Charakterisierung der Apoptoseregulatoren Apaf-1 und Caspase-9 im Zervixkarzinom unter Berücksichtigung histopathologischer und klinischer Parameter sowie der intratumoralen Oxygenierung:
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| adam_text | Titel: Charakterisierung der Apoptoseregulatoren Apaf-1 und Caspase-9 im Zervixkarzinom unter Berücksichti
Autor: Richter, Christine
Jahr: 2005
INHALTSVERZEICHNIS
Verzeichnis der Abkürzungen i
Bibliographische Beschreibung ii
1. Einleitung 1
1.1 Epidemiologie und Ätiologie des Zervixkarzinoms 1
1.1.1 Therapie des Zervixkarzinoms 2
1.2 Oxygenierung des Zervixkarzinoms 2
1.2.1 Intratumorale Oxygenierung und Tumoraggressivität 4
1.2.2 Intratumorale Oxygenierung und Tumorcharakteristika 5
1.3 Apoptose 5
1.3.1 Morphologie der Apoptose 6
1.3.2 Mechanismus der Apoptose 7
1.3.3 Struktur und Funktion von Apaf-1 8
1.3.4 Die Familie der Caspasen 10
1.3.5 Struktur und Funktion der Caspase-9 10
1.3.6 Interaktion von Apaf-1 und Caspase-9 12
1.3.7 Regulation der Apoptose 14
1.4 Zusammenhang zwischen Apoptose und Hypoxie 14
1.5 Zielstellung 17
2. Material und Methoden 18
2.1 Material 18
2.1.1 Chemikalien, Lösungen und Puffer 18
2.1.2 Antikörper 19
2.1.3 Herstellung der Pufferlösungen 19
2.1.4 Charakterisierung der Antikörper 20
2.2 Probenmaterial 20
2.2.1 Herkunft der Gewebeproben 20
2.2.2 Einschlusskriterien der Zervixkarzinom-Patientinnen 22
2.3 Methoden 25
2.3.1 Ablauf der pO2-Messungen 25
2.3.2 Histopathologische Auswertung 27
2.3.3 Herstellung der tissue microarrays (TMAS) 27
2.3.4 Immunhistochemie 28
2.3.4.1 Versuchsablauf für Anti-Apaf-1 und Anti-Caspase-9 28
2.3.4.2 Auswertung der immunhistochemischen Färbungen
mit Anti-Apaf-1 und Anti-Caspase-9 32
2.3.5 Statistische Auswertung 35
3. Ergebnisse 36
3.1 Optimierung der Antikörperverdünnungen 36
3.1.1 Optimierung der Verdünnung von Anti-Apaf-1 36
3.1.2 Optimierung der Verdünnung von Anti-Caspase-9 37
3.2 Tumoroxygenierung und Tumorklassifikation 38
3.2.1 Tumoroxygenierung und FIGO-Stadium 38
3.2.2 Tumoroxygenierung und pT-Stadium 40
3.3 Tumoroxygenierung und histopathologische Parameter bzw. Alter 41
3.4 Tumoroxygenierung und Anämie bzw. Nikotinabusus 44
3.5 Tumoroxygenierung und Tumorgröße 44
3.6 Deskription der Tumorfärbung mit Anti-Apaf-1 45
3.6.1 Expression von Apaf-1 und Tumorklassifikation 48
3.6.2 Expression von Apaf-1 und histopathologische Parameter 50
3.6.3 Expression von Apaf-1 und klinische Daten 51
3.7 Deskription der Tumorfärbung mit Anti-Caspase-9 53
3.7.1 Expression von Caspase-9 und Tumorklassifikation 56
3.7.2 Expression Caspase-9 und histopathologische Parameter 57
3.7.3 Expression von Caspase-9 und klinische Daten 58
3.8 Expression von Apaf-1 bzw. Caspase-9 und Tumoroxygenierung 59
3.8.1 Expression von Apaf-1 und Tumoroxygenierung 59
