Expression einer dominant-negativen Mutante des TRPC6-Kationenkanals in glatten Muskelzellen:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2005
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Marburg, Univ., Diss., 2005 |
| Beschreibung: | 61 Bl. Ill., graph. Darst. 21 cm |
Internformat
MARC
| LEADER | 00000nam a2200000 c 4500 | ||
|---|---|---|---|
| 001 | BV021267096 | ||
| 003 | DE-604 | ||
| 005 | 20060222 | ||
| 007 | t | ||
| 008 | 051215s2005 gw ad|| m||| 00||| ger d | ||
| 015 | |a 05,H08,1264 |2 dnb | ||
| 016 | 7 | |a 975178970 |2 DE-101 | |
| 035 | |a (OCoLC)255095749 | ||
| 035 | |a (DE-599)BVBBV021267096 | ||
| 040 | |a DE-604 |b ger |e rakddb | ||
| 041 | 0 | |a ger | |
| 044 | |a gw |c XA-DE | ||
| 049 | |a DE-355 | ||
| 084 | |a 610 |2 sdnb | ||
| 100 | 1 | |a Benecke, Holger |d 1976- |e Verfasser |0 (DE-588)130061379 |4 aut | |
| 245 | 1 | 0 | |a Expression einer dominant-negativen Mutante des TRPC6-Kationenkanals in glatten Muskelzellen |c vorgelegt von Holger Benecke |
| 264 | 1 | |c 2005 | |
| 300 | |a 61 Bl. |b Ill., graph. Darst. |c 21 cm | ||
| 336 | |b txt |2 rdacontent | ||
| 337 | |b n |2 rdamedia | ||
| 338 | |b nc |2 rdacarrier | ||
| 500 | |a Marburg, Univ., Diss., 2005 | ||
| 655 | 7 | |0 (DE-588)4113937-9 |a Hochschulschrift |2 gnd-content | |
| 856 | 4 | 2 | |m HBZ Datenaustausch |q application/pdf |u http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=014588265&sequence=000002&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |3 Inhaltsverzeichnis |
| 999 | |a oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-014588265 | ||
Datensatz im Suchindex
| _version_ | 1804135045129043968 |
|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
Abkürzungsverzeichnis 6
1 Einleitung 7
1.1 Die rezeptoraktivierten Kationenkanäle TRP, TRPL und TRPy aus
Drosophila 1
1.2 Homologe TRP-Kanäle in Säugern 9
1.3 Aktivierungsmechanismen von TRPC-Kanälen 12
1.4 Multimerisierungspotential der TRPC-Kanäle 14
1.5 Funktion von TRPC6 in glatten Muskelzellen 16
1.6 Zielsetzung dieser Arbeit 17
2 Material und Methoden 18
2.1 Material 18
2.2 Molekularbiologische Methoden 19
2.2.1 Präparation von Plasmid-DNA 19
2.2.1.1 Minipräparation 19
2.2.1.2 Midipräparation 20
2.2.2 Konzentrationsbestimmung von DNA 20
2.2.3 Restriktionsverdau 20
2.2.4 Agarosegel-Elektrophorese 21
2.2.5 Fällen und Waschen von DNA 21
2.2.6 KJonierung von DNA-Fragmenten 22
2.2.7 Extraktion von DNA-Fragmenten mit Hilfe von Glasmilch 22
23 Proteinbiochemische Methoden 24
2.3.1 Proteingelelektrophorese 24
2.3.2 Western-Blot 25
2.4 Zellbiologische Methoden 26
2.4.1 Kultivierung von verschiedenen Zelllinien 26
2.4 2 Transfektionsmethoden 27
2.4.2.1 Liposomale Transfektion 27
2.4 2.2 Elektroporation 28
2.4.3 Fluorimetnsche Messung der intrazellulärer lonenkonzentrationen 29
2.4.3.1 Beladung von Zellen mit Fura-2 29
2.4.3.2 Messung von [Ca2*], mittels Fura-2 30
3
3 Ergebnisse 31
3.1 Konstruktion eines Expressionsvektors 31
3.2 Transfektionen 33
3.2.1 Liposomale Transfektion von differenzierte HL-60-Zellen 33
3.2.2 Liposomale Transfektion von bronchialen, glatten
Muskelzellen des Menschen 34
3.2.3 Transfektion von humanen glatten Muskelzellen durch Elektroporation 38
3.3 Messung des rezeptoraktivierten Calciumeinstroms in humane 42
bronchiale Muskelzellen
3.3.1 Messung des Calciumeinstroms in liposomal transfizierte Zellen 42
3.3.2 Messung des Calciumeinstroms in durch Elektroporation
transfizierte Zellen 44
3.4 Direkte Aktivierung von glatten Muskelzellen durch OAG 45
4 Diskussion 47
4.1 Transfektionsvektor 47
4.2 Transfektionen 48
4.2.1 HL-60 Zellen 48
4.2.2 Humane bronchiale glatte Muskelzellen 48
4.2.3 Morphologische Veränderungen nach Transfektion 49
4.3 Rezeptoraktivierter Calciumeinstrom in bronchiale
glatte Muskelzellen SO
4.4 Direkte Aktivierung von glatten Muskelzellen durch OAG 51
4
5 Zusammenfassung 52
6 Literatur 54
7 Lebenslauf 58
8 Akademische Lehrer 59
9 Danksagung 60
10 Ehrenwörtliche Erklärung 61
5
|
| adam_txt |
Inhaltsverzeichnis
Abkürzungsverzeichnis 6
1 Einleitung 7
1.1 Die rezeptoraktivierten Kationenkanäle TRP, TRPL und TRPy aus
Drosophila 1
1.2 Homologe TRP-Kanäle in Säugern 9
1.3 Aktivierungsmechanismen von TRPC-Kanälen 12
1.4 Multimerisierungspotential der TRPC-Kanäle 14
1.5 Funktion von TRPC6 in glatten Muskelzellen 16
