Quantifizierung der Speichelproteinadsorption an zahnärztlichen Werkstoffoberflächen:
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2005
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis II
Inhaltsverzeichnis
Abbildungsverzeichnis IV
Abkürzungsverzeichnis V
1 Einleitung 1
2 Literaturübersicht 2
2.1 Speichel 2
2.1.1 Allgemeine Zusammensetzung und Funktion 2
2.1.2 Anorganische Bestandteile 3
2.1.3 Organische Bestandteile 4
2.1.4 Zusätzliche Substanzen und Bestandteile im Speichel 6
2.1.5 Pellikelbildung 7
2.2 Zahnärztliche Werkstoffe 8
2.3 Oberflächenqualität und Adsorption 14
3 Fragestellung 17
4 Material und Methoden 18
4.1 Gewinnung der Speichelproben 18
4.2 Vorversuche 18
4.2.1 Herstellung der Chemikalien und Lösungen 18
4.2.2 Proteinnachweis mit NHS-Digoxigenin auf Membranen 20
4.2.3 Proteinnachweis mit NHS-Digoxigenin auf Kunststoffplättchen 21
4.2.4 Modifizierter Proteinnachweis mit NHS-Digoxigenin auf Kunststoffplättchen.... 22
4.2.5 Proteinnachweis auf Kunststoffplättchen mit Methanolfixierung 23
4.2.6 Speichelproteinnachweis mit NHS-Digoxigenin auf Tüpfelschalen 24
4.2.7 Proteinnachweis mit NHS-Digoxigenin auf Glasobjektträger 24
4.2.8 Etablierung des Speichelproteinnachweises mittels Chemifiuoreszenz 25
4.2.9 Proteinnachweis mittels Chemifiuoreszenz auf Nitrozellulose Membran 26
4.2.10 Optimierung der ECF-Entwicklung auf definierten Prüfkörpern 27
4.2.11 Untersuchung verschiedener Waschreagenzien 28
4.2.12 Prüfkörperherstellung 29
4.2.13 Vorbereitende Maßnahmen für die REM-Aufhahmen 31
4.3 Hauptversuch 31
4.4 Statistische Auswertung 35
Inhaltsverzeichnis III
5 Ergebnisse 37
5.1 Proteinadsorption an verschiedenen Werkstoffoberflächen 37
5.2 Proteinverdünnungsreihen 41
5.3. Proteinstandardkurven 43
5.4 Graphische Darstellung der Lumineszenzmessungen 46
5.5 Quantifizierung der Proteinadhäsion auf W erkstoffoberflächen 50
6 Bildernachweis 54
6.1 Auflichtbilder 54
6.2 Dia - Aufnahmen 59
6.3 Rasterelektronenmikroskopische Aufnahmen 60
7 Diskussion 68
7.1 Diskussion der Testmaterialien und -methoden 68
7.2 Diskussion der Ergebnisse 71
7.3 Prüfkörperherstellung 72
8 Zusammenfassung 74
9 Literaturverzeichnis 75
10 Anhang 85
10.1 Labormaterialien 85
10.2 Laborgeräte 86
10.3 Software 87
11 Danksagung 88
12 Lebenslauf 90
Abbildungsverzeichnis IV
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 1: Proteinnachweis mittels Chemifluoreszenz auf Nitrozellulose Membranen... 27
Abbildung 2: Schematische Darstellung einer einzelnen Prüfkörperanordnung 30
Abbildung 3: Proteinadsorption an verschiedenen Werkstoffoberflächen 38
Abbildung 4: Proteinadsorption an verschiedenen Werkstoffoberflächen 39
Abbildung 5: Proteinadsorption an verschiedenen Werkstoffoberflächen 40
Abbildung 6: Proteinverdünnungsreihe beginnend mit Speichel 1:1000 ausverdünnt 41
Abbildung 7: Proteinverdünnungsreihen beginnend mit Speichel 1:250 ausverdünnt 42
Abbildung 8: Proteinstandardkurve 1 43
Abbildung 9: Proteinstadardkurve 2 44
Abbildung 10: Proteinstandardkurve 3 44
Abbildung 11: Lumineszenzwerte nach Proteinadsorbtion bei 120 grit 46
Abbildung 12: Lumineszenz werte nach Proteinadsorbtion bei 240 grit 47
Abbildung 13: Lumineszenzwerte nach Proteinadsorbtion bei 600 grit 47
Abbildung 14: Lumineszenzwerte nach Proteinadsorbtion bei 4000 grit 48
Abbildung 15: Adsorbierte Proteinmenge bei 120 grit 50
Abbildung 16: Adsorbierte Proteinmenge bei 240 grit 51
Abbildung 17: Adsorbierte Proteinmenge bei 600 grit 51
Abbildung 18: Adsorbierte Proteinmenge bei 4000 grit 52
Abbildung 19: Auflichtbilder - 120 grit 55
Abbildung 20: Auflichtbilder - 240 grit 56
Abbildung 21: Auflichtbilder-600 grit 57
Abbildung 22: Auflichtbilder - 4000 grit 58
Abbildung 23: Dia-Aufnahmen von unbehandelten Prüfkörpern verschiedener Rauhigkeit.. 59
Abbildung 24: REM-Aufnahmen - Phosphat Zement 61
