Tyrosin-Kinase-abhängige Migration von B- und T-Lymphozyten durch VIP (vasoaktive Intestinal-Peptide):
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Marburg
Görich & Weiershäuser
2004
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Inhaltsverzeichnis
INHALTSVERZEICHNIS I
ABBILDUNGSVERZEICHNIS IV
ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS V
1. EINLEITUNG, ZIELSETZUNG UND GANG DER UNTERSUCHUNG 1
2. THEORETISCHE GRUNDLAGEN 3
2.1 Allgemeine Entzündungen 3
2.1.1 Definition von Entzündungen 3
2.1.2 Steuerung von Entzündungen durch Mediatoren 3
2.2 Neurogene Entzündungen 4
2.2.1 Definition der neurogenen Entzündung 4
2.2.2 Wirkungen sensorischer Nervenfasern bei neurogenen Entzündungen 4
2.3 Neuropeptide als Mediatoren der neurogenen Entzündung 6
2.4 Darstellung der verwendeten Peptide 9
2.4.1 VIP 10
2.4.2 Sekretin 14
2.4.3 Helodermin 15
2.4.4 PHI 16
2.5 Allgemeine Mechanismen bei Membranrezeptoren 17
2.5.1 Die Wirkung von Cholera-, Pertussistoxin und Tyrphostin, als Protein-Tyrosin-
Kinase-, Staurosporin, als Protein-Kinase-C-Inhibitor auf die
Signaltransduktionsmechanismen 17
2.5.1.1 Choleratoxin 18
2.5.1.2 Pertussistoxin 18
2.5.1.3 Tyrphostine 19
2.5.1.4 Staurosporin 19
2.5.2 Regulation der Rezeptivität 19
2.5.2.1 Homologe Rezeptordesensibilisierung 20
2.5.2.2 Heterologe Rezeptordesensibilisierung 20
2.6 VIP-Rezeptoren 21
2.6.1 VIP-Rezeptoren auf Leukozyten 21
2.6.2 VIP Typ I- und VIP Typ II-Rezeptor 23
2.7 Lymphozyten 26
2.7.1 Migration von Lymphozyten 26
2.7.2 Auswirkungen von VIP auf Lymphozyten 28
3. HYPOTHESENABLEITUNG UND UNTERSUCHUNGSDESIGN 30
II
4. MATERIAL UND METHODEN 33
4.1 Zellpräparation 33
4.1.1 Vollblutauftrennung/Separation der Lymphozyten 33
4.1.2 Zellzahlbestimmung 34
4.1.2.1 „Türk sche Lösung und Durchführung der Färbung 34
4.1.2.2 Konzentrationsbestimmung 35
4.2 Lymphozytenpräparation 36
4.2.1 Blutpräparation beim „Buffy-Coat 37
4.2.2 Auftrennung der B- und T-Lymphozyten durch „MACS - Magnetic Cell
Sorting 38
4.3 Migration, Chemokinese und Chemotaxis 39
4.4 Testsubstanzen 40
4.4.1 VIP-Rezeptorantagonist 40
4.4.2 RANTES 41
4.4.3 Interleukin-8 (IL-8) 41
4.4.4 Staurosporin und Tyrphostin-23 42
4.4.5 Cholera- und Pertussistoxin 42
4.5 Statistische Auswertungsmethoden 43
5. ERGEBNISSE 44
5.1 Migrationsfördernde Effekte von VIP, Sekretin, Helodermin und PHI auf
normale menschliche Lymphozyten des peripheren Blutes 44
5.2 Lymphozytenmigration bei Kombination von VIP, Sekretin, Helodermin und
PHI mit einem VIP-Rezeptorantagonisten 47
5.3 VIP induzierte Migration von B- und T-Lymphozyten 49
5.4. Effekte von Kinase-Inhibitoren auf die durch VIP, Sekretin, Helodermin und
PHI induzierte Lymphozytenmigration 52
5.5 Wirkungen von Cholera- und Pertussistoxin auf die durch VIP, Sekretin,
Helodermin und PHI induzierte Lymphozytenmigration 55
5.6 Rezeptordeaktivierung 56
5.6.1 Homologe Rezeptordesensibilisierung 56
5.6.2 Heterologe Kreuz-Desensibilisierung 58
6. DISKUSSION 60
7. ZUSAMMENFASSUNG 68
ANHANG VII
LITERATURVERZEICHNIS VIII
III
ÜBERSICHT AKADEMISCHER LEHRER XXII
DANKSAGUNG XXIII
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