1.6 Zielsetzung dieser Arbeit 17
2 Material und Methoden 18
2.1 Material 18
2.2 Molekularbiologische Methoden 19
2.2.1 Präparation von Plasmid-DNA 19
2.2.1.1 Minipräparation 19
2.2.1.2 Midipräparation 20
2.2.2 Konzentrationsbestimmung von DNA 20
2.2.3 Restriktionsverdau 20
2.2.4 Agarosegel-Elektrophorese 21
2.2.5 Fällen und Waschen von DNA 21
2.2.6 KJonierung von DNA-Fragmenten 22
2.2.7 Extraktion von DNA-Fragmenten mit Hilfe von Glasmilch 22
23 Proteinbiochemische Methoden 24
2.3.1 Proteingelelektrophorese 24
2.3.2 Western-Blot 25
2.4 Zellbiologische Methoden 26
2.4.1 Kultivierung von verschiedenen Zelllinien 26
2.4 2 Transfektionsmethoden 27
2.4.2.1 Liposomale Transfektion 27
2.4 2.2 Elektroporation 28
2.4.3 Fluorimetnsche Messung der intrazellulärer lonenkonzentrationen 29
2.4.3.1 Beladung von Zellen mit Fura-2 29
2.4.3.2 Messung von [Ca2*], mittels Fura-2 30
3
3 Ergebnisse 31
3.1 Konstruktion eines Expressionsvektors 31
3.2 Transfektionen 33
3.2.1 Liposomale Transfektion von differenzierte HL-60-Zellen 33
3.2.2 Liposomale Transfektion von bronchialen, glatten
Muskelzellen des Menschen 34
3.2.3 Transfektion von humanen glatten Muskelzellen durch Elektroporation 38
3.3 Messung des rezeptoraktivierten Calciumeinstroms in humane 42
bronchiale Muskelzellen
3.3.1 Messung des Calciumeinstroms in liposomal transfizierte Zellen 42
3.3.2 Messung des Calciumeinstroms in durch Elektroporation
transfizierte Zellen 44
3.4 Direkte Aktivierung von glatten Muskelzellen durch OAG 45
4 Diskussion 47
4.1 Transfektionsvektor 47
4.2 Transfektionen 48
4.2.1 HL-60 Zellen 48
4.2.2 Humane bronchiale glatte Muskelzellen 48
4.2.3 Morphologische Veränderungen nach Transfektion 49
4.3 Rezeptoraktivierter Calciumeinstrom in bronchiale
glatte Muskelzellen SO
4.4 Direkte Aktivierung von glatten Muskelzellen durch OAG 51
4
5 Zusammenfassung 52
6 Literatur 54
7 Lebenslauf 58
8 Akademische Lehrer 59
9 Danksagung 60
10 Ehrenwörtliche Erklärung 61
5 |
| any_adam_object | 1 |
| any_adam_object_boolean | 1 |
| author | Benecke, Holger 1976- |
| author_GND | (DE-588)130061379 |
| author_facet | Benecke, Holger 1976- |
| author_role | aut |
| author_sort | Benecke, Holger 1976- |
| author_variant | h b hb |
| building | Verbundindex |
| bvnumber | BV021267096 |
| ctrlnum | (OCoLC)255095749 (DE-599)BVBBV021267096 |
| discipline | Medizin |
| discipline_str_mv | Medizin |
| format | Book |
| fullrecord | <?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?><collection xmlns="http://www.loc.gov/MARC21/slim"><record><leader>01218nam a2200325 c 4500</leader><controlfield tag="001">BV021267096</controlfield><controlfield tag="003">DE-604</controlfield><controlfield tag="005">20060222 </controlfield><controlfield tag="007">t</controlfield><controlfield tag="008">051215s2005 gw ad|| m||| 00||| ger d</controlfield><datafield tag="015" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">05,H08,1264</subfield><subfield code="2">dnb</subfield></datafield><datafield tag="016" ind1="7" ind2=" "><subfield code="a">975178970</subfield><subfield code="2">DE-101</subfield></datafield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(OCoLC)255095749</subfield></datafield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(DE-599)BVBBV021267096</subfield></datafield><datafield tag="040" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-604</subfield><subfield code="b">ger</subfield><subfield code="e">rakddb</subfield></datafield><datafield tag="041" ind1="0" ind2=" "><subfield code="a">ger</subfield></datafield><datafield tag="044" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">gw</subfield><subfield code="c">XA-DE</subfield></datafield><datafield tag="049" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-355</subfield></datafield><datafield tag="084" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">610</subfield><subfield code="2">sdnb</subfield></datafield><datafield tag="100" ind1="1" ind2=" "><subfield code="a">Benecke, Holger</subfield><subfield code="d">1976-</subfield><subfield code="e">Verfasser</subfield><subfield code="0">(DE-588)130061379</subfield><subfield code="4">aut</subfield></datafield><datafield tag="245" ind1="1" ind2="0"><subfield code="a">Expression einer dominant-negativen Mutante des TRPC6-Kationenkanals in glatten Muskelzellen</subfield><subfield code="c">vorgelegt von Holger Benecke</subfield></datafield><datafield tag="264" ind1=" " ind2="1"><subfield code="c">2005</subfield></datafield><datafield tag="300" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">61 Bl.