Analyse der Genexpression der Chemoresistenz-assoziierten Faktoren MDR1/P-Glykoprotein und DNA-Topoisomerase Typ I in humanen epithelialen Ovarialtumoren:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Berlin
BIOCOM AG
2003
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| Ausgabe: | 1. Aufl. |
| Schriftenreihe: | Medizin
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| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung 9
1.1 Epidemiologie des Ovarialkarzinoms 9
1.2 Ätiologieund Risikofaktoren 9
1.3 Definition, TNM Klassifikation, histologische Klassifikation, Grading und
Stadieneinteilung 10
1.4 Therapie 12
1.4.1 Ausgewählte Chemotherapeutika bei der Therapie des Ovarialkarzinoms 13
1.5 Die Multidrug Resistenz (MDR) 16
1.5.1 Die klassische Multidrug Resistenz 16
1.5.2 Die Atypische Multidrug Resistenz 18
1.5.2.1 Topoisomerasen 18
1.6 Die Polymerasekettenreaktion (PCR) 19
1.6.1 Die quantitative kompetitive RT PCR 20
2. Aufgabenstellung 22
3. Material und Methoden 23
3.1 Material 23
3.1.1 Chemikalien 23
3.1.2 Enzyme und Puffer 23
3.1.3 Lösungen 24
3.1.4 Nukleinsäuren 24
3.1.5 PCR Kit 24
3.1.6 Verbrauchsmaterialien 25
3.1.7 Technische Geräte 25
3.1.8 Patientinnen und Proben 26
3.2 Methoden 26
3.2.1 RNA Extraktion 26
3.2.2 Bestimmung von Nukleinsäurekonzentrationen 27
3.2.3 Agarosegel Elektrophorese 27
3.2.4 cDNA Synthese mittels Reverser Transkription 28
3.2.5 Qualitative PCR 28
3.2.6 Kompetitive PCR 29
3.2.7 Auswertung der Gelelektrophoresen 30
3.2.8 Datenerfassung und Datenbankerstellung 32
3.2.9 Statistische Methoden 32
in
4. Ergebnisse 33
4.1 Datenerfassung und Tumorproben 33
4.2 Qualitative Genexpression von MDR1 und TOP1 35
4.3 Quantitative Genexpression 35
4.3.1 Quantifizierbare Genexpression von MDR1 und TOP1 37
4.3.1.1 Zusammenhang zwischen quantifizierbarer MDR1 Genexpression
und Tumorcharakteristika 38
4.3.2 Quantitative Genexpression von MDR1 und TOP1 sowie Darstellung der klinisch¬
pathologischen Charakteristika einschließlich Chemotherapiestatus 40
4.3.2.1 Vergleich der MDR1 Expression zwischen Primär /Rezidivkarzinornen 43
4.3.2.2 Vergleich der TOP 1 Expression zwischen Primär /Rezidivkarzinomen 43
4.3.3 MDR 1 /TOP1 Genexpression und Überlebensanalysen 44
4.3.3.1 Einfluß der MDR 1 Expression (quantifizierbar vs. nicht quantifizierbar
exprimierend) auf das Gesamtüberleben der Patientinnen mit fortgeschrittenem
Primärkarzinom (FIGO III) 44
4.3.3.2 Einfluß der Expression von MDR1 (quantifizierbar vs. nicht quantifizierbar
exprimierend) auf das progressionsfreie Überleben der Patientinnen mit
fortgeschrittenem (FIGO III) Primärkarzinom 45
4.3.3.3 Einfluß der quantitativen Genexpression von MDR1 auf das Gesamt
und progressionsfreie Überleben der Patientinnen
mit fortgeschrittenem (FIGO III) Primärkarzinom 46
4.3.3.4 Einfluß der Expression von TOP1 auf das Gesamt und progressionsfreie
Überleben der Patientinnen mit fortgeschrittenem (FIGO III) Primärkarzinom 47
