Fas-, FasL-Expression auf humanen Keratinozyten - ein Vergleich zwischen Psoriasis und Kutanem-T-Zell-Lymphom:
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|---|---|
| Format: | Thesis Microfilm Book |
| Language: | German |
| Published: |
2004
|
| Edition: | [Mikrofiche-Ausg.] |
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| Online Access: | Inhaltsverzeichnis |
| Physical Description: | III, 116 Bl. Ill., graph. Darst. 30 cm |
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
I
1.
EINLEITUNG
1
1.1.
APOPTOSE
1
1.1.1.
DER
APOPTOTISCHE
ZELLTOD
1
1.1.2.
APOPTOSE-REZEPTOREN
2
1.1.3.
SIGNALTRANSDUKTIONSWEG
DER
APOPTOSE
3
1.1.3.1.
CASPASEN:
EFFEKTOREN
DER
APOPTOSE
3
1.1.3.2.
INHIBITORISCHE
REGULATIONSMECHANISMEN
5
1.1.3.3.
REGULATORISCHER
EINFLUSS
DURCH
MITGLIEDER
DER
BCL-2-FAMILIE
6
1.1.4.
ROLLE
DER
APOPTOSE
IM
IMMUNSYSTEM
7
1.1.5.
EINFLUSS
AUF
DAS
APOPTOTISCHE GLEICHGEWICHT
8
1.1.6.
APOPTOSE
UND
KRANKHEITEN
-
STAND
DER
FORSCHUNG
9
1.2.
DERMATOSEN
UND
APOPTOSE
11
13.
DERMATOSEN
11
1.3.1.
PSORIASIS
11
1.3.1.1.
KLINISCHE
EINTEILUNG
12
1.3.1.2,
HISTOMORPHOLOGISCHE
KRITERIEN
12
1.3.1.3.
LOKALES
ZYTOKINMUSTER
14
1.3.1.4.
AUSLOESENDE
AETIOLOGISCHE
UND
PATHOGENETISCHE
FAKTOREN
14
1.3.1.5.
ROLLE
DES
IMMUNSYSTEMS
IN
DER
PATHOGENESE
16
1.3.1.6.
THERAPEUTISCHE
ANSAETZE
17
1.3.2.
KUTANES
T-ZELL-LYMPHOM
18
1.3.3.
PSEUDOLYMPHOM
19
2.
AUFGABENSTELLUNG
20
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
21
3.1.
MATERIAL
21
3.1.1.
VERBRAUCHSMATERIAL
21
3.1.2.
GERAETE
21
3.1.3.
CHEMIKALIEN
21
3.1.4.
KULTURMEDIEN
22
3.1.5.
PUFFER
UND
LOESUNGEN
23
3.1.6.
ANTIKOERPER
24
3.1.6.1.
INDIREKTE
ANTIKOERPER
24
3.1.6.2.
DIREKTMARKIERTE
ANTIKOERPER
24
3.1.7.
PROTEASEN
UND
ENZYME
25
3.1.8
SUBSTANZEN
ZUR
STIMULATION
25
3.1.9.
ZELL-LINIEN
25
3.1.10.
APOPTOSE-INDUKTOREN
25
3.2.
IMMUNCYTOCHEMIE
26
3.2.1.
APAAP-CHEMIKALIEN
26
3.2.2.
APAAP-PUFFER
UND
REAKTIONSLOESUNGEN
26
3.2.3.
ANTIKOERPER
27
33.
SOFTWARE
28
INHALTSVERZEICHNIS
3.4.
METHODEN
28
3.4.1.
METHODEN
DER
ZELLKULTUR
28
3.4.1.1.
GEWINNUNG
DES
SPENDERMATERIALS
28
3.4.1.2.
ZELLISOLATION
28
3.4.1.3.
ZELLKULTIVIERUNG
29
3.4.1.4.
MEDIUMWECHSEL
30
3.4.1.5.
PASSAGIEREN
DER
ZELLEN
30
3.4.1.6.
KULTIVIERUNGSMEDIEN
UND
TRYPSINEINWIRKZEIT
ZUR
ABLOESUNG
ADHAERENTER
ZELLEN
31
3.4.1.7.
ZELLZAEHLUNG
UND
VITALITAETSPRUEFUNG
31
3.4.1.8.
KULTIVIERUNG
ANDERER
ZELL-LINIEN
31
3.4.1.9.
KRYOKONSERVIERUNG
DER
ZELLEN
31
3.4.1.10.
AUFTAUEN
DER
ZELLEN
32
3.4.2.
NACHWEIS
DER
REINHEIT
DER
ZELLISOLATE
BEI
DER
PRAEPARATION
32
3.4.2.1.