3.8.2 Expression von Caspase-9 und Tumoroxygenierung 60
3.9 Auswertung histopathologischer Daten im Zervixkarzinom 60
3.10 Nikotinabusus und Alter im Zervixkarzinom 63
3.11 Ovarial- und Endometriumkarzinome 64
3.11.1 Deskription der Apaf-1-Expression im Ovarialkarzinom 64
3.11.2 Deskription der Caspase-9-Expression im Ovarialkarzinom 65
3.11.3 Deskription der Apaf-1 -Expression
im Endometriumkarzinom 65
3.11.4 Deskription der Caspase-9-Expression
im Endometriumkarzinom 66
3.12 Zusammenfassung der Ergebnisse 67
4. Diskussion 69
4.1 Vergleich der Apaf-1- und Caspase-9-Expression im Zervixkarzinom....69
4.2 Vergleich der Oxygenierungsergebnisse 70
4.2.1 Beurteilung der Tumoroxygenierung und Tumorklassifikation... 71
4.2.2 Untersuchung der Tumoroxygenierung und Tumorgröße 73
4.2.3 Beeinflussung der Tumoroxygenierung durch Anämie
bzw. Nikotinabusus 74
4.3 Bedeutung der Tumoroxygenierung für die maligne Progression
des Zervixkarzinoms 75
4.3.1 Zusammenhang zwischen Tumoroxygenierung
und Metastasierungspotential 75
4.3.2 Zusammenhang zwischen Tumoroxygenierung und Apoptose....76
4.3.3 Zusammenhang zwischen Tumoroxygenierung,
Apoptose und Apaf-1-/ Caspase-9-Expression 79
4.4 Beurteilung der Tumoroxygenierung
und der histopathologischen Parameter 80
4.5 Untersuchung der Apaf-1 - und Caspase-9-Expression
im Ovarial-und Endometriumkarzinom 81
5. Zusammenfassung der Arbeit 82
6. Literaturverzeichnis 85
7. Anlagen 104
8. Erklärung über die eigenständige Abfassung der Arbeit 112
9. Danksagung 113
10. Lebenslauf. 114
11. Publikationen 115
|
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Titel: Charakterisierung der Apoptoseregulatoren Apaf-1 und Caspase-9 im Zervixkarzinom unter Berücksichti
Autor: Richter, Christine
Jahr: 2005
INHALTSVERZEICHNIS
Verzeichnis der Abkürzungen i
Bibliographische Beschreibung ii
1. Einleitung 1
1.1 Epidemiologie und Ätiologie des Zervixkarzinoms 1
1.1.1 Therapie des Zervixkarzinoms 2
1.2 Oxygenierung des Zervixkarzinoms 2
1.2.1 Intratumorale Oxygenierung und Tumoraggressivität 4
1.2.2 Intratumorale Oxygenierung und Tumorcharakteristika 5
1.3 Apoptose 5
1.3.1 Morphologie der Apoptose 6
1.3.2 Mechanismus der Apoptose 7
1.3.3 Struktur und Funktion von Apaf-1 8
1.3.4 Die Familie der Caspasen 10
1.3.5 Struktur und Funktion der Caspase-9 10
1.3.6 Interaktion von Apaf-1 und Caspase-9 12
1.3.7 Regulation der Apoptose 14
1.4 Zusammenhang zwischen Apoptose und Hypoxie 14
1.5 Zielstellung 17
2. Material und Methoden 18
2.1 Material 18
2.1.1 Chemikalien, Lösungen und Puffer 18
2.1.2 Antikörper 19
2.1.3 Herstellung der Pufferlösungen 19
2.1.4 Charakterisierung der Antikörper 20
2.2 Probenmaterial 20
2.2.1 Herkunft der Gewebeproben 20
2.2.2 Einschlusskriterien der Zervixkarzinom-Patientinnen 22
2.3 Methoden 25
2.3.1 Ablauf der pO2-Messungen 25
