Penetration von Pollenallergenen in die Haut:
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
Verzeichnis der verwendeten Abkürzungen 7
L Einleitung 8
1.1. Aufbau und Funktion der Haut 8
1.2. Der Follikelapparat 10
1.2.1. Die Struktur des Haarfollikels 10
1.3. Penetrationswege von exogenen Stoffen durch die Haut 11
1.4. Untersuchungsmöglichkeiten der Penetration topisch applizierter 12
Substanzen
1.4.1. Das Abrissverfahren 13
1.4.2. Möglichkeiten der Detektion von Molekülen in der Haut 13
1.4.3. Schweinehaut als Hautmodell 14
1.5. Die Körperabwehr Die Haut als Immunorgan 14
1.5.1 Skin associated lymphoid tissue SALT 15
1.6. Allergien und Atopie 17
1.6.1. Atopische Dermatitis 17
1.6.1.1. Ätiologie der atopischen Dermatitis 17
1.6.1.2. Pathogenese 18
1.6.1.3. Klinik der atopischen Dermatitis 19
1.7. Allergene 20
1.7.1. Aufbau der Pflanzenpollen 20
1.7.2. Eigenschaften der Pollenallergene 21
1.8. Fragestellung und Zielsetzung 21
2. Material und Methoden 23
2.1. Die verwendeten Substanzen 23
2.1.1. Die Allergene 23
2.1.2. Fluoreszein isothiocyanat (FITC) 23
2.1.3. Markierung der Allergene mit FITC 24
2.2 Die Hautproben 25
2.2.1. Vorbereitung der Hautproben 26
4
2.2.2. Auftragen der Lösungen 26
2.3. Mikroskopische Untersuchungen 28
2.3.1. Digitale Fotografie 28
2.3.2 Bildverarbeitung 28
2.4. Studie des Penetrationsverhaltens Protokolle 1A und 1B 29
2.4.1. Das Abriss Verfahren 29
2.4.2. Digitale Fotografie 29
2.4.3. Fluoreszenzmikroskopische Auswertung 30
2.4.4. Spektroskopische Bestimmung der Komeozytenmenge 33
2.4.5. Erstellung eines Tiefenprofils des Stratum corneums 33
2.5. Untersuchung der Penetrationswege 34
2.5.1. Protokoll 3 Mikroskopische Positionsbestimmung der FITC 34
markierter Allergene
2.5.2 Protokoll 4 Horizontalschnitte 35
2.5.3. Protokoll 5 Biopsien der Schweinehaut 36
2.5.4. Untersuchungen mit dem Laser Scan Mikroskop 37
2.5.4.1. In vivo Bestimmung 37
2.5.4.2. In vitro Bestimmung 37
2.6. Statistische Auswertung 38
3 Ergebnisse 39
3.1. Markierung von Allergenen 39
3.2. Das Penetrationsverhalten von Pollenallergenen 39
3.2.1. Mikroskopische Bestimmung der Menge an Korneozyten 40
3.2.2. Erstellung von Penetrationsprofilen 41
3.2.2.1. Penetration von FITC markierten Allergen nach 15 min 41
Einwirkzeit
3.2.2.2. Penetration der Kontrolllösung nach 15 min Einwirkzeit 43
3.2.2.3. Penetration von FITC markierten Allergenen nach 45 min 45
Einwirkzeit
3.2.2.4. Penetration der Kontrolllösung nach 45 min Einwirkzeit 47
3.2.2.5. Vergleich der Penetration in Abhängigkeit von der Einwirkzeit 50
3.3. Darstellung der Penetrationswege in vitro 50
5
3.3.1. Interzelluläre Penetration (Protokoll 3) 51
3.3.2. Follikuläre Penetration Horizontalschnitte (Protokoll 4) 53
3.3.3. Biopsien der Schweinehaut (Protokoll 5) 54
3.3.4. Untersuchungen mit dem Laser Scan Mikroskop 56
4. Diskussion 58
4.1. Methode zur Detektion von Allergenen in der Haut 58
4.1.1 Die Markierung der Allergene 58
4.2. Schweineohren als Hautmodell 59
4.3. Mikroskopische Bestimmung der Komeozytenmenge 60
4.4. Untersuchung der Penetratioskinetik 62
4.4.1. Zeitabhängige Penetration 62
4.5. Penetrationswege der Allergene 65
4.5.1. Penetration durch das SC 65
4.5.2. Untersuchung der follikulären Penetration 66
4.5.3. Vergleich der in vivo und der in vitro Ergebnisse 69
5. Zusammenfassung 70
6. Literaturverzeichnis 73
Danksagung 81
Lebenslauf 82
Eidesstattliche Erklärung 83
6
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