Untersuchung der Masernvirus-induzierten Immunsuppression im Baumwollrattenmodell:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2003
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| Beschreibung: | Zsfassung in engl. Sprache. - Würzburg, Univ., Diss., 2003 |
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INHALTSVERZEICHNIS
6
INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 10
1.1. MASEMVIRUS ALS PATHOGEN 10
1.1.1. KLINIK DER AKUTEN MASERN 11
1.2.1. TAXONOMIEDES MASEMVIRUS 11
1.2.2. VIRUSSTRUKTUR UND FUNKTION DER PROTEINE 12
1.2.3. REZEPTOREN FUER MASEMVIRUS 14
1.3. IMMUNSUPPRESSION 16
1.3.1. KLINISCHE BEOBACHTUNGEN DER IMMUNSUPPRESSION 16
1.3.2. MASEMVIRUS-INDUZIERTE
IN VITRO PROLIFERATIONSINHIBITION 18
1.4. TIERMODELLE FUER EINE MASEMVIRUSINFEKTION 19
1.4.1. DIE BAUMWOLLRATTE ALS GEEIGNETES TIERMODELL 21
1.5. FRAGESTELLUNG 23
2. MATERIALIEN 24
2.1. VERSUCHSTIERE 24
2.2. GERAETE 24
2.3. VERBRAUCHSMATERIALIEN 25
2.4. MEDIEN, LOESUNGEN UND PUFFER 25
2.5. ZELLINIEN 29
2.6. VIRUSSTAEMME 29
2.7. ANTIKOERPER 33
2.8. PCR-PRIMER 34
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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INHALTSVERZEICHNIS
7
3. METHODEN 36
3.1. ZELLKULTUR 36
3.1.1. HALTUNG VON PERMANENTEN ZEL 1 INIEN 36
3.1.2. HALTUNG VON PRIMAEREN ZELLEN 37
3.2. IMMUNOLOGISCHE METHODEN 37
3.2.1. PROLIFERATIONSTEST 37
3.2.2. DURCHFLUSSZYTOMETRIE 41
3.2.3. ANTIKOERPER-PRODUKTION 42
3.2.4. ANTIKOERPER-REINIGUNG 42
3.2.5. ZYTOKIN-NACHWEIS MITTELS RT-PCR 43
3.3. VIROLOGISCHE METHODEN 45
3.3.1. ZUCHT VON MASEMVIRUS-IMPFSTAEMMEN 45
3.3.2. ZUCHT VON MASEMVIRUS-WILDTYPSTAEMMEN 46
3.3.3. PLAQUETEST 46
3.3.4. TCID
50
47
3.3.5. REINIGUNG VON MV DURCH PASSAGICRUNG IN DER BAUMWOLLRATTE 47
3.4. TIEREXPERIMENTELLE METHODEN 48
3.4.1. INTRANASALE JNFEKTION 48
3.4.2. ORGANENTNAHME UND PRAEPARATION VON PRIMAEREN ZELLEN 48
3.4.2.1. LUNGEN-LAVAGE 48
3.4.2.2. MILZEN 49
3.4.2.3. VIRUSRUECKISOLIERUNG AUS DER LUNGE 49
3.4.2.4. MEDIASTINALE DRAINIERENDE LYMPHKNOTEN 50
INHALTSVERZEICHNIS
8
4. ERGEBNISSE 46
4.1. IMMUNSUPPRESSIVER EFFEKT VON MV-WILDTYPEN UND IMPFSTAEMMEN 51
4.1.1. VERGLEICH DER PROLIFERATIONSINHIBITION NACH MV INFEKTION MIT
WILDTYP
(WTF) UND IMPFSTAMM (EDM) IN ZELLKULTUR 51
4.1.2. VERGLEICH DER INDUKTION EINER PROLIFERATIONSHEMMUNG DURCH
INFEKTION
MIT WTF UND EDM IM BAUMWOLLRATTEN-MODELL 52
4.1.2.1. AUSBREITUNG UND REPLIKATION VON WTF UND EDM (VIRUSLAST IN DER
LUNGE UND VIRUSREPLIKATION IN DEN MEDIASTINALEN LYMPHKNOTEN) NACH
INFEKTION MIT WTF UND EDM. 55
4.1.3. KORRELATION DER INFEKTIONSDOSIS VON WTF MIT
PROLIFERATIONSINHIBITION
UND VIRUSREPLIKATION IN DRAINIERENDEN LYMPHKNOTEN 57
4.1.4. UNTERSUCHUNGEN UEBER VIRUSPRAESENZ IN DRAINIERENDEN LYMPHKNOTEN
SOWIE PROLIFERATIONSINHIBITION VON WEITEREN MV-WILDTYPVIRUSSTAEMMEN 58
4.1.5. EINFLUSS AUF IMMUNSUPPRESSION UND AUSBREITUNG VON UNTERSCHIEDLICH
PASSAGIERTEN MASEMVIRUSSTAEMMEN ANHAND VON PROLIFERATIONSINHIBITION,
VIRUSLAST IN DER LUNGE UND VIRUSREPLIKATION IN DRAINIERENDEN
LYMPHKNOTEN 59
4.1.6. DIE
BEDEUTUNG DER VIRALEN GLYKOPROTCINE FUER DIE
PROLIFERATIONSHEMMUNG UND VIRUSAUSBREITUNG IN BAUMWOLLRATTEN 62
4.1.7. BEDEUTUNG DER PUNKTMUTATION N481Y IM H-PROTEIN VON WTF AUF DIE
PHAENOTYPISCHEN EIGENSCHAFTEN DES VIRUS 63
4.2. ROLLE DER MAKROPHAGEN BEI DER INDUKTION EINER IMMUNSUPPRESSION IM
MODELL DER BAUMWOLLRATTE 65
4.2.1. DEFINITION DER LUNGEN-LAVAGE-MAKROPHAGEN 66
4.2.2. DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE ANALYSE ZUR UNTERSUCHUNG DER EXPRESSION
VON
F, H UND N IN MAKROPHAGEN AUS DER LUNGEN-LAVAGE MV-INFIZIERTEN
BAUMWOLLRATTEN 68
4.2.3. VIRUSREPLIKATION VON GFP-MV 69
INHALTSVERZEICHNIS
9
4.2.4. INFEKTION VON MAKROPHAGEN 70
4.2.5.
IN VIVO PERSISTENZ VON MASEMVIRUS IN MAKROPHAGEN NACH INFEKTION MIT
WTF UND EDM (FUSION IN ZELLKULTUR) 72
4.2.6 KORRELATION DES IMMUNSUPPRESSIVEN EFFEKTES NACH INFEKTION MIT WTF
UND EDM 73
4.2.7. KINETIK DER ZYTOKIN-SEKRETION VON WTF- UND EDM-INFIZICRTEN
MAKROPHAGEN 75
5. DISKUSSION 77
6. ZUSAMMENFASSUNG 84
6.1. SUMMARY 87
7. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 89
8. VERZEICHNIS DER ABBILDUNGEN, BILDER UND TABELLEN 92
9. LITERATURVERZEICHNIS 94
10. VEROEFFENTLICHUNGEN 108 |
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