Mechanismen der Desensitisierung gonadotroper Zellen durch GnRH-Analoga:
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2003
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INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 Entwicklung und Einsatz von Gonadotropin-Releasing Hormon (GnRH) -
Analoga 1
1.2. Die Neuroendokrinologie des Menstruationszyklus 3
1.2. 1. Das endokrine Profil des normalen Menstruationszyklus 3
1.2.2. Die neuroendokrine Regulation der Gonadotropinsekretion 5
1. 2. 3. Die zelluläre Regulation der Gonadotropinsekretion 10
1. 2. 3. 1. Der GnRH-Rezeptor 10
1.2.3.2. Signaltransduktionsmechanismen des GnRH-Rezeptors 11
1. 2. 3. 3. Modulatorische Einflüsse von östradiol und Progesteron auf die
Regulationsmechanismen der GnRH-induzierten Gonadotropinsekretion 15
1. 2. 3. 4. Mechanismen der zellularen Desensitisienjng gonadotroper Zellen 17
1.3. Problemstellung 18
1. 3.1. Möglichkeiten des klinischen Einsatzes von GnRH-Agonisten und
GnRH-Antagonisten 18
1.3.2. Spezielle Problemstellung 21
2. MATERALIEN UND METHODEN 23
2.1. Medien für Zellpraparation und Zellkultur 23
2.2. Hormone und zellstimulierende Stoffe 24
2.3. Enzyme und Komplexbildner 25
2.4. Zellpraparation und Zellkultur 25
2.5. Lysierung von Hypophysenzellen 27
2.6. Versuchsablauf 27
2. 7. Versuchsreihe A:
Effekte einer Vorbehandlung mit GnRH-Anatoga auf die LH-SekreBon
bei GnRH-stimulierten Hypophysenzellen 29
2. 7. 1. Zeitabhängige Effekte einer Triptorelin-Vorbehandlung auf die
GnRH-induzierte LH Sekretion 29
2. 7. 2. Zeit- und konzentrationsabhängige Effekte einer Cetrorelix-
Vorbehandlung auf die GnRH-induzierte LH Sekretion 30
n
2. 8. Versuchsreihe B :
Effekte einer Vorbehandlung mit GnRH-Analoga auf das Gesamt-LH
(Sekretion und Speicherung) von GnRH-stimulierten
Hypophysenzellen 31
2.8.1. Zeitabhängige Effekte einer Triptorelin-Vorbehandlung auf das
Gesamt-LH in kultivierten Rattenhypophysenzellen 31
2. 8. 2. Konzentrationsabhängige Effekte einer Cetrorelix-Vorbehandlung auf
das Gesamt-LH in kultivierten Rattenhypophysenzellen 32
2. 9. Versuchsreihe C :
Effekte einer Vorbehandlung von Hypophysenzellkulturen mit GnRH-
Analoga auf die durch Östradiol und Progesteron modulierte GnRH-
induzierte LH-Sekretion 33
2.9. 1. Effekte einer Triptorelin-Vorbehandlung auf die durch Östradiol und
Progesteron modulierte GnRH-induzierte LH-Sekretion 34
2. 9. 2. Effekte einer Cetrorelix-Vorbehandlung auf die durch Östradiol und
Progesteron modulierte GnRH-induzierte LH-Sekretion 36
2.10. Bestimmung der LH-Konzentration 39
2.11. Statistische Methoden 39
3. ERGEBNISSE 40
3. 1. Versuchsreihe A:
Effekte einer Vorbehandlung mit GnRH-Analoga auf die LH-Sekretion
bei GnRH-stimulierten Hypophysenzellen 40
3.1.1. Zeitabhängige Effekte einer Triptorelin-Vorbehandlung auf die GnRH -
induzierte LH Sekretion 40