Abbildung 25: REM-Aufnahmen - Glasionomer Zement 62
Abbildung 26: REM-Aufnahmen - Komposit ungefüllt 63
Abbildung 27: REM-Aufnahmen - Komposit gefüllt 64
Abbildung 28: REM-Aufnahmen - Acrylat 65
Abbildung 29: REM-Aufnahmen - Paraffinwachs 66
Abbildung 30: REM-Aufnahmen - Silikon 67
|
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Inhaltsverzeichnis II
Inhaltsverzeichnis
Abbildungsverzeichnis IV
Abkürzungsverzeichnis V
1 Einleitung 1
2 Literaturübersicht 2
2.1 Speichel 2
2.1.1 Allgemeine Zusammensetzung und Funktion 2
2.1.2 Anorganische Bestandteile 3
2.1.3 Organische Bestandteile 4
2.1.4 Zusätzliche Substanzen und Bestandteile im Speichel 6
2.1.5 Pellikelbildung 7
2.2 Zahnärztliche Werkstoffe 8
2.3 Oberflächenqualität und Adsorption 14
3 Fragestellung 17
4 Material und Methoden 18
4.1 Gewinnung der Speichelproben 18
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4.2.1 Herstellung der Chemikalien und Lösungen 18
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4.2.7 Proteinnachweis mit NHS-Digoxigenin auf Glasobjektträger 24
4.2.8 Etablierung des Speichelproteinnachweises mittels Chemifiuoreszenz 25
4.2.9 Proteinnachweis mittels Chemifiuoreszenz auf Nitrozellulose Membran 26
4.2.10 Optimierung der ECF-Entwicklung auf definierten Prüfkörpern 27
4.2.11 Untersuchung verschiedener Waschreagenzien 28
4.2.12 Prüfkörperherstellung 29
4.2.13 Vorbereitende Maßnahmen für die REM-Aufhahmen 31
4.3 Hauptversuch 31
4.4 Statistische Auswertung 35
Inhaltsverzeichnis III
5 Ergebnisse 37
5.1 Proteinadsorption an verschiedenen Werkstoffoberflächen 37
5.2 Proteinverdünnungsreihen 41
5.3. Proteinstandardkurven 43
5.4 Graphische Darstellung der Lumineszenzmessungen 46
5.5 Quantifizierung der Proteinadhäsion auf W'erkstoffoberflächen 50
6 Bildernachweis 54
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6.2 Dia - Aufnahmen 59
6.3 Rasterelektronenmikroskopische Aufnahmen 60
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7.1 Diskussion der Testmaterialien und -methoden 68
7.2 Diskussion der Ergebnisse 71
7.3 Prüfkörperherstellung 72
8 Zusammenfassung 74
9 Literaturverzeichnis 75
10 Anhang 85
10.1 Labormaterialien 85
10.2 Laborgeräte 86
10.3 Software 87
11 Danksagung 88
12 Lebenslauf 90
Abbildungsverzeichnis IV
Abbildungsverzeichnis
Abbildung 1: Proteinnachweis mittels Chemifluoreszenz auf Nitrozellulose Membranen. 27
Abbildung 2: Schematische Darstellung einer einzelnen Prüfkörperanordnung 30
Abbildung 3: Proteinadsorption an verschiedenen Werkstoffoberflächen 38
Abbildung 4: Proteinadsorption an verschiedenen Werkstoffoberflächen 39
Abbildung 5: Proteinadsorption an verschiedenen Werkstoffoberflächen 40
Abbildung 6: Proteinverdünnungsreihe beginnend mit Speichel 1:1000 ausverdünnt 41
Abbildung 7: Proteinverdünnungsreihen beginnend mit Speichel 1:250 ausverdünnt 42
Abbildung 8: Proteinstandardkurve 1 43
Abbildung 9: Proteinstadardkurve 2 44
Abbildung 10: Proteinstandardkurve 3 44
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Abbildung 13: Lumineszenzwerte nach Proteinadsorbtion bei 600 grit 47
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Abbildung 15: Adsorbierte Proteinmenge bei 120 grit 50
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Abbildung 18: Adsorbierte Proteinmenge bei 4000 grit 52
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Abbildung 20: Auflichtbilder - 240 grit 56
Abbildung 21: Auflichtbilder-600 grit 57
Abbildung 22: Auflichtbilder - 4000 grit 58
Abbildung 23: Dia-Aufnahmen von unbehandelten Prüfkörpern verschiedener Rauhigkeit. 59
Abbildung 24: REM-Aufnahmen - Phosphat Zement 61
Abbildung 25: REM-Aufnahmen - Glasionomer Zement 62
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Abbildung 27: REM-Aufnahmen - Komposit gefüllt 64
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