptoren 5
1.6 Zielsetzung der vorliegenden Arbeit 6
2. Material und Methoden 7
2.1 Verwendete Chemikalien, Verbrauchsgegenstände und Geräte 7
2.2 Entnahme der Gewebeproben 8
2.3 Herstellung der Gewebeschnitte und Präparation der Objektträger 8
2.4 In-situ Hybridisierung 8
2.4.1 Sondenbereitstellung 9
2.4.2 Linearisierung der inserttragenden Plasmide und DNA-Extraktion 9
2.4.3 Radioaktive Markierung der Sonden 10
2.4.4 Hydrolyse der radioaktiv markierten Sonden 11
2.4.5 Acetylierung der Gewebeschnitte 12
2.4.6 Prähybridisierung der Gewebeschnitte 12
2.4.7 Hybridisierung der Gewebeproben mit den radioaktiv markierten RNA-Sonden 13
2.4.8 Entfernung und Verdau der überschüssigen RNA-Sonden 14
2.4.9 Dehydrierung der hybridisierten Objektträger 14
2.5 Emulsionsautoradiographie 14
2.6 Hämatoxylin-Eosin-Färbung der Gewebeschnitte 15
2.7 Mikroskopie und Fotographie der Gewebeschnitte 15
3. Ergebnisse 16
3.1 CCR4 mRNA ist an drei unterschiedlichen Lokalisationen in psoriatischen 16
Läsionen nachweisbar
3.2 CCR5 mRNA ist an zwei unterschiedlichen Lokalisationen in psoriatischen 22
Läsionen nachweisbar
3.3 CCR3 mRNA ist mit Hilfe der in-situ Hybridisierungsexperimente in 28
psoriatischen Läsionen nicht nachweisbar
4. Diskussion 31
4.1 Die pathogenetische Bedeutung der Chemokine und ihrer Rezeptoren in der 31
Pathogenese der Psoriasis vulgaris
4.2 T-Lymphozyten in psoriatischen Läsionen 32
4.3 Charakterisierung der Rolle der T-Lymphozyten in psoriatischen Läsionen 34
mit Hilfe von Tiermodellen
4.4 CCR4 mRNA wird in psoriatischen Läsionen exprimiert 35
4.5 CCR5 mRNA wird in psoriatischen Läsionen exprimiert 38
4.6 Eine CCR3 mRNA-Expression ist in psoriatischen Läsionen nicht nachweisbar 41
5. Zusammenfassung 42
6. Literaturverzeichnis 43
7. Danksagung 57
8. Lebenslauf 58
|
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Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 1
1.1 Die Schuppenflechte 1
1.2 Histologische Charakteristika der Psoriasis vulgaris 2
1.3 Die Rolle der T-Lymphozyten in der Pathogenese der Psoriasis vulgaris 2
1.4 Antigenpräsentierende Zellen in psoriatische Läsionen 3
1.5 Zytokine in psoriatischen Läsionen 4
1.5.1 Chemokine 4
1.5.2 Chemokinrezeptoren 5
1.6 Zielsetzung der vorliegenden Arbeit 6
2. Material und Methoden 7
2.1 Verwendete Chemikalien, Verbrauchsgegenstände und Geräte 7
2.2 Entnahme der Gewebeproben 8
2.3 Herstellung der Gewebeschnitte und Präparation der Objektträger 8
2.4 In-situ Hybridisierung 8
2.4.1 Sondenbereitstellung 9
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2.4.3 Radioaktive Markierung der Sonden 10
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2.4.7 Hybridisierung der Gewebeproben mit den radioaktiv markierten RNA-Sonden 13
2.4.8 Entfernung und Verdau der überschüssigen RNA-Sonden 14
2.4.9 Dehydrierung der hybridisierten Objektträger 14
2.5 Emulsionsautoradiographie 14
2.6 Hämatoxylin-Eosin-Färbung der Gewebeschnitte 15
2.7 Mikroskopie und Fotographie der Gewebeschnitte 15
3. Ergebnisse 16
3.1 CCR4 mRNA ist an drei unterschiedlichen Lokalisationen in psoriatischen 16
Läsionen nachweisbar
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3.3 CCR3 mRNA ist mit Hilfe der in-situ Hybridisierungsexperimente in 28
psoriatischen Läsionen nicht nachweisbar
4. Diskussion 31
4.1 Die pathogenetische Bedeutung der Chemokine und ihrer Rezeptoren in der 31
Pathogenese der Psoriasis vulgaris
4.2 T-Lymphozyten in psoriatischen Läsionen 32
4.3 Charakterisierung der Rolle der T-Lymphozyten in psoriatischen Läsionen 34
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4.4 CCR4 mRNA wird in psoriatischen Läsionen exprimiert 35
4.5 CCR5 mRNA wird in psoriatischen Läsionen exprimiert 38
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5. Zusammenfassung 42
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