Das Cytomegalovirus (CMV) bei Empfängern von soliden Organen unter Auswertung der Leber- und Nierentransplantationen der Klinik für Abdominal-, Transplantations- und Gefäßchirurgie der Universität Leipzig (1933 bis 1997) und der klinische Einsatz einer mRNA -rT-PCR zum Nachweis von CMV:
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS 1
1. EINFUEHRUNG 3
1.1. GESCHICHTLICHER UEBERBLICK 3
1.2. DAS HUMANE CYTOMEGALIEVIRUS 3
1.2.1. EINTEILUNG, STRUKTUR, PROTEINE UND ZELLTROPISMUS 3
1.2.2. REPLIKATION
7
1.2.3. IMMUNOLOGIE 9
1.3. DIE ROLLE DER
CMV-
INFEKTION IN DER TRANSPLANTATIONSMEDIZIN
12
1.3.1. KLINISCHES BILD
/
2
1.3.2. CMV-KLINIK-SCORE 14
1.3.3. THERAPIE UND PRAEVENTION 15
2. PATIENTENKOLLEKTIV UND ZIELSTELLUNG DER ARBEIT 19
2.1.
PATIENTENKOLLEKTIV
19
2.2.
ZIELSTELLUNG DER ARBEIT 24
3. MATERIAL UND METHODEN 25
3.1.
ALLGEMEINES 25
3.2. ELISA 25
3.3.
PP65- ANTIGENNACHWEIS 26
3.3. J. DER PP65- ANTIGENNACHWEIS
2
6
3.3.2. MATERIALGEWINNUNG UND TESTDURCHFUEHRUNG 26
3.4. DNA- PCR
27
3.4.1. PRINZIP DER POLYMERASE-KETTENREAKTION 27
3.4.2. MATERIALPRAEPARATION ZUR DURCHFUEHRUNG DER DNA-PCR 29
3.4.3. PRIMER FUER DIE DNA- PCR 20
3.4.4. DNA- PCR CYCLER PROTOKOLL 20
3.4.5. ANALYSE UND DARSTELLUNG DER DNA- PCR PRODUKTE 30
3.5.
ZF.LLKUI.TUR 31
1
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3.5.1. ZELLZUCHT
31
3.5.1.1. ZCLLZUCHT FUER DIE YYIN VITRO" TESTUNG DER MRNA- RT- PCR 31
3.5.1.2. ZENTRIFUGATIONSZELLKULTUR 31
3.5.2. VIRUSANZUCHT FUER DIE YY IN VITRO " TESTUNG DER MRNA- RT- PCR 31
3.5.3. IMMUNPEROXIDASEREAKTION
32
3.6. CMV- MRNA- RT- PCR
33
3.6.1. PRINZIP DER REVERSE TRANSKRIPTASE PCR 23
3.6.2. MATERIALPRAEPARATION ZUR DURCHFUEHRUNG DER MRNA- RT- PCR 33
3.6.3. RNA - PRAEPARATION ZUR DURCHFUEHRUNG DER MRNA- RT- PCR 33
3.6.4. MRNA- RT- PCR CYCLER PROTOKOLL UND TESTDURCHFUEHRUNG 34
3.7.
SENSITIVITAET, SPEZIFITAET
UND
STATISTISCHE VORHERSAGEWERTE 37
4. ERGEBNISSE
38
4.1.
KLINISCHE ERGEBNISSE 38
4.1.1. ALLGEMEINES ZU DEN KLINISCHEN ERGEBNISSEN 28
4.1.2. KLINISCHE ERGEBNISSE DER IEBERTRANSPLANTATEMPFAENGER 40
4.1.3. KLINISCHE ERGEBNISSE DER NIERENTRANSPLANTATEMPFAENGER 45
4.1.4. BEISPIELE FUER CMV- ERKRANKUNGSVERLAEUFE 20
4.2.
EXPERIMENTELLE ERGEBNISSE 53
4.2.1. ALLGEMEINES 23
4.2.2. ERMITTLUNG VIRUSKONZENTRATIONFUER DIE YYIN VITRO
" VERSUCHE 24
4.2.3. KINETISCHE UNTERSUCHUNGEN ZUR MRNA - RT- PCR 24
4.2.4. ANWENDUNG DER MRNA-RT-PCR MIT PATIENTENPROBEN 25
4.2.5. MRNA- RT- PCR UND CMV- ERKRANKUNG 26
5. DISKUSSION 61
6. SCHLUSSFOLGERUNGEN
69
7.
ANHANG 71
8. LITERATUR
76
9. ZUSAMMENFASSUNG DER ARBEIT
1
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