Untersuchungen zur Regulation der Sulfatassimilation und Glutathion-Synthese in Pappeln (Populus tremula x Populus alba):
Gespeichert in:
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
[Frankfurt/M.]
[Wiss.-Verl. Maraun]
2002
|
Schriftenreihe: | Schriftenreihe der Professur für Baumphysiologie / Albert-Ludwigs-Universität Freiburg i. Br.
13 |
Schlagworte: | |
Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
Beschreibung: | Zugl.: Freiburg (Breisgau), Univ., Diss., 2002 |
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I
NHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
I
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
IV
1
EINLEITUNG
1
2
MATERIAL
UND
METHODEN
10
2.1
PFLANZENMATERIAL
10
2.1.1
VEGETATIVE
VENNEHRUNG
11
2.1.2
PFLANZENANZUCHT
14
2.1.3
KULTURBEDINGUNGEN
15
2.1.4
SCHAEDLINGSBEKAEMPFUNG
16
2.1.5
ERNTE
DES
PFLANZENMATERIALS
16
2.2
NACHWEIS
NIEDERMOLEKULARER
THIOLE
17
2.2.1
IN
VJ/RO-BESTIMMUNG
NIEDERMOLEKULARER
THIOLE
17
2.2.1.1
DERIVATISIERUNG
NIEDERMOLEKULARER
THIOLE
MIT
BIMANEN
17
2.2.1.2
TRENNUNG
UND
QUANTIFIZIERUNG
DER
DERIVATISIERTEN
THIOLE
MITTELS
HPLC
18
2.2.2
IMAGING
VON
GLUTATHION
MITTELS
KONFOKALER
LASER-SCANNING-MIKROSKOPIE
20
2.2.2.1
PRINZIP
DER
MESSUNG
20
2.2.2.2
KONFOKALE
LASER-SCANNING-MIKROSKOPIE
22
2.2.2.3
EICHUNG
DER
GSB-FLUORESZENZ
24
2.2.2.4
ATTENUATIONSKORREKTUR
25
2.2.2.5
AUTOFLUORESZENZ
UND
CDNB
KONTROLLEN
25
23
ISOLIERUNG
VON
CHLOROPLASTEN
28
2.3.1
ISOLIERUNG
VON
CHLOROPLASTEN
AUS
PAPPELN
UND
SPINAT
28
2.3.2
INTAKTHEITSTEST
DER
CHLOROPLASTEN
30
2.3.3
BESTIMMUNG
DES
CHLOROPHYLLGEHALTES
30
2.4
BLATTSCHEIBENVERSUCHE
31
2.5
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
32
2.5.1
ISOLIERUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
32
2.5.1.1
ISOLIERUNG
GENOMISCHER
DNA
32
2.5.1.2
ISOLIERUNG
VON
GESAMT-RNA
33
2.5.1.3
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
UND
REINHEITSABSCHAETZUNG
DER
NUKLEINSAEUREN
34
2.5.2
AUFTRENNUNG
VON
DNA
UND
RNA
34
2.5.2.1
RESTRIKTIONSVERDAU
DER
GENOMISCHEN
DNA
34
2.5.2.2
AUFTRENNUNG
VON
DNA
35
I
NHALTSVERZEICHNIS
2.5.2.3
ELEKTROPHORETISCHE
AUFTRENNUNG
VON
RNA
36
2.5.3
TRANSFER
UND
FIXIERUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
AUF
EINE
MEMBRAN
(YYBLOTTING")
36
2.5.4
SONDENHERSTELLUNG
3
7
2.5.4.1
REVERSE
TRANSCRIPTION-PCR
40
2.5.4.2
AUFREINIGUNG
DER
AMPLIFIZIERTEN
CDNA
41
2.5.4.3
LIGATION
42
2.5.4.4
TRANSFORMATION
42
2.5.4.5
SELEKTION
UND
ANZUCHT
POSITIVER
KLONE
43
2.5.4.6
PRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
44
2.5.5
HYBRIDISIERUNG
44
2.6
PROTEINBIOCHEMIE
47
2.6.1
BESTIMMUNG
VON
GESAMTPROTEIN
47
2.6.2
WESTERN
BLOTTING
48
2.6.2.1
SDS-GELELEKTROPHORESE
48
2.6.2.2
PROTEINTRANSFER
49
2.6.2.3
DETEKTION
50
2.6.3
ENZYMATIK
51
2.6.3.1
HERSTELLUNG
VON
PFLANZENEXTRAKTEN
FUER
DIE
ENZYMASSAYS
51
2.6.3.2
ATP-SULFIIRYLASE
52
2.6.3.3
APS-REDUKTASE
53
2.6.3.4
SULFIT-REDUKTASE
54
2.6.3.5
SERIN-ACETYLTRANSFERASE
56
2.6.3.6
0-ACETYL-L-SERIN(THIOL)LYASE
59
2.7
DATENAUSWERTUNG
60
3
ERGEBNISSE
62
3.1
