Der Einfluss von Produkten des Bakteriums Escherichia coli auf die Steroidakkumulation humaner Granulosazellen im In-vitro-Modell:
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Inhaltsverzeichnis
Seite
Abkürzungsverzeichnis 5
1. Einleitung 6
1.1 Einfluss von Sexualsteroiden auf Virulenz und Pathogenität von E. coli 7
1.2 Einfluss von E. coli auf die Steroidproduktion von Granulosazellen 8
1.2.1 Die Granulosazelle und deren Funktion im weiblichen Zyklus 9
1.2.2 Die Stefoidsynthese der humanen Granulosazelle 10
1.2.3 Der Einfluss stimulierender und inhibitorischer Faktoren auf die
Steroidsynthese 11
1.2.3.1 Stimulierende Modulatoren der Steroidsynthese 11
1.2.3.2 Inhibitorische Modulatoren der Steroidsynthese 12
1.3 Zielsetzung der Arbeit 13
2. Material und Methoden
2.1 Laborartikel 15
2.2 Medien und Medienzusätze 17
2.3 Gewinnung von Granulosazellen 18
2.3.1 Patientenkollektiv 18
2.3.2 IVF Behandlung 18
2.3.3 Isolierung der Granulosazellen 19
2.3.4 Zellzahlbestimmung und Vitalfärbung der Granulosazellen 20
2.4 Bakterienanzucht und Gewinnung von Bakterienextrakten 20
2.4.1 Bakterienstämme 20
2.4.2 Anzucht der Bakterien und Erstellung einer Wachstumskurve 21
2.4.3 Herstellung des Bakterienextraktes 21
2.4.4 Fraktionierung und Hitzedenaturierung des Bakterienextraktes 22
2.5 Kultivierung der Granulosazellen 22
2.6 Bestimmung der Hormonkonzentrationen 23
2.6.1 Progesteronbestimmung 23
2.6.2 Östradiolbestimmung 24
2.7 Statistische Auswertung 26
3. Ergebnisse
3.1 Basale Progesteron- und Östradiolakkumulation in der Granulosazellkultur 27
3.1.1 Verteilung der basalen Progesteron- und östradiolakkumulation
im Patientenkollektiv 27
4
3.1.2 Abhängigkeit der basalen Progesteronakkumulation
von der Zelldichte 28
3.1.3 Zusammenhang zwischen dem Serumöstradiolspiegel und der
basalen Progesteronakkumulation 29
3.2 Auswirkungen von hCG auf die basale Progesteronakkumulation 30
3.3 Einfluss des Kulturüberstandes von E. coli ATCC 25922 auf die basale Pro-
gesteronakkumulation 31
3.4 Einfluss des Puffer-Extraktes aus E. coli ATCC 25922 auf die Progesteron¬
bzw. Östradiolsynthese 33
3.4.1 Die niedermolekulare Fraktion des E. coli- Extraktes
3.4.1.1 Einfluss der niedermolekularen Fraktion des E. coli- Extraktes
auf die basale Progesteron- und Östradiolakkumulation 33
3.4.1.2 Einfluss der niedermolekularen Fraktion des E. coli- Extraktes
auf die hCG stimulierte Progesteronakkumulation 35
3.4.1.3 Korrelation zwischen der Stimulation durch die niedermolekulare
E. co//-Fraktion und der Ansprechbarkeit gegenüber hCO 36
3.4.2 Die hochmolekulare Fraktion des E. coli- Extraktes
3.4.2.1 Einfluss der hochmolekularen Fraktion des E. coli- Extraktes
auf die basale Progesteron- und Östradiolakkumulation 37
3.4.2.2 Einfluss der hochmolekularen Fraktion des E. coli- Extraktes
auf die hCG-stimulierte Progesteronakkumulation 38
3.4.2.3 Korrelation zwischen den Stimulations-Effekten von hCG auf
die basale bzw. auf die durch die hochmolekulare E. co//-Fraktion
gehemmte Progesteronakkumulation 39
4. Diskussion 40
4.1 Das Zellkulturmodell 40
4.2 Die bakteriellen Effektoren 43
5. Zusammenfassung 48
6. Literaturverzeichnis 50
7. Danksagung 64
8. Lebenslauf 65
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