Entgiftung von Organophosphaten durch Phosphorylphosphatasen und Ethanolamin: Kurztitel: Organophosphatentgiftung
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Bonn
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Kurzbericht 7
Einfährung 8
1. Isolierung, Anreicherung und Stabilisierung
von Phosporylphosphatase 18
1.1 High Density Lipoprotein Paraoxonase aus Serum 18
1.1.1 Optimierung und Standardisierung der Phaenotypisierung
der genetisch polymorphen Formen der Paraoxonase 19
1.1.2 Isolierung der HDL Paraoxonase
durch sequentielle Lipoproteinpräzipitation 34
1.1.3 Anreicherung von A Lipoproteinen mit delipidierter
Paraoxonase, Phaenotypkonversion zu Hochentgiftern 56
1.1.4 Stabilisierung und Lyophilisierung von Paraoxonase
(Herstellung eines haltbaren Trockenpräparates) 73
1.2 Phosphorylphosphastasen aus Leber 79
1.2.1 Präparation aus Kaninchen und Rinderleber
durch differentielle Zentrifugation 81
1.2.2 Präparation durch Dichtegradienten 87
1.2.3 Solublisierung, Stabilisierung und Lyophilisierung
der Leberphosphorylphosphatase 90
2. Hydrolytische Aktivität, Substratspezifität 92
2.1. Organophosphatumsatz 93
2.1.1 Photometrischer Nachweis mit Paraoxon, Methylparaoxon
und Trisnitrophenylphosphat 93
2.1.2 Potentiometrischer Nachweis der Fluoridabspaltung mit DFP 97
2.1.3 Kinetik der Totalentgiftung, Untersuchung
mit Organophosphatsensitiven Enzymen 100
2.1.4 Mixed Substrate Untersuchungen 106
2.2 Umsatz anderer Ester 112
2.2.1 Phenylacetat 112
2.2.2 Nitrophenylacetat 113
2.2.3 Nitrophenylphosphat 114
2.2.4 Bisnitrophenylphosphat 115
2.3 Aktivatoren und Inhibitoren der Phosphorylphosphatasen 117
2.3.1 Aminoalkohole (Cholin, Serin, Ethanolamin)
als freie Alkohole und als Phosphatester 121
2.3.2 Phospholipide (Phosphatidylethanolamin, Phosphatidylcholin)
und Lysophospholipide 127
2.3.3 Wechselwirkung mit etablierten Antidoten
(2 PAM, Toxogonin, Atropin, Pyriddostigmin) 130
5
3. Kinetik der durch Aminoalkohole beschleunigten
nicht enzymatischen Organophosphathydrolyse 134
3.1. Paraoxon 138
3.2. DFP 142
4. Konzepte für den Zivilschutz 145
Literaturverzeichnis 146
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