Wachstumsfaktoren in Perikardflüssigkeit: Spiegel der kardialen Grunderkrankung?
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2002
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1 EINLEITUNG 1
1.1 Überblick Wachstumsfaktoren 1
1.2 Einflud von Wachstomsfaktoren auf Kardiomyozyten 1
13 Wachstumsfaktoren und Pekikardflüssigkeit 3
1.4 Ziel der Arbeit 3
2. MATERIAL UND METHODEN 5
2.1. Perikardflussigkeit und Serum 5
2.1.1. Patientenkollektiv 5
2.1.2 Gewinnung und Lagerung der Perikardflüssigkeits- und Serumproben 6
2.2 Zellkultur 9
2.2.1 Isolierung von adulten Kardiomyozyten der Ratte 9
2.2.2 Bestimmung der Zellanzahl und Schlagaktivität 13
2.23 Messung der Zelloberfläche 13
2.2.4 Proteinsynthese, Proteingesamtgehalt, DNA-Gehalt 13
2.2.5 PROTEINSYNTHESE 14
2.2.6 PROTEINGEHALT 14
2.2.7 DNA-GEHALT 14
2.2.8 Interferenz-Kontrast-Mikroskopie 15
2.2.9 Immunfluoreszenz-Mikroskopie 15
2.3 Statistische Auswertung 16
3. ERGEBNISSE 17
3.1 Überblick Perikardflussigkeit und Serum 17
3.2 Mikrobiologische Untersuchung 17
3.2.1 Biochemische Analysen 18
33 Wachstumsfaktoren in Perikardflussigkeit und Serum 20
3.4 zusammenfassung wachstumsfaktoren 21
3.5 unterschiedliche patientengruppen 22
3.5.1 basischer flbroblasten-wachstumsfaktor (bfgf) 22
3.5.2 Insulin-ähnlicher Wachstumsfaktor (IGF) 23
3.5.3 Hepatozyten- Wachstumsfaktor (HGF) 24
3.6 Myozytenkultur 25
3.6.1 Frisch isolierte Myozyten 25
3.6.2 morphologische veränderungen 27
3.6.3 Zellentwicklung im Zeitverlauf 27
3.7 immunhistochemie 31
3.8 Zellfläche 35
3.9 Kontraktionsverhalten 37
3.10 Proteingehalt 39
3.11 Proteinsynthese 41
3.12 Zusammenfassung der biologischen Veränderungen der Kardiomyozyten 44
3.13 antagonisierung der wirkung von pf und serum auf kardiomyozyten 45
3.13.1 antagonisierung der wirkung von pf mit tgf-ß, 45
3.13.2 antagonisierung der wirkung von pf mit monoklonalem, gegen bfgf
gerichtetem antikörper 51
4. diskussion 53
5. LITERATUR 70
6. ANHANG 82
7. ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS 85
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