2.3.2 Histopathologische Auswertung 27
2.3.3 Herstellung der tissue microarrays (TMAS) 27
2.3.4 Immunhistochemie 28
2.3.4.1 Versuchsablauf für Anti-Apaf-1 und Anti-Caspase-9 28
2.3.4.2 Auswertung der immunhistochemischen Färbungen
mit Anti-Apaf-1 und Anti-Caspase-9 32
2.3.5 Statistische Auswertung 35
3. Ergebnisse 36
3.1 Optimierung der Antikörperverdünnungen 36
3.1.1 Optimierung der Verdünnung von Anti-Apaf-1 36
3.1.2 Optimierung der Verdünnung von Anti-Caspase-9 37
3.2 Tumoroxygenierung und Tumorklassifikation 38
3.2.1 Tumoroxygenierung und FIGO-Stadium 38
3.2.2 Tumoroxygenierung und pT-Stadium 40
3.3 Tumoroxygenierung und histopathologische Parameter bzw. Alter 41
3.4 Tumoroxygenierung und Anämie bzw. Nikotinabusus 44
3.5 Tumoroxygenierung und Tumorgröße 44
3.6 Deskription der Tumorfärbung mit Anti-Apaf-1 45
3.6.1 Expression von Apaf-1 und Tumorklassifikation 48
3.6.2 Expression von Apaf-1 und histopathologische Parameter 50
3.6.3 Expression von Apaf-1 und klinische Daten 51
3.7 Deskription der Tumorfärbung mit Anti-Caspase-9 53
3.7.1 Expression von Caspase-9 und Tumorklassifikation 56
3.7.2 Expression Caspase-9 und histopathologische Parameter 57
3.7.3 Expression von Caspase-9 und klinische Daten 58
3.8 Expression von Apaf-1 bzw. Caspase-9 und Tumoroxygenierung 59
3.8.1 Expression von Apaf-1 und Tumoroxygenierung 59
3.8.2 Expression von Caspase-9 und Tumoroxygenierung 60
3.9 Auswertung histopathologischer Daten im Zervixkarzinom 60
3.10 Nikotinabusus und Alter im Zervixkarzinom 63
3.11 Ovarial- und Endometriumkarzinome 64
3.11.1 Deskription der Apaf-1-Expression im Ovarialkarzinom 64
3.11.2 Deskription der Caspase-9-Expression im Ovarialkarzinom 65
3.11.3 Deskription der Apaf-1 -Expression
im Endometriumkarzinom 65
3.11.4 Deskription der Caspase-9-Expression
im Endometriumkarzinom 66
3.12 Zusammenfassung der Ergebnisse 67
4. Diskussion 69
4.1 Vergleich der Apaf-1- und Caspase-9-Expression im Zervixkarzinom.69
4.2 Vergleich der Oxygenierungsergebnisse 70
4.2.1 Beurteilung der Tumoroxygenierung und Tumorklassifikation. 71
4.2.2 Untersuchung der Tumoroxygenierung und Tumorgröße 73
4.2.3 Beeinflussung der Tumoroxygenierung durch Anämie
bzw. Nikotinabusus 74
4.3 Bedeutung der Tumoroxygenierung für die maligne Progression
des Zervixkarzinoms 75
4.3.1 Zusammenhang zwischen Tumoroxygenierung
und Metastasierungspotential 75
4.3.2 Zusammenhang zwischen Tumoroxygenierung und Apoptose.76
4.3.3 Zusammenhang zwischen Tumoroxygenierung,
Apoptose und Apaf-1-/ Caspase-9-Expression 79
4.4 Beurteilung der Tumoroxygenierung
und der histopathologischen Parameter 80
4.5 Untersuchung der Apaf-1 - und Caspase-9-Expression
im Ovarial-und Endometriumkarzinom 81
5. Zusammenfassung der Arbeit 82
6. Literaturverzeichnis 85
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