Untersuchung der IL-6-Rezeptor, gp 130 Expression hämatopoietischer CD 34 positiver Progenitorzellen beim Krankheitsbild der Polyzythaemia rubra vera:
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| Format: | Buch |
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2002
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INHALTSVERZEICHNIS
VERZEICHNIS
DER
VERWENDETEN
ABKUERZUNGEN
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1.
DIE
HAEMATOPOIESE
.
1
1.2.
PRAENATALE
BLUTBILDUNG,
.
1
1.3.
DIE
HAEMATOPOIETISCHE
PROGENITORZELLE,
.
3
1.4.
CHARAKTERISIERUNG
DES
CD34
ANTIGENS.
.
4
1.5.
ZYTOKINE
.
8
1.5.1.
DIE
FAMILIE
DER
IL-6
TYP
ZYTOKINE
UND
IHRE
BEDEUTUNG.
.
10
1.6.
CHARAKTERISIERUNG
DES
INTERLEUKIN-6
(IL-6)
REZEPTOR
KOMPLEXES,
.
13
1.6.1.
DER
IL-6
REZEPTOR
.
13
1.6.2.
DAS
GLYKOPROTEIN
GPL30
.
15
1.6.3.
DER
IL-6/IL-6R/GPL30
KOMPLEX:
SIGNALBINDUNG
UND
-
TRANSDUKTION
.
16
1.7.
DAS
KRANKHEITSBILD
DER
POLYZYTHAEMIA
RUBRA
VERA
(PV).
.
,18
1.8.
FRAGESTELLUNG
DER
ARBEIT.
.
,30
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
31
2.1.
UNTERSUCHUNGSGUT.
.
,31
2.1.1.
ADERLASSBLUT.
.
31
2.1.2.
SPENDERBLUT,
.
31
2.2.
SEPARATION
UND
ANREICHERUNG
CD34
+
VORLAEUFERZELLEN
AUS
DEM
PERIPHEREN
BLUT.
.
31
2.2.1.
DICHTEZENTRIFUGATION.
.
.31
2.2.2.
MAGNETISCH
AKTIVIERTE
ZELLSORTIERUNG
(MACS)
.
,32
2.3.
PHAENOTYPISIERUNG
DER
CD34
+
ZELLEN
.
,34
2.3.1.
ZYTOLOGISCHE
STANDARDFAERBUNG
.
,34
2.3.1.1.
ANFERTIGUNG
VON
ZYTOZENTRIFUGENPRAEPARATEN,
.
,34
2.3.1.2.
FAERBUNG
NACH
PAPPENHEIM
.
.35
2.3.2.
INUNUNCHARAKTERISIERUNG
.
,35
2.3.2.I.
VERFAHREN.
.35
2.3.2.2.
DURCHFUEHRUNG
DER
KONVENTIONELLEN
CD34
IMMUNMARKIERUNG
AUF
ZYTOZENTRIFUGENPRAEPARATEN
.
,35
2.3.3.
BIOTINILIERUNG
DES
MONOKLONALEN
IL-6R
ANTIKOERPERS
.
,36
2.3.3.1.
FILTERTEST
ZUM
NACHWEIS
BIOTINILIERTER
PROTEINPROBEN
(DOT
BLOT)
.,37
2.3.4.
FACSCAN
ANALYSE
.
.37
2.3.4.I.
PRINZIP
.37
2.3.4.2.
FLUORESZENZMARKIERUNG
VON
ZELLANTIGENEN,
.
.40
2.3.5.
LASER
SCANNING
CYTOMETRIE.
.
.41
2.3.5.I.
FUNKTIONSWEISE.
.
.41
2.3.5.2.
DURCHFUEHRUNG
.
.42
2.4.
MATERIALLISTE.
.
.43
2.4.1.
SUBSTANZEN,
VERBRAUCHSMATERIALIEN
.
.43
2.4.2.
GERAETE
.,44
3.
ERGEBNISSE.
.
.45
3.1.
ISOLATION
UND
ANREICHERUNG
CD34
+
ZELLEN.
.
.45
3.2.
VERGLEICHENDE
ANALYSE
DES
PHAENOTYPS
CD34
+
VORLAEUFERZELLEN
AUS
DEM
BLUT
VON
PV-PATIENTEN
UND
EINEM
GESUNDEN
KOLLEKTIV,
.
.46
3.2.1.
VERGLEICHENDE
ANALYSE
BEZUEGLICH
IHRER
MORPHOLOGIE
IN
DER
ROUTINEFAERBUNG
NACH
PAPPENHEIM
.
46
3.2.2.
VERGLEICHENDE
ANALYSE
NACH
KONVENTIONELLER
CD34
IMMUNMARKIERUNG
.
.47
3.2.3.
VERGLEICHENDE
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
ANALYSE
.
.50
3.3.
BIOTINILIERUNG
DES
MONOKLONALEN
IL-6R
ANTIKOERPERS
.
,52
3.4.
ILLUSTRATION
VON
OBERFLAECHENANTIGENEN
ANHAND
DER
FACSCAN
ANALYSE.
.
,52
3.4.1.
ILLUSTRATION
VON
OBERFLAECHENATIGENEN
ANHAND
DER
FACSCAN
ANALYSE
IN
HINSICHT
AUF
DIE
IL-6R
EXPRESSION.
.
54
3.4.2.
ILLUSTRATION
VON
OBERFLAECHENATIGENEN
ANHAND
DER
FACSCAN
ANALYSE
IN
HINSICHT
AUF
DIE
GPL30
EXPRESSION
.
58
3.5.
VERANSCHAULICHUNG
DER
FLUORESZENZMARKIERUNG
MIT
HILFE
DER LASER
SCANNING
ZYTOMETRIE
.62
4.
DISKUSSION
.
63
4.1.
METHODEN
ZUR
ISOLIERUNG
UND
ANREICHERUNG
CD34
+
PROGENITORZELLEN.
.
63
4.2.
DIE
HETEROGENITAET
DER
PROGENITORZELLPOPULATION
.
.66
4.3.
DIE
UNTERSUCHUNG
DES
GPL30
/
IL-6
REZEPTORKOMPLEXES
AUF
PROGENITOREN
VON
PV-PATIENTEN.
.
.68
4.4.
VERGLEICHENDE
BETRACHTUNG
DER
PV
/
BLUTSPENDER
CD34
+
VORLAEUFERZELLEN
HINSICHTLICH
IHRER
GPL30
/
IL-6R
EXPRESSION,
.
70
4.5.
LOESLICHE
FORMEN
DER
REZEPTORKOMPONENTEN
.
.73
4.6.
AUSBLICK
.
75
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
77
6.
LITERATURVERZEICHNIS.
.
79
7.
VORABVEROEFFENTLICHUNGEN.
.
99
8.
ANHANG.
.
100
9.
LEBENSLAUF
_
104 |
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