Dosis-Wirkungs-Beziehungen verschiedener Zytostatika zur Behandlung der chronischen myeloischen Leukämie:
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2004
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I Liste der verwendeten Abkürzungen 3
1 Einleitung 7
2 Zielsetzung 8
3 Theoretische Grundlagen 9
3.1 Chronisch myelolsche Leukämie 9
3.1.1 Definitition 9
3.1.2 Geschichte 9
3.1.3 Inzidenz und Prävalenz 10
3.1.4 Pathophysiologie 10
3.1.5 Diagnostik 11
3.1.6 Prognose 13
3.1.7 Therapie 13
3.2 Dasabl Gen 15
3.2.1 Wichtige Domänen des Abi Proteins 16
3.3 Dasbcr Gen 17
3.3.1 Das Bcr Protein 17
3.3.2 Funktionen wichtige Domänen des Bcr Proteins 18
3.4 Das Philadelphia Chromosom 19
3.5 Bcr abl Genvarlanten 22
3.6 Das abl bcr Gen 23
3.7 Philadelphia negative CML 24
3.8 Bcr Abl Induziert Slgnaltransduktlonswege 24
3.8.1 Ras Raf Signal Weg 25
3.8.2 Mitogen aktivierte Protein Kinase(MAPK) Stoffwechselweg 26
3.8.3 Phosphatidylinositol 3 Kinase(PI3K) Weg 26
3.8.4 CRKL vermittelte Signaltransduktion 27
3.8.5 Jak STAT Weg 28
3.8.6 Myc Weg 29
3.9 Veränderte Adhäsion Bcr Abl posItlver Zellen 29
3.10 Bcr Abl induziert Ontogenese 29
3.11 Apoptose 30
3.12 Bcr Abl induziert Apoptosehemmung 33
3.13 Protelnkinasen 33
3.14 Protein Tyrosin Klnase(PTK) lnhibltoren 34
4 Materialien und Geräte 36
4.1 Hilfsmittel 36
4.2 Chemikalien 39
4.3 Lösungen 41
1
4.4 Zelllinien 45
4.5 Stoffe 47
5 Methoden 51
5.1 MTT Test 51
5.1.1 Tetrazoliumsalre 51
5.1.2 Struktur des Tetrazoliumsalzes 52
5.1.3 Charakterisierung des MTT Tests 52
5.1.4 Praktische Durchführung des MTT Tests M
5.2 Western Blot 57
5.2.1 Diskontinuierliche Puffersysteme
5.2.2 Blotten 59
5.2.3 Membranen für den Westen Blot 60
5.2.4 Spezifische Proteindetektion von Proteinen im Western Blot 60
5.2.5 Praktische Durchführung des Western Blots 62
6 Ergebnisse 65
6.1 Untersuchungen zur Wirkung einzelner Stoffe auf die Zelllinien 6S
6.1.1 MTT Tests mit Ceramid C8 66
6.1.2 MTT Tests mit Theophyllin 70
6.1.3 MTT Tests mit Tyrphostin AG879 75
6.1.4 MTT Tests mit Tyrphostin AG957 80
6.1.5 MTT Tests mit Mafosfamid 85
6.2 Untersuchungen zur Wirkung von kombinierten Substanzen und Substanz¬
konzentrationen auf die Zellen 89
6.2.1 MTT Tests mit AG879 und Mafosfamid 89
6.2.2 MTT Tests mit AG957 und Mafosfamid 96
6.3 MTT Tests der Zellllnlen mit CGP57148 103
6.4 Darstellung und Analyse der Western Blot Ergebnisse 113
7 Diskussion 12S
8 Zusammenfassung und Ausblick 141
9 Concluslon and outlook 142
10 Literaturverzeichnis 143
Danksagung 179
Anhang: Lebenslauf 180
2
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