Die Rolle von regulatorischen T-Zellen bei der experimentellen Arthritis der Maus:
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2004
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|---|---|
| adam_text | Inhaltsverzeichnis
ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS I
INHALTSVERZEICHNIS IV
1. ZUSAMMENFASSUNG 1
2. EINLEITUNG 3
2.1 Die rheumatoide Arthritis 3
2.1.1 Ätiologie und Pathogenese 3
2.1.2 Diagnostik und Therapie der RA 4
2.2 Experimentelle Arthritismodelle 7
2.2.1 Allgemeines 7
2.2.2 Die Antigen-induzierte Arthritis 7
2.2.3 Andere Arthritismodelle 11
2.3 Regulatorische T-Zellen (Treg-Zellen) 12
2.3.1 Allgemeines 12
2.3.2 Adaptive und natürlich vorkommende Treg-Zellen 12
2.3.3 Natürlich vorkommende CD4+CD25+regulatorische T-Zellen 14
2.3.4 CD 103- (aeßr) exprimierende Treg-Zellen 21
2.4 Zusammenfassung und Fragestellung 23
3 MATERIALIEN UND METHODEN 24
3.1 Geräte und Materialien 24
3.1.1 Geräte 24
3.1.2 Materialien 24
3.1.3 Chemikalien 25
3.1.4 Verwendete Kulturmedien, Lösungen und Puffer 27
3.1.5 Verwendete Antikörper 30
3.2 Versuchstiere und Arthritisinduktion 31
3.2.1 Versuchstiere und Haltungsbedingungen 31
3.2.2 Immunisierung und Arthritisinduktion 31
3.2.3 Beurteilung der Seh were der Arthritis 31
3.3 Behandlung mit anti-CD25-Antikörper 33
3.3.1 Herstellung und Aufreinigung des Antikörpers 33
IV
3.3.2 Aufreinigung 34
3.3.3 Behandlungsschema 35
3.4 Zelltransfer 35
3.4.1 Zellisolation 35
3.4.2 Präaktivierung und Transfer 37
3.5 Messung der zellulären Immunreaktivität 37
3.5.1 Verzögerte Überempfindlichkeitsreaktion 37
3.5.2 Untersuchung der zellulären Immunreaktivität in vivo 38
3.6 Messung der humoralen Immunreaktivität 40
3.6.1 mBSA- und knorpelmatrixspezische Antikörper 40
3.6.2 Immunglobulin-Subklassen 41
3.7 Untersuchungen zum Migrationsverhalten von CD4+CD25+ Zellen 41
3.8 Zytokin-ELISA 42
3.9 Durchflusszytometrie 43
3.10 Darstellung der Ergebnisse und statistische Analyse 45
4 ERGEBNISSE 46
4.1 Depletion von CD25-positiven Zellen in vivo 46
4.1.1 Stärke und Dauer der Depletion 46
4.1.2 Effekt auf die Arthritisschwere 47
4.1.3 Beeinflussung der zellulären und humoralen Immunantwort 48
4.1.4 Zusammenfassung 53
4.2 Transfer von CD4+CD25+ Zellen 55
4.2.1 Transfer von frisch isolierten Zellen 56
4.2.2 Transfer von CD4+CD25+ Zellen aus immunisierten Tieren 57
4.2.3 Transfer von präaktivierten CD4+CD25+ Zellen 59
4.2.4 Zusammenfassung 63
4.2.5 Beeinflussung der zellulären und humoralen Immunreaktivität 63
4.2.6 Untersuchungen zum Migrationsverhalten von CD4+CD25+ Zellen 68
4.2.7 Zusammenfassung 70
4.3 Transfer von aEß7-exprimierenden regulatorischen T-Zell-Subsets 71
4.3.1 Effekt auf die Arthritisschwere 71
4.3.2 Migrationsverhalten von aEßrexprimierenden Treg-Subsets 74
4.3.3 Zusammenfassung 76
V
5 DISKUSSION 77
5.1 Depletionsexperimente 79
5.2 Transfer von CD4+CD25+ Zellen 84
5.3 Migration von CD4+CD25+ Zellen in vivo 87
5.4 Transfer von aEß7-exprimierenden Treg-Subsets 89
5.5 Regulatorische T-Zellen und Autoimmunerkrankungen des Menschen 93
6 SCHLUSSFOLGERUNGEN UND AUSBLICK 97
7 LITERATURVERZEICHNIS 99
8 ANHANG 122
Lebenslauf 122
Danksagung 126
Ehrenwörtliche Erklärung 127
VI
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