Entwicklung effizienter Screeningmethoden zur Mutationsanalyse in Risikogenen bei Typ-2-Diabetikern:
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2001
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1
EINLEITUNG
1
1.1
REGULATION
DES
GLUCOSEGLEICHGEWICHTS
1
1.2
ERSCHEINUNGSFORM
DES
DIABETES
MELLITUS
2
1.2.1
INSULINABHAENGIGER
DIABETES
MELLITUS
2
1.2.2
NICHT
-
INSULINABHAENGIGER
(TYP
-2)
DIABETES
2
1.3
DAS
INSULIN
REZEPTOR
SUBSTRAT
-1
(IRS-1)
GEN
6
1.4
DAS
ANGIOTENSIN
-
CONVERTING
ENZYM
(ACE)
GEN
8
2
PROBLEMSTELLUNG
10
2.1
UNTERSUCHUNGSMATERIAL
10
2.2
ZIEL
DER
ARBEIT
12
3
MATERIAL
UND
METHODEN
18
3.1
MATERIALIEN
18
3.1.1
GERAETE
18
3.1.2
CHEMIKALIEN
19
3.1.3
KITS
19
3.1.4
OLIGONUKLEOTIDE
20
3.2
METHODEN
21
3.2.1
PHOTOMETRISCHE
QUANTIFIZIERUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
21
3.2.2
PRAEPARATION
GENOMISCHER
DNA
21
3.2.3
AMPLIFIKATION
VON
GENOMISCHER
DNA
DURCH
DIE
POLYMERASEKETTENREAKTION
23
3.2.4
AUFREINIGUNG
VON
PCR
-
PRODUKTEN
25
3.2.5
GELELEKTOPHORETISCHE
AUFTRENNUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
26
3.2.6
RESTRIKTIONSENZYMVERDAU
27
3.2.7
SINGLE
STRANDED
COFORMATION
POLIMORPHISM
-
ANALYSE
28
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
3.2.8
SEQUENZIERUNG
29
3.2.9
PCR
-
ELISA
31
3.2.9.1
DIG
-
MARKIERUNG
DER
PCR
-
PRODUKTE
31
3.2.9.2
DIG
-DETECTION
33
3.2.10
REAL
-
TIME
TAQMAN
PCR
34
4
ERGEBNISSE
37
4.1
INSULIN
REZEPTOR
SUBSTRAT
-1
GEN
38
4.1.1
RESTRIKTIONSENZYMVERDAU
39
4.1.2
SSCP
ANALYSE
41
4.1.2.1
GENERIERUNG
EINES
HOMOZYGOTEN
AMPLIFIKATES
DER
MUTIERTEN
SEQUENZ
DES
CODON
972
-
POLYMORPHISMUS
42
4.1.3
SEQUENZIERUNG
43
4.1.4
PCR
-
ELISA
44
4.1.4.1
DIG
-
MARKIERUNG
DER
PCR
-
FRAGMENTE
44
4.1.4.2
DIG
-
DETECTION
45
4.1.5
REAL
-
TIME
TAQMAN
PCR
51
4.1.5.1
BEGRIFFE
UND
DEFINITIONEN
51
4.1.5.2
AUSWAHL
VON
PRIMERN
UND
SONDEN
52
4.1.5.3
PRIMERTITRATION
55
4.1.5.4
SONDENTITRATION
57
4.1.5.5
PCR
-
BEDINGUNGEN
61
4.2
ANGIOTENSIN
-
CONVERTING
ENZYM
GEN
65
5
DISKUSSION
67
5.1
ACE
-
POLYMORPHISMUS
67
5.2
G- A
POLYMORPHISMUS
IN
CODON
972
DES
IRS
-1
GENS
68
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
6
ZUSAMMENFASSUNG
76
7
LITERATURVERZEICHNIS
78
DANKSAGUNG
87
LEBENSLAUF
88 |
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