4.3.4 MDR 1/TOP1 Genexpression bei Rezidivkarzinomen
und Chemotherapie Ansprechen 48
4.3.4.1 Einfluß der Expression von MDR1 auf das Ansprechen der
Chemotherapie bei Rezidivkarzinomen 48
4.3.4.2 Einfluß der Expression von TOP1 auf das Ansprechen
der Chemotherapie bei Rezidivkarzinomen 49
4.3.5 Zusammenhänge der MDR 1 Genexpression mit histopathologischen Kriterien 49
4.3.5.1 Zusammenhang der MDR 1 Genexpression mit der Histologie des Tumors 50
4.3.5.2 Zusammenhang der quantitativen MDR 1 Genexpression
mit TNM Stadium bzw. FIGO bei Primärkarzinomen 51
4.3.5.3 Zusammenhang der quantitativen MDR 1 Genexpression
mit dem Differenzierungsgrad des Tumors 51
4.3.6 Zusammenhänge der TOP 1 Genexpression mit histopathologischen Kriterien 52
4.3.6.1 Zusammenhang der quantitativen TOP 1 Genexpression
mit der Histologie des Tumors 52
4.3.6.2 Zusammenhang der quantitativen TOP 1 Genexpression
mit TNM Stadium bzw. FIGO bei Primärkarzinomen 52
4.3.6.3 Zusammenhang der quantitativen TOP 1 Genexpression
mit dem Differenzierungsgrad des Tumors 53
IV
5. Diskussion 54
5.1. Diskussion von Material und angewandten Methoden 54
5.2 Diskussion der Ergebnisse 56
5.2.1 Qualitative Genexpression von MDR1 und TOP1 56
5.2.1.1 Qualitative Genexpression von MDR1 56
5.2.1.2 Qualitative Genexpression von TOP1 57
5.2.1.3 Expression von MDR1 bei Primär und Rezidiv Ovarialkarzinomen
sowie benignen Ovarialtumoren 57
5.2.2 Quantitative Genexpression von MDR1 undTOPl 58
5.2.2.1 Quantitative MDR1 Expression bei Primär /Rezidivkarzinomen 58
5.2.2.2 Quantitative TOP1 Expression bei Primär /Rezidivkarzinomen 58
5.2.3 Genexpression und Überlebensanalysen 59
5.2.3.1 Einfluß der Expression von MDR1 (quanfizierbar vs.
nicht quantifizierbar exprimierend) auf Gesamtüberlebenszeit und
progressionsfreie Überlebenszeit bei Primärkarzinomen FIGO III 59
5.2.3.2 Einfluß der quantitativen Genexpression von MDR1 auf das Gesamt
und progressionsfreie Überleben der Patientinnen
mit fortgeschrittenem (FIGO III) Primärkarzinom 60
5.2.3.3 Einfluß der Expression von TOP1 auf Gesamtiiberlebenszeit und
progressionsfreie Überlebenszeit bei Primärkarzinomen FIGO III 60
5.2.4 MDRl/TOPl Expression bei Rezidivkarzinomen und Chemotherapie Ansprechen 61
5.2.4.1 MDR 1 Genexpression bei Rezidivkarzinomen und Chemotherapie Ansprechen 61
5.2.4.2 TOPl Genexpression bei Rezidivkarzinomen und Chemotherapie Ansprechen 61
5.2.5 MDR1 und TOPl Genexpression und klinisch pathologische Charakteristika 62
5.2.5.1 MDR 1 Expression und Histologie des Tumors 62
5.2.5.2 MDR 1 Expression und FIGO /TNM Stadium 63
5.2.5.3 MDR 1 Expression und Differenzierungsgrad des Tumors 63
5.2.5.4 TOP 1 Expression und Histologie des Tumors 64
5.2.5.5 TOP 1 Expression und FIGO /TNM Stadium 64
5.2.5.6 TOP 1 Expression und Differenzierungsgrad des Tumors 64
6. Zusammenfassung 65
7. Literaturverzeichnis 66
8. Danksagung 74
9. Lebenslauf 75
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