Experimentelle Therapieoptionen bei malignen Gliomen:
Gespeichert in:
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Veröffentlicht: |
2003
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Beschreibung: | Leipzig, Univ., Habil.-Schr., 2003 |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1. EINLEITUNG 2
1.1 MALIGNE GLIOME IM KINDESALTER 2
1.2 THERAPIE MALIGNER GLIOME IM KINDESALTER 3
1.3 ALTERNATIVE THERAPIEWEGE 4
1.3.1 HYALURONIDASE-INHIBITOREN: HEMMUNG DER TUMORZELLINVASION 4
1.3.2 INTERFERON-GAMMA: IMMUNSTIMULATION 9
1.3.3 VALPROINSAEURE:. INDUKTION VON DIFFERENZIERUNG 12
1.4 AUFGABEN UND ZIELSTELLUNGEN DER ARBEIT 13
2. MATERIAL UND*METHODEN 14
2.1 MATERIAL 14
2.1.1 ZELLKULRMATERIAL, REAGENZIEN UND GERAETE 14
2.1.2 ZELLINIEN 14
2.1.3 HYALURONIDASE-INHIBITOREN 20
2.2 METHODEN 22
2.2.1 ALLGEMEINE ZELLKULTURBEDINGUNGEN 22
2.2.2 MESSUNG DER PROLIFERATION I: MTT-ASSAY 22
2.2.3 MESSUNG DER PROLIFERATION II: ZELLZAEHLUNG MITTELS ZELLCOUNTER 23
2.2.4 MESSUNG DER PROLIFERATION III:
3H-THYMIDIN-AUFNAHME 23
2.2.5 ERMITTLUNG DER EXPRESSION VON OBERFLAECHENREZEPTOREN (FACS-ANALYSE)
23
2.2.6 UNTERSUCHUNG DER TUMORZELLBINDUNG AN HA: ADHAESIONSTEST 24
2.2.7 BESTIMMUNG DER MIGRATION VON TUMORZELLEN I:
BOYDEN-KAMMER-EXPERIMENT
28
2.2.8 BESTIMMUNG DER MIGRATION VON TUMORZELLEN II: SPHEROID-MIGRATION 29
2.2.9 MESSUNG DER APOPTOSERATE 30
2.2.10 MESSUNG DER ENZYMSEZEMIERUNG VON PLASMINOGEN-AKTIVATOR-INHIBITOR
TYP 1,
UROKINASE UND GEWEBE-PLASMINOGEN-AKTIVATOR 31
2.2.11 NACHWEIS DER EXPRESSION VON HYALURONIDASE MITTELS RT-PCR 31
2.3 STATISTIK 34
3. ERGEBNISSE 35
3.1 METHODENETABLIERUNG UNTER BESONDERER BERUECKSICHTIGUNG DER BEDEUTUNG
DER
HYALURONSAEURE FUER DIE MIGRATION MALIGNER GLIOME 35
3.1.1 CD44-EXPRESSION 35
3.1.2 HYALURONSAEURE-ADHAESION MALIGNER GLIOMZELLEN 37
3.1.2.1 ETABLIERUNG DER METHODE 37
3.1.2.2 MALIGNE GLIOMZELLEN ADHAERIEREN SPEZIFISCH AN HA 39
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3.1.2.3 DIE HA-ADHAESION IST ABHAENGIG VON DER ZELLDICHTE 41
3.1.2.4 DIE HA-ADHAESION WIRD DURCH CD44 VERMITTELT 42
3.1.2.5 VORBEHANDLUNG MIT HYALURONIDASE VERAENDERT DIE HA-ADHAESION 42
3.1.3 MIGRATION MALIGNER GLIOMZELLEN 45
3.1.3.1 BOYDEN-KAMMER-MIGRATION 45
3.1.3.2 SPHEROIDMIGRATION 47
3.2 EINFLUSS VON HYALURONIDASE-INHIBITOREN AUF MALIGNE GLIOMZELLEN 49
3.2.1 NACHWEIS DER EXPRESSION VON HYALURONIDASE BEI GLIOMEN MITTELS
RT-PCR
49
3.2.2 EINFLUSS VON HYALURONIDASE-INHIBITOREN AUF DIE PROLIFERATION
MALIGNER
GLIOMZELLEN 50
3.2.3 HYALURONIDASE-INHIBITOREN VERAENDERN NICHT DIE HA-ADHAESION 50
3.2.4 HYALURONIDASE-INHIBITOREN VERAENDERN NICHT DIE MIGRATION 52
3.3 EINFLUSS VON INTERFERON-GAMMA AUF MALIGNE GLIOMZEUEFEN 53
3.3.1 IFN-G LOEST WACHSTUMSSTASE UND ABSTERBEN MALIGNER GLIOMZELLEN AUS
53
3.3.2 EINFLUSS VON IFN-G AUF DIE APOPTOSERATE VON A172-ZELLEN 56
3.3.3 EINFLUSS VON IFN-G AUF DIE EXPRESSION VON CD95 57
3.3.4 IFN-G VERMINDERT DIE HA-ADHAESION MALIGNER GLIOMZELLEN 59
3.3.5 EINFLUSS VON IFN-G AUF DIE EXPRESSION VON CD44 60
3.3.6 VERAENDERUNG DER SEZEMIERUNG VON INVASIONSENZYMEN NACH
VORBEHANDLUNG
DER TUMORZELLEN MIT IFN-G 61
3.3.7 IFN-G BEEINFLUSST DIE MIGRATION MALIGNER GLIOMZELLEN 63
3.4 EINFLUSS VON VALPROINSAEURE AUF MALIGNE GLIOMZELLEN 64
3.4.1 VPA VERMINDERT DIE PROLIFERATIONSRATE EINIGER GLIOMZELLINIEN 64
3.4.2 EINFLUSS VON VPA AUF DIE EXPRESSION VON CD44 UND CD56 66
3.4.3 VPA VERAENDERT DIE MIGRATION MALIGNER GLIOMZELLEN 68
3.4.3.1 BOYDEN-KAMMER-MIGRATION 68
3.4.3.2 SPHEROIDMIGRATION / 70
4. DISKUSSION 72
4.1 METHODENETABLIERUNG, ROLLE VON HA BEI DER INVASION VON GLIOMZELLEN
72
4.2 WIRKUNGEN VON HYALURONIDASE-INHIBITOREN AUF MALIGNE GLIOMZELLEN 80
4.3 WIRKUNGEN VON IFN-G AUF MALIGNE GLIOMZELLEN 83
4.4 WIRKUNGEN VON VPA AUF MALIGNE GLIOMZELLEN 91
5. LITERATURVERZEICHNIS 98
6. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 110
7. SELBSTAENDIGKEITSERKLAERUNG 111
8. LEBENSLAUF 111 |
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