Vergleichende Etablierung und Charakterisierung eines orthotopen Kolonkarzinom-Xenograft-Modells:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2003
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| Beschreibung: | München, Univ., Diss., 2003 |
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INHALTSVERZEICHNIS
I
1.
EINLEITUNG 1
1.1 DARMKREBS 1
1.2 PRAEKLINISCHE TIERMODELLE IN DER ONKOLOGIE 6
1.3 GFP (GRUEN FLUORESZIERENDES PROTEIN) ALS REPORTER 12
2.
FRAGESTELLUNG 15
3.
MATERIAL UND METHODEN 16
3.1 MATERIAL 16
3.1.1 CHEMIKALIEN UND REAGENZIEN 16
3.1.2 GERAETE 17
3.1.3 PUFFER UND LOESUNGEN 18
3.1.4 REAKTIONSSYSTEME 19
3.1.5 TIEMAHRUNG 19
3.1.6 SONSTIGES 19
3.1.7 ZELLEN 20
3.1.7.1 HT29 20
3.1.7.2 HT29-GFP 20
3.1.8 MAEUSE 20
3.2 METHODEN 21
3.2.1 ZELLBIOLOGISCHE METHODEN 21
3.2.1.1 ZELLKULTUR 21
3.2.1.2 LANGZEITLAGERUNG EUKARYONTISCHER ZELLEN 21
3.2.1.3 BESTIMMUNG VON GENERATIONSZAHL, GENERATIONSZEIT UND TEILUNGSRATE
22
3.2.2
TIERVERSUCHE 23
3.2.2.1 HALTUNG UND FUETTERUNG DER MAEUSE 23
3.2.2.2 MARKIERUNG DER TIERE 23
3.2.2.3 OPERATIONEN 23
3.2.2.4 ABBRUCHKRITERIEN 27
3.2.2.5 MESSUNG VON TUMORGROESSE UND KOERPERGEWICHT 27
3.2.2.6 VERSUCHSENDE 28
3.2.3 HISTOLOGISCHE UND IMMUNHISTOCHEMISCHE ANALYSE 28
3.2.3.1 GEWEBEFIXIERUNG UND PARAFFINSCHNITTE 28
3.2.3.2 HE-FAERBUNG 30
3.2.3.3 IMMUNHISTOLOGISCHER NACHWEIS VON CEA 32
3.2.3.4 IMMUNHISTOLOGISCHER NACHWEIS VON CD34 34
3.2.3.5 BESTIMMUNG DER METASTASENFLAECHE UND -ANZAHL VON HISTOLOGISCHEN
PRAEPARATEN
(LEBER, LUNGE) 36
3.2.3.6 BESTIMMUNG DER CD34 - POSITIVEN GEFAESSE DER ORTHOTOPEN
DARMTUMOREN IM PARAFFINSCHNITT 36
3.2.4 CEA-ELISA 37
3.2.5 STATISTISCHE AUSWERTUNG 38
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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INHALTSVERZEICHNIS
4.
ERGEBNISSE 39
4.1
ERGEBNISSE DER IN VITRO-VERSUCHE 39
4.1.1 WACHSTUMSVERHALTEN HT29 UND HT29-GFP IN VITRO
39
4.1.2 FLUORESZENZ IN VITRO 42
4.2 ERGEBNISSE DER IN VIVO-VERSUCHE 45
4.2.1 SUBKUTANE ZELLINJEKTION 45
4.2.1.1 VERSUCHSABLAUF 45
4.2.1.2 TUMORWACHSTUM 46
4.2.1.3 KOERPERGEWICHTSENTWICKLUNG WAEHREND DES VERSUCHS 51
4.2.1.4 METASTASIERUNG 52
4.2.1.5 FLUORESZENZ SUBKUTANER HT29-GFP-TUMOREN 57
4.2.2 ORTHOTOPE ZELLINJEKTION 58
4.2.2.1 VERSUCHSABLAUF 58
4.2.2.2 TUMORWACHSTUM 59
4.2.2.3 KOERPERGEWICHTSENTWICKLUNG WAEHREND DES VERSUCHS 64
4.2.2.4 METASTASIERUNG 66
4.2.2.5 VASKULARISIERUNG 70
4.2.2.6 FLUORESZENZ ORTHOTOPER HT29-GFP-TUMOREN 74
4.2.2.7 CEA 75
4.2.3 ORTHOTOPE FRAGMENTFIXATION 79
4.2.3.1 VERSUCHSABLAUF 79
4.2.3.2 TUMORWACHSTUM 82
4.2.3.3 KOERPERGEWICHTSENTWICKLUNG WAEHREND DES VERSUCHS 85
4.2.3.4 METASTASIERUNG 86
4.2.3.5 VASKULARISIERUNG 91
4.2.3.6 CEA 96
4.2.4 VERGLEICH DER IN VIVO-VERSUCHE 98
4.2.4.1 TUMORWACHSTUM 98
4.2.4.2 KOERPERGEWICHT 100
4.2.4.3 METASTASIERUNG 102
4.2.4.4 VASKULARISIERUNG 105
4.2.4.5 ZUSAMMENHANG ZWISCHEN METASTASIERUNG UND VASKULARISIERUNG 107
4.2.4.6 FLUORESZENZ 109
4.2.4.7 CEA 109
5.
DISKUSSION 112
6.
ZUSAMMENFASSUNG 124
7.
SUMMARY 126
8.
ABKUERZUNGEN 128
9.
LITERATURVERZEICHNIS 130 |
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