Tissue engineering von autogenem Knorpelgewebe: Proliferation und Differenzierung humaner Chondrozyten in serumfreien Kulturmedien
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2004
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I
NHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
VII
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
VIII
1.
EINFUEHRUNG
1.1
EINLEITUNG
.
1
1.2
PROBLEMSTELLUNG
.
3
1.3
ZIELSTELLUNG
UND
VORGEHENS
WEISE
.
4
2.
KONZEPTIONELLE
UND
BEGRIFFLICHE
GRUNDLAGEN
2.1
METHODOLOGISCHE
GRUNDLAGEN.
5
2.2
BEGRIFFLICHE
GRUNDLAGEN
.
5
2.2.1
TISSUE
ENGINEERING
.
5
2.2.1.1
BEGRIFF
UND
EINSATZGEBIETE
DES
TISSUE
ENGINEERING
.
5
2.2.1.2
VORGEHENS
WEISE
DES
TISSUE
ENGINEERING
.
8
2.2.1.3
NAEHRMEDIEN
-
SERUMHALTIG
VERSUS
SERUMFREI
.
12
2.2.2
KNORPELGEWEBE
.
15
2.2.2.1
ALLGEMEINER
AUFBAU
.
15
2.2.2.2
EIGENSCHAFTEN
DES
KNORPELS
.
15
2.2.2.3
KNORPELARTEN
.
16
2.2.2.3.1
HYALINER
KNORPEL
.
16
2.2.2.3.2
ELASTISCHER
KNORPEL
.
16
2.2.2.3.3
FASERKNORPEL.
17
3.
PRIONEN-ERKRANKUNGEN
UND
DIE
UEBERTRAGUNGSGEFAHR
DURCH
RINDERPRODUKTE
3.1
TRANSMISSIBLE
SPONGIFORME
ENZEPHALOPATHIEN
BEI
MENSCH
UND
TIER
-
UEBERBLICK
.
18
3.2
TRANSMISSIBLE
ENZEPHALOPATHIEN
BEIM
MENSCHEN
.
19
3.3
TRANSMISSIBLE
ENZEPHALOPATHIEN
BEIM
TIER
.
22
3.4
UEBERTRAGUNGSWEGE
SPONGIFORMER
ENZEPHALOPATHIEN
UND
RISIKOEINSCHAETZUNG
VON
RINDERPRODUKTEN.
23
INHALTSVERZEICHNIS
V
4.
MATERIAL
UND
METHODE
4.1
KNORPEL
UND
ZELLPRAEPARATION
.
26
4.1.1
GEWINNUNG
VON
KNORPELGEWEBE.
26
4.1.2
ZELLISOLIERUNG
UND
-KULTIVIERUNG
IM
MONOLAYER
.
26
4.2
ZELLKULTURTECHNIKEN
.
27
4.2.1
HERSTELLUNG
DER
KULTURMEDIEN.
27
4.2.1.1
KULTURMEDIUM
MIT
ZUSATZ
VON
FCS
.
27
4.2.1.2
SERUMFREIE
KULTURMEDIEN.
27
4.2.1.2.1
SERUMFREIES
KULTURMEDIUM
MIT
GALAKTOSE.
27
4.2.1.2.2
SERUMFREIES
KULTURMEDIUM
MIT
INSULIN-TRANSFERRIN-SELEN
(ITS).
28
4.2.1.2.3
FIBROBLAST-GROWTH-MEDIUM
(FGM)
.
28
4.2.2
VORGEHENS
WEISE
BEI
DEN
VERSUCHEN.
28
4.2.3
VERDUENNUNGSREIHE
MIT
FCS-HALTIGEM
NAEHRMEDIUM
-
VERSUCHSAUFBAU
.
28
4.2.4
MONOLAYERKULTUR
-
VERSUCHSAUFBAU.
29
4.2.4.1
SERUMFREIES
NAEHRMEDIUM
MIT
GALAKTOSE.