NACHWEIS
DES
KERATINOZYTENANTEILS
32
3.4.2.2.
NACHWEIS
DES
T-LYMPHOZYTENANTEILS
32
3.4.2.3.
NACHWEIS
DES
FIBROBLASTENANTEILS
32
3.4.3.
STIMULATIONSVERSUCHE
33
3.4.4.
SENSITIVITAET
DER
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHEN
MESSUNG
33
3.4.4.1.
MESSUNG
DER
FAS-ZFASL-EXPRESSION
AUF
JURKAT-ZELLEN
33
3.4.4.2.
MESSUNG
DER
FAS-/FASL-EXPRESSION
AUF
SW
620-ZELLEN
33
3.4.4.3.
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
DARSTELLUNG
DER
MHC-I
EXPRESSION
34
3.4.5.
UNTERSUCHUNG
VON
EINFLUSSFAKTOREN
AUF
DIE
FAS-ZFASL-EXPRESSION
34
3.4.5.1.
NACHWEIS
DER
FAS
UND
FASL-RESISTENZ
UNTER
TRYPSINZEDTA
34
3.4.5.2.
HEMMUNG
DER
BILDUNG
VON
SFASL
DURCH
METALLOPROTEINASE-INHIBITOR
EINSATZ
34
3.4.5.3.
AB-SERUM-VORINKUBATION
34
3.4.6.
APOPTOSE-VERSUCHE
35
3.4.6.1.
APOPTOSE-INDUKTION
IN
JURKAT-ZELLEN
35
3.4.6.2.
APOPTOSE-HEMMUNG
IN
JURKAT-ZELLEN
35
3.4.6.3.
ANNEXIN-VZFITC-MARKIENMG
36
3.4.7.
METHODEN
DER
ZELLMARKIERUNG
36
3.4.7.1.
DIREKTE IMMUNFLUORESZENZ-MARKIERUNG
VON
ZELLEN
36
3.4.7.2.
INDIREKTE
IMMUNFLUORESZENZ-MARKIERUNG
VON
ZELLEN
37
3.4.7.3.
INTRACYTOPLASMATISCHE
FAERBUNG
37
3.4.8.
FACS-MESSUNG
UND
AUSWERTUNG
37
3.4.9.
STATISTISCHE
ANALYSE
38
3.4.10.
IMMUNHISTOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
39
3.4.10.1.
IL-10
VORBEHANDLUNG
UND
BIOPSIEENTNAHME
39
3.4.10.2.
APAAP-FAERBETECHNIK
39
3.4.10.3.
HISTOLOGISCHE
AUSWERTUNG
42
3.4.10.4.
STATISTISCHE
ANALYSE
43
4.
ERGEBNISSE
44
4.1.
AUFFAELLIGKEITEN
BEI
DER
KULTIVIERUNG
44
4.1.1.
EINFLUSS
DER
KOKULTUREN
AUF
DIE
KULTIVIERUNG
44
4.1.2.
PROBLEME
DER
KULTIVIERUNG
PSORIATISCHER
KERATINOZYTEN
44
4.2.
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
ERFASSUNG
VON
FAS
UND
FASL
44
4.2.1.
EINSATZ
DER
INDIREKTEN
FLUORESZENZMARKIERUNG
44
4.2.2.
FAS-ZFASL-NACHWEIS
AUF
JURKAT-ZELLEN
MIT
HILFE
DER
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
45
4.2.3.
FAS-ZFASL-NACHWEIS
AUF
SW
620-ZELLEN
MIT
HILFE
DER
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
46
4.2.4.
ANFAERBBARKEIT
VON
KERATINOZYTEN
UND
NACHWEIS
DER
FAS-ZFASL-EXPRESSION
47
43.
UNTERSUCHUNG
VON
EINFLUSSFAKTOREN
AUF
DIE
FAS-ZFASL-EXPRESSION
48
4.3.1.
FAS-ZFASL-RESISTENZ
BEI
TRYPSINZEDTA-EINSATZ
48
4.3.2.
FAS
UND
FASL-EXPRESSION
UNTER
METALLOPROTEASE-INHIBITOR
EINSATZ
49
4.4.
CHARAKTERISIERUNG
DES
ZELLGEMISCHES
IN
FRISCH
ISOLIERTEN
HAUTZELLEN
51
4.4.1.
NACHWEIS
DER
REINHEIT
DER
ZELLISOLATE
BEI
DER
PRAEPARATION
51
4.4.1.1.
NACHWEIS
DES
KERATINOZYTENANTEILS
51
4.4.1.2.