3.1. 2. Zeit- und Konzentrationsabhängige Effekte einer Cetrorelix-
Vorbehandlung auf die GnRH-induzierte LH Sekretion 45
3. 2. Versuchsreihe B :
Effekte einer Vorbehandlung mit GnRH-Analoga auf das Gesamt-LH
(Sekretion und Speicherung) von GnRH-stimulierten Hypophysenzellen 47
3. 2. 1. Zeitabhängige Effekte einer Triptorelin-Vorbehandlung auf das
Gesamt-LH in kultivierten Rattenhypophysenzellen 47
3. 2. 2. Konzentrationsabhängige Effekte einer Cetrorelix-Vorbehandlung auf
das Gesamt-LH kultivierter Rattenhypophysenzellen 50
3. 3. Versuchsreihe C :
Effekte einer Vorbehandlung von Hypophysenzellkulturen mit GnRH-
Analoga auf die durch Östradiol und Progesteron modulierte GnRH-
induzierte LH-Sekretion 52
ni
3. 3. 1. Effekte einer Triptorelin-Vorbehandlung auf die durch Östradiol und
Progesteron modulierte GnRH-induzierte LH-Sekretion 52
3. 3. 2. Effekte einer Cetrorelix-Vorbehandlung auf die durch Östradiol und
Progesteron modulierte GnRH-induzierte LH-Sekretion 55
4. DISKUSSION 59
4.1. Wahl des experimentellen Modells 59
4. 2. Effekte der GnRH-Analoga auf die zellulare Regulation der
Gonadotropinsekretion 60
4.2. 1. GnRH-Rezeptor 61
4. 2. 2. Intrazelluläre Effektoren und Signaltransduktion 65
4. 2. 3. Intrazellulare LH-Speicher / Gesamt-LH 67
4. 3. Modulatorische Effekte von Östradiol und Progesteron auf die
Desensitisierung gonadotroper Hypophysenzellen 70
4 3.1. Modulatorische Effekte von Östradiol und Progesteron auf die
homologe Desensitisierung gonadotroper Hypophysenzellen durch
den GnRH-Agonisten Triptorelin 71
4. 3. 2. Modulatorische Effekte von Östradiol und Progesteron auf die
Desensitisierung gonadotroper Hypophysenzellen durch den
GnRH-Antagonisten Cetrorelix 73
4.4. Effekte von GnRH-Analoga auf die in vivo Regulation der
Gonadotropinsekretion 74
4. 5. Konsequenzen für die klinische Anwendung von GnRH-Analoga
am Beispiel der In-Vitro-Fertilisation (IVF) 74
4.6. Schlußfolgerungen 76
5. ZUSAMMENFASSUNG 77
6. TABELLEN 79
6.1. Zeitabhängige Effekte einer Triptorelin-Vorbehandlung auf die
GnRH-induzierte LH-Sekretion 79
6. 2. Zeit- und konzentrationsabhängige Effekte einer Cetrorelix-
Vorbehandlung auf die GnRH-induzierte LH-Sekretion 80
6.3. Zeitabhängige Effekte einer Triptorelin-Vorbehandlung auf das
Gesamt-LH kultivierter Rattenhypophysenzellen 81
rv
6. 4. Konzentrationsabhängige Effekte einer Cetrorelix- Vorbehandlung
auf das Gesamt-LH kultivierter Rattenhypophysenzellen 82
6. 5. Effekte einer Triptorelin-Vorbehandlung auf die durch Östradiol und
Progesteron modulierte GnRH-induzierte LH-Sekretion 83
6.6. Effekte einer Cetrorelix-Vorbehandlung auf die durch Östradiol und
Progesteron modulierte GnRH-induzierte LH-Sekretion 84
7. LITERATURVERZEICHNIS 85
8, LISTE DER VERWENDETEN ABKÜRZUNGEN 112
9, DANKSAGUNG 115
10. LEBENSLAUF 116
11. VERZEICHNIS DER AKADEMISCHEN LEHRER 118
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