Induktion der Cytochrom-P450-Isoformen CYP3A1/2 durch Dexamethason (DEXA) und Pregnenolon-16alpha-Carbonitril (PCN) in Leberpräzisionsschnitten der Ratte:
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|---|---|
| adam_text | Inhalt
Inhalt Seite
/. Zusammenfassung 1
2. Einleitung 3
2.1. Die Bedeutung der Biotransformation 3
2.2. Das Cytochrom P450. 5
2.3. Die CYP3A-Subfamilie 10
2.4. Beeinflussung des Cytochrom F 450. 11
2.5. Zielstellung 13
3. Material und Methoden 15
3.1. Versuchstiere 15
3.2. Materialgewinnung 75
3.3. Proteinbestimmung 17
3.4. Bestimmung der Hydroxylierungsprodukte des Testosterons 17
3.5. Nachweis und Quantifizierung von CYP3A1- mRNA 20
3.5.1. Quantitative RT-PCR 20
3.5.2. Isolation der Gesamt-RNA 21
3.5.3. Durchführung der RT-PCR 22
3.5.4. Herstellung des internen Standards und kompetitive RT-PCR 25
3.6. Statistische Auswertung 29
4. Ergebnisse 30
4.1. Testosteronhydroxylierung in Leberschnitten 30
4.1.1. Die Bildung von 6ß-, 2a- und 2ß-Hydroxytestosteron in Abhängigkeit von der
Vorinkubation der Leberschnitte 30
Inhalt
4.1.2. Einfluss des Induktors Dexamethason auf die 6ß-Hydroxyüerung von
Testosteron 32
4.1.3. Einfluss des Induktors Dexamethason auf die 2ß-Hydroxylierung von
Testosteron 34
4.1.4. Einfluss des Induktors Dexamethason auf die 2a-Hydroxylierung von
Testosteron 36
4.1.5. Einfluss des Induktors PCN auf die 6ß-Hydroxylierung von
Testosteron 38
4.1.6. Einfluss des Induktors PCN auf die 2ß-Hydroxylierung von
Testosteron 40
4.1.7. Einfluss des Induktors PCN auf die 2a-Hydroxylierung von
Testosteron 42
4.2. CYP3A-mRNA 44
4.2.1. CYP3AI-mRNA-Induktion durch Dexamethason 44
4.2.2. CYP 3AI-mRNA-Induktion durch PCN. 45
5. Diskussion 46
6. Schlussfolgerungen 56
7. Literaturverzeichnis 57
8. Anhang 65
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Inhalt
Inhalt Seite
/. Zusammenfassung 1
2. Einleitung 3
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4.1. Testosteronhydroxylierung in Leberschnitten 30
4.1.1. Die Bildung von 6ß-, 2a- und 2ß-Hydroxytestosteron in Abhängigkeit von der
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Inhalt
4.1.2. Einfluss des Induktors Dexamethason auf die 6ß-Hydroxyüerung von
Testosteron 32
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Testosteron 34
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