NACHWEIS
DES
FIBROBLASTENANTEILS
52
INHALTSVERZEICHNIS
4.4.2.
UNTERSUCHUNG
DES
ZELLGEMISCHES
BEI
YYNORMALER
"
HAUT
UND
PSORIASIS
53
4.4.3.
UNTERSUCHUNG
DES
ZELLGEMISCHES
BEIM
CTCL
UND
PSEUDOLYMPHOM
54
4.5.
UNTERSUCHUNGEN
VON
FAS
UND
FASL
56
4.5.1.
EXPRESSION
VON
FAS/FASL
IN
FRISCH
ISOLIERTEN
HUMANEN
ZELLEN
56
4.5.1.1.
UNVERAENDERTER
FASL
IN
PSORIATISCHEN
KERATINOZYTEN
56
4.5.1.2.
UNVERAENDERTES
FAS
IN
PSORIATISCHEN
KERATINOZYTEN
57
4.5.2.
EXPRESSION
VON
FAS/FASL
AUF
KULTIVIERTEN
KERATINOZYTEN
DER
ERSTEN
UND
DER
ZWEITEN
PASSAGE
58
4.5.2.1.
ANALYSE
DER
FASL-EXPRESSION
58
4.5.2.2.
ANALYSE
DER
FAS-EXPRESSION
60
4.6.
STIMULATIONSVERSUCHE
61
4.6.1.
EINFLUSS
DER
24
H
UND
48
H-IFN-Y-,
CONA
UND
TPA-STIMULATION
AUF
DIE
FASL-EXPRESSION
VON
FRISCH
ISOLIERTEN
KERATINOZYTEN
61
4.6.2.
EINFLUSS
DER
24
H-IFN-Y
UND
LPS-STIMULATION
AUF
DIE
FASL-EXPRESSION
VON
PASSAGIERTEN
KERATINOZYTEN
63
4.7.
APOPTOSE-VERSUCHE
64
4.7.1.24
H-KOKULTUREN
64
4.7.1.1.24
H-KOKULTUR
MIT
24
H-CONA-STIMULIERTEN
JURKAT-ZELLEN
64
4.7.1.2.24
H-KOKULTUR
MIT
48
H-CONA-STIMULIERTEN
JURKAT-ZELLEN
66
4.7.2.48
H-KOKULTUREN
67
4.7.2.1.48
H-KOKULTUR
MIT
24
H
UND
48
H-CONA-STIMULIERTEN
JURKAT-ZELLEN
67
4.8.
IMMUNHISTOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
68
4.8.1.
HISTOCHEMISCHE AUSWERTUNG
DER
EPIDERMIS
68
4.8.1.1.
AUSWERTUNG
DER
FASL-EXPRESSION
68
4.8.1.2.
AUSWERTUNG
DER
FAS-EXPRESSION
70
4.8.1.3.
VERHAELTNIS
VON
FAS
UND
FASL
ZUEINANDER
UNTER
IL-10-THERAPIE
72
4.8.2.
HISTOCHEMISCHE AUSWERTUNG
DER
DENNIS
73
4.8.2.1.
AUSWERTUNG
DER
FASL-EXPRESSION
73
4.8.2.2.
AUSWERTUNG
DER
FAS-EXPRESSION
74
4.8.3.
PHOTOGRAPHISCHE
AUSWERTUNG
DER
APAAP-SCHNITTE
75
4.8.3.I.
PHOTODOKUMENTATION
DER
FASL-EXPRESSION
75
4.8.3.2.
PHOTODOKUMENTATION
DER
FAS-EXPRESSION
80
5.
DISKUSSION
84
5.1.
VERHALTEN
DER
FAS
UND
FASL-EXPRESSION
AUF
KERATINOZYTEN
EX
VIVO
UND
IN
VITRO
UND
DEREN
BEDEUTUNG
FUER
DIE
IMMUNOLOGIE DER
HAUT
84
5.2.
EINFLUSS
AUF
DIE
REGULATION DER
FASL-EXPRESSION DER
KERATINOZYTEN
UND
REGULATORISCHE
MECHANISMEN
DER
APOPTOSE-INDUKTION
IN
T-ZELLEN
88
53.
MODULATORISCHE
WIRKUNG
DES
IL-10
AUF
DIE
EXPRESSION
VON
FAS
UND
FASL DER
KERATINOZYTEN
VON
PSORIATISCHER UND
YYNORMALER"
HAUT
91
6.
ZUSAMMENFASSUNG
97
7.
LITERATURVERZEICHNIS
99
8.
DANKSAGUNG
114
9.
LEBENSLAUF
115
10.
EIDESSTATTLICHE
ERKLAERUNG
116 |
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