Regulation der Insulin-induzierten Aktivierung der endothelialen NO-Synthase in Thrombozyten:
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2003
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1 Einleitung 1
Der Thrombozyt: Aufbau und Funktion 1
Die Gedeutung von Stickstoffmonoxid (NO), NO-Bildung, Regulationsmechanismen der
endothelialen NO-Synthase (eNOS) 3
- Regulation der eNOS durch die Proteinkinase B/Akt 7
Regulation der eNOS durch die AMP-aktivierte Proteinkinase (AMPK) 8
Regulation der eNOS durch Hsp90 9
Insulin: Stoffwechselwirkungen und Mechanismen der Signaltransduktion 10
Ziel der Arbeit 11
2 Material und Methoden 12
Material 12
Methodik 12
- Thrombozytenpraparation 12
Aggregation 13
Calcium-Messung 15
Elektronen-Spin-Resonanz-Spektroskopie 15
- cGMP-Messung 16
- Western Blot Analyse 16
- AMPK-Assay 17
- Statistik 17
3 Ergebnisse 18
Effekt von NO-Donoren 18
Effekt von Insulin auf die Thrombin-induzierte Thrombozytenaggregation 19
Insulin-induzierte Produktion von NO in Thrombozyten 24
Effekt der Insulin-induzierten NO-Produktion auf den Ca2*-Anstieg in Thrombozyten 26
Effekt von Insulin auf die Aktivierung von Proteinkinase B/Akt 27
Effekt von Insulin und AICAR auf die Aktivierung von AMPK 28
Effekt von AICAR und lodotubercidin auf die Thrombozytenaggregation 30
Effekt von AICAR und lodotubercidin auf die thrombozytaren cGMP-Spiegel 33
Effekt von Insulin und AICAR auf die eNOS-Phosphorylierung 34
4 Diskussion 35
5 Zusammenfassung 43
Zusammenfassung in englischer Sprache (Summary) 44
6 Literatur 45
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