GENOMISCHE
ORGANISATION
DER
SULFATASSIMILATION
IN
PAPPELN
62
3.2
AUSWIRKUNG
DER
S-
UND
N-ERNAEHRUNG
AUF
DIE
SULFATASSIMILATION
68
3.2.1
KURZFRISTIG
VERAENDERTE
S-UND
N-EMAEHRUNG
68
3.2.2
LANGFRISTIG
VERAENDERTE
S
UND
N-EMAEHRUNG
71
3.2.2.1
EINFLUSS
DER
S
UND
N-EMAEHRUNG
AUF
DAS
WACHSTUM
DER
PAPPELN
71
3.2.2.2
EINFLUSS
DER
S
UND
N-EMAEHRUNG
AUF
DAS
GESAMTPROTEIN
75
3.2.2.3
EINFLUSS
DER
S
UND
N-EMAEHRUNG
AUF
DIE
THIOLGEHALTE
77
3.2.2.4
EXPRESSIONSANALYSEN
79
3.3
EINFLUSS
DES
GSH-GEHALTES
AUF
DIE
SULFATASSIMILATION
84
3.3.1
EINFLUSS
ERHOEHTER
GSH-KONZENTRATIONEN
AUF
DIE
SULFATASSIMILATION
IN
TRANSGENEN
PAPPELN
_84
3.3.1.1
TRANSGENE
PAPPELN
MIT
UEBEREXPRESSION
DER
Y-ECS
IMCYTOSOL
84
3.3.1.2
TRANSGENE
PAPPELN
MIT
UEBEREXPRESSION
DER
Y-ECS
IN
DEN
PLASTIDEN
91
II
I
NHALTSVERZEICHNIS
3.3.2
EINFLUSS
VON
BSO
UND
GSH
AUF
DIE
SULFATASSIMILATION
93
3.3.2.1
FUETTERUNG
VON
GSH
UND
BSO
UEBER
BLATTSCHEIBEN
93
3.3.2.2
FUETTERUNG
VON
GSH
UND
BSO
UEBER
DIE
WURZELN
INTAKTER
PAPPELN
96
3.4
IN
VIVO-LOKALISIERUNG
UND
QUANTIFIZIERUNG
VON
GSH
99
3.4.1
FLUORESZENZMARKIERUNG
VON
PAPPELBLAETTEM
MIT
MCB
99
3.4.2
SPEZIFITAET
DER
MARKIERUNG
FUER
GSH
102
3.4.3
SUBZELLULAERE
LOKALISIERUNG
DES
FLUORESZENZMARKIERTEN
GSH-POOLS
108
3.4.4
QUANTITATIVE
MESSUNGEN
CYTOSOLISCHER
GSH-GEHALTE
112
4
DISKUSSION
117
4.1
LOKALISIERUNG
UND
GENOMISCHE
ORGANISATION
DER
ENZYME
DER
SULFATASSIMILATION,
GLUTATHION-SYNTHESE
UND
GLUTATHION-REDUKTION
IN
PAPPELN
117
4.2
REGULATION
DER
SULFATASSIMILATION
DURCH
NITRATVERFUEGBARKEIT,
SULFATVERFUEGBARKEIT
UND
GSH
120
4.3
ZELLULAERE LOKALISIERUNG
VON
GSH
IN
PAPPELN
129
4.4
FAZIT
135
5
ZUSAMMENFASSUNG
137
6
LITERATURVERZEICHNIS
142
7
ANHANG
162
DANKSAGUNG
169
IN |
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spelling | Hartmann, Tanja Verfasser aut Untersuchungen zur Regulation der Sulfatassimilation und Glutathion-Synthese in Pappeln (Populus tremula x Populus alba) vorgelegt von Tanja Hartmann [Frankfurt/M.] [Wiss.-Verl. Maraun] 2002 V, 169 S. Ill., graph. Darst. : 21 cm txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Schriftenreihe der Professur für Baumphysiologie / Albert-Ludwigs-Universität Freiburg i. Br. 13 Zugl.: Freiburg (Breisgau), Univ., Diss., 2002 Sulfate (DE-588)4138384-9 gnd rswk-swf Regulation (DE-588)4049075-0 gnd rswk-swf Biosynthese (DE-588)4006902-3 gnd rswk-swf Glutathion (DE-588)4157715-2 gnd rswk-swf Assimilation Biologie (DE-588)4199389-5 gnd rswk-swf Pappel (DE-588)4173223-6 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Pappel (DE-588)4173223-6 s Sulfate (DE-588)4138384-9 s Assimilation Biologie (DE-588)4199389-5 s Regulation (DE-588)4049075-0 s DE-604 Glutathion (DE-588)4157715-2 s Biosynthese (DE-588)4006902-3 s Albert-Ludwigs-Universität Freiburg i. Br. Schriftenreihe der Professur für Baumphysiologie 13 (DE-604)BV011091567 13 DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=012886750&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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