Einflüsse der Sphingolipide: Sphingosin-1-Phosphat und Sphingosylphosphorylcholin auf das Wachstum der glatten Gefäßmuskelzellen der Rattenaorta:
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2003
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INHALT
1
INHALT
1
EINLEITUNG.
_
_
-
.
3
1.1
ATHEROSKLEROSE
.
3
1.2
DAS
ENDOTHEL
.
6
1.3
DIE
GLATTEN
MUSKELZELLEN
.
7
1.4
PDGF
.
9
1.5
ANGIOTENSIN
II
.
11
1.6
DIE
SPHINGOLIPIDE:
SPHINGOSIN
1
-PHOSPHAT
UND
SPHINGOSINPHOSPHORYLCHOLIN
.
13
SPHINGOLIPID-METABOLISMUS
.
14
CERAMID
.
17
SPHINGOSIN-L-PHOSPHAT
.
17
EDG-REZEPTOREN
.
19
SPHINGOSINPHOSPHORYLCHOLIN
.
23
2
FRAGESTELLUNG
-
-
--------------------
25
3
METHODEN
UND
MATERIAL
-
-
-
-
.
-
-
-
-
-
-.
_
.
-
-
26
3.1
ISOLIERUNG
UND
KULTIVIERUNG
VON
GLATTEN
GEFAESSMUSKELZELLEN
AUS
DER
RATTENAORTA.
.
26
3.2
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
BRADFORD.
.
27
3.3
GEL-ELEKTROPHORESE
UND
IMMUNOBLOT
.
27
3.4
BESTIMMUNG
DER
DNA-SYNTHESERATE
.
28
3.5
MESSUNG
DER
ZEITZAHL,
DES
ZELLVOLUMENS
UND
DES
ZELLDURCHMESSERS
(ZELLZAEHLUNG)
.
29
3.6
BESTIMMUNG
DER
FREIEN
INTRAZELLULAEREN
CALCIUM-IONEN-KONZENTRATION
.
20
3.7
FLOW
CYTOMETRISCHE
ZELLZYKLUS-ANALYSE
.
30
3.8
RNA
ISOLIERUNG
UND
NORTHERN
BLOT
.
31
3.9
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
33
3.10
MATERIALIEN.
.
34
4
ERGEBNISSE.
40
4.1
MORPHOLOGISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DER
GLATTEN
GEFAESSMUSKELZELLEN
.
40
4.2
EFFEKTE
VON
SPP/
SPC
AUF
DIE
PHOSPHORYLIERUNG
DER
ERK
1/2
(MAP-KINASE-ISOFORMEN
P42YY**
&
P44YY
PK
)
.
41
4.3
EINFLUSS
VON
PTX
AUF
DIE
DURCH
SPC-KINETIK
INDUZIERTE
PHOSPHORYLIERUNG
DER
ERK
1/2
IN
GLATTEN
GEFAESSMUSKELZELLEN
.
42
2
INHALT
4.4
EFFEKT
VON
ANG
II
AUF
DIE
[CA
2+
],
-ZUNAHME
IN
SPP/SPC
VORINKUBIERTEN
GLATTEN
MUSKELZELLEN
.
43
4.5
EFFEKT
VON
PTX
AUF
DIE
SPP/SPC
INDUZIERTE
[CA
2+
],
-ZUNAHME
.
44
4.6
EFFEKTE
VON
SPC/
SPP
ALLEINE
UND
IN
KOMBINATION
MIT
PDGF-BB
UND
ANGLL
AUF
DIE
ZELLZAHL
UND
DEN
DURCHMESSER
DER
GLATTEN
GEFAESSMUSKELZELLEN.
.
46
4.7
WIRKUNG
VON
SPP
BZW.
SPC
AUF
DIE
EXPRESSION
DES
ATPREZEPTORS
MRNA
.
47
4.8
KONZENTRATIONSABHAENGIGE
WIRKUNG
VON
SPC
AUF
DIE
PROLIFERATION
.
48
4.9
EINFLUSS
VON
PTX
AUF
DIE
DURCH
SPC
INDUZIERTE
PROLIFERATION
.
49
4.10
EFFEKT
VON
SPC
AUF
DIE
ZELLULAERE
DNA-SYNTHESE
UND
DIE
ZELLZAHL
IN
GLATTEN
GEFAESSMUSKELZELLEN
ANHAND
EINER
ZEIT-KINETIK
ZUR
BESTIMMUNG
DER
ZELLZYKLISCHEN
PROGRESSION
VON
DER
G
R
ZUR
S-PHASE
.
50
4.11
ZELLZYKLUS-ANALYSE
MITTELS
DOPPELFAERBE-FLUSS-CYTOMETRIE
BEI
SPC-INKUBIERTEN
GLATTEN
GEFAESSMUSKELZELLEN
ZUR
BESTIMMUNG
DES
ZELLZYKLUS-UEBERGANGS
VON
DER
G
2
-
ZUR
GO/I
-PHASE.
.
51
4.12
EFFEKT
VON
SPC
AUF
DIE
PHOSPHORYLIERUNG
DES
TYROSIN
15-RESTESDER
CDC2-KINASE
.
52
S
DISKUSSION
-
54
5.1.
EINFLUSS
VON
SPP,
SPEZIELLER
SPC
AUF
DIE
MAPKINASEN-AKTIVITAETEN
.
54
5.2
WIRKUNG
VON
SPP/SPC
AUF
DIE
INTRACELLULAERE
CALCIUM-IONEN-KONZENTRATION.
.
55
5.3
WIRKUNG
VON
SPP/SPC
AUF
DIE
EXPRESSION
DES
AT
S
-REZEPTORS
.
56
5.4
PROLIFERATIVER
EFFEKT
VON
SPP/SPC
.
56
5.5
KONZENTRATIONSABHAENGIGE,
PTX
ABHAENGIGE
WIRKUNG
VON
SPC
AUF
DIE
PROLIFERATION
.
57
5.6
ZELLZYKLISCHE
BETRACHTUNG
DER
SPC-EFFEKTE
.
57
6
ZUSAMMENFASSUNG.
-
.
-
.
-
-
_
_
60
7
LITERATURVERZEICHNIS.
YY
YYYYYY
61
8
ABKUERZUNGEN-.-.-.YY.
_
_
72
9
DANKSAGUNG
-
-
-
-
-
-
.
_
.
74
10
LEBENSLAUF-.
YYYYYYYYYYYY*YYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYY
YY*YYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYYY
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