</subfield><subfield code="b">Ill., graph. Darst.</subfield><subfield code="c">21 cm</subfield></datafield><datafield tag="336" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">txt</subfield><subfield code="2">rdacontent</subfield></datafield><datafield tag="337" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">n</subfield><subfield code="2">rdamedia</subfield></datafield><datafield tag="338" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">nc</subfield><subfield code="2">rdacarrier</subfield></datafield><datafield tag="500" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">Marburg, Univ., Diss., 2005</subfield></datafield><datafield tag="655" ind1=" " ind2="7"><subfield code="0">(DE-588)4113937-9</subfield><subfield code="a">Hochschulschrift</subfield><subfield code="2">gnd-content</subfield></datafield><datafield tag="856" ind1="4" ind2="2"><subfield code="m">HBZ Datenaustausch</subfield><subfield code="q">application/pdf</subfield><subfield code="u">http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=014588265&sequence=000002&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA</subfield><subfield code="3">Inhaltsverzeichnis</subfield></datafield><datafield tag="999" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-014588265</subfield></datafield></record></collection> |
| genre | (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content |
| genre_facet | Hochschulschrift |
| id | DE-604.BV021267096 |
| illustrated | Illustrated |
| index_date | 2024-07-02T13:43:31Z |
| indexdate | 2024-07-09T20:34:15Z |
| institution | BVB |
| language | German |
| oai_aleph_id | oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-014588265 |
| oclc_num | 255095749 |
| open_access_boolean | |
| owner | DE-355 DE-BY-UBR |
| owner_facet | DE-355 DE-BY-UBR |
| physical | 61 Bl. Ill., graph. Darst. 21 cm |
| publishDate | 2005 |
| publishDateSearch | 2005 |
| publishDateSort | 2005 |
| record_format | marc |
| spelling | Benecke, Holger 1976- Verfasser (DE-588)130061379 aut Expression einer dominant-negativen Mutante des TRPC6-Kationenkanals in glatten Muskelzellen vorgelegt von Holger Benecke 2005 61 Bl. Ill., graph. Darst. 21 cm txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Marburg, Univ., Diss., 2005 (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content HBZ Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=014588265&sequence=000002&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
| spellingShingle | Benecke, Holger 1976- Expression einer dominant-negativen Mutante des TRPC6-Kationenkanals in glatten Muskelzellen |
| subject_GND | (DE-588)4113937-9 |
| title | Expression einer dominant-negativen Mutante des TRPC6-Kationenkanals in glatten Muskelzellen |
| title_auth | Expression einer dominant-negativen Mutante des TRPC6-Kationenkanals in glatten Muskelzellen |
| title_exact_search | Expression einer dominant-negativen Mutante des TRPC6-Kationenkanals in glatten Muskelzellen |
| title_exact_search_txtP | Expression einer dominant-negativen Mutante des TRPC6-Kationenkanals in glatten Muskelzellen |
| title_full | Expression einer dominant-negativen Mutante des TRPC6-Kationenkanals in glatten Muskelzellen vorgelegt von Holger Benecke |
| title_fullStr | Expression einer dominant-negativen Mutante des TRPC6-Kationenkanals in glatten Muskelzellen vorgelegt von Holger Benecke |
| title_full_unstemmed | Expression einer dominant-negativen Mutante des TRPC6-Kationenkanals in glatten Muskelzellen vorgelegt von Holger Benecke |
| title_short | Expression einer dominant-negativen Mutante des TRPC6-Kationenkanals in glatten Muskelzellen |
| title_sort | expression einer dominant negativen mutante des trpc6 kationenkanals in glatten muskelzellen |
| topic_facet | Hochschulschrift |
| url | http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=014588265&sequence=000002&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |
| work_keys_str_mv | AT beneckeholger expressioneinerdominantnegativenmutantedestrpc6kationenkanalsinglattenmuskelzellen |