29
4.2.4.2
FIBROBLAST-GROWTH-MEDIUM
(FGM)
.
30
4.2.4.3
SERUMFREIES
NAEHRMEDIUM
MIT
INSULIN-TRANSFERRIN-SELEN
(ITS)
.
,
.
30
4.3
TRYPSINPASSAGE
UND
ZELLZAEHLUNG.
31
4.4
HISTOLOGISCHE
FAERBUNGEN
.
32
4.5
GERAETE
.
32
4.6
MATERIALIEN
.
32
4.7
CHEMIKALIEN
.
33
5.
ERGEBNISSE
5.1
VERDUENNUNGSREIHE
MIT
FCS-HALTIGEM
KULTURMEDIUM
.
34
5.2
MONOLAYERKULTUR
-
VERSUCHSAUFBAU.
3
5
5.2.1
SERUMFREIES
NAEHRMEDIUM
MIT
GALAKTOSE.
35
5.2.2
VERGLEICH
DES
PROLIFERATIONSVERHALTENS
ZWISCHEN
FCS,
ITS
UND
FGM
IN
MONOLAYER.
39
5.3
VERGLEICH
DER
PROLIFERATIONSRATE
AM
KULTURENDE
IN
ABHAENGIGKEIT
VOM
ALTER
.
46
INHALTSVERZEICHNIS
VI
5.3.1
VERGLEICH
DER
MAXIMALEN
ZELLZAHLEN
ZWISCHEN
GALAKTOSE
UND
FCS
IN
ABHAENGIGKEIT
VOM
ALTER
.
46
5.3.2
VERGLEICH
DER
MAXIMALEN
ZELLZAHLEN
ZWISCHEN
DEN
SERUMFREIEN
NAEHRMEDIEN
FGM
UND
ITS
UND
DEM
NAEHRMEDIUM
MIT
ZUSATZ
VON
FCS
IN
ABHAENGIGKEIT
VOM
ALTER
.
47
5.4
HISTOLOGISCHE
FAERBUNGEN
.
48
5.4.1
BEURTEILUNG
VON
CHONDROZYTEN
IN
MONOLYERKULTUR
HINSICHTLICH
DES
PHAENTOYPS
.
48
5.4.2
BEURTEILUNG
VON
CHONDROZYTEN
IN
MONOLAYERKULTUR
HINSICHTLICH
IHRER
DIFFERENZIERUNG
.
51
6.
DISKUSSION
6.1
TISSUE
ENGINEERING
-
AUSSICHTEN
UND
GRENZEN
BEI
DER
ZELLZUECHTUNG
.
53
6.1.1
LIMITIERUNG
UND
MOEGLICHKEITEN
BEI
DER
GEWINNUNG
DER
AUSGANGSZEILEN
.
53
6.1.2
CHONDROZYTENDEDIFFERENZIERUNG
UND
-REDIFFERENZIERUNG
BEI
DER
ZELLKULTIVIERUNG
.
54
6.1.3
PROBLEMATIK
UND
PERSPEKTIVEN
VON
SERUMFREIEN
NAEHRMEDIEN
IM
VERGLEICH
ZU
SERUMHALTIGEN
NAEHRMEDIEN
BEZUEGLICH
DES
PROLIFERATIONSPOTENTIALS
.
56
6.2
RELEVANZ
DER
ERGEBNISSE
IM
HINBLICK
AUF
DAS
UEBERTRAGUNGSRISIKO
TRANSMISSIBLER
ENZEPHALOPATHIEN
.
58
6.3
AUSBLICK
UND
PERSPEKTIVEN
DES
TISSUE
ENGINEERINGS
.
59
7.
ZUSAMMENFASSUNG
.
62
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ARBEIT
.
64
LITERATURVERZEICHNIS
.
66
ERKLAERUNG
UEBER
DIE
EIGENSTAENDIGE
ABFASSUNG
DER
ARBEIT.
73
LEBENSLAUF
.
74 |
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