Zur Charakteristik der späten Promotoren des Pseudomonas-aeruginosa-Phagen Phi-CTX:
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| Format: | Book |
| Language: | German |
| Published: |
Gießen
Fachverl. Köhler
2002
|
| Series: | Veterinärmedizin
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| Online Access: | Inhaltsverzeichnis |
| Item Description: | Zugl.: Gießen, Univ., Diss., 2002 |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
INHALTSVERZEICHNIS
I
VERZEICHNIS
DER
ABBILDUNGEN
IV
VERZEICHNIS
DER
TABELLEN
VI
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
UND
ZEICHENERKLAERUNG
VII
1.
EINLEITUNG
1
1.1.
PSEUDOMONAS
AERUGINOSA
UND
SEINE
MEDIZINISCHE
BEDEUTUNG
1
1.2
LEBENSZYKLEN
UND
MEDIZINISCHE
SIGNIFIKANZ
VON
BAKTERIOPHAGEN
2
1.3
CHARAKTERISTIK
EINIGER
PSEUDOMONAS
AERUGINOSA-PHAGEN
4
1.3.1
PSEUDOMONAS
AERUGINOSA-PHAGE
| CTX
5
1.4
PROMOTOREN
6
1.4.1
BISHERIGE
CHARAKTERISTIK
VON
PROMOTOREN
DES
PSEUDOMONAS
AERUGINOSA-PLAAGEN-FYCTX.
8
1.5
STAND
DER
WISSENSCHAFT
ZU
UNTERSUCHUNGEN
AN
P.
AERUGINOSA
UND
ESCHERICHIA
COLI
ALS
TRANSGENE
LEBEWESEN
8
1.6
GENOM
DES
PHAGEN
| CTX
IM
VERGLEICH
ZU
DEM
DER
P2-FAMILIE
9
1.7
ZIELE
DER
ARBEIT
13
2.
MATERIAL
15
2.1
BAKTERIEN,
PHAGEN
UND
PLASMIDE
15
2.2
STOFFE
16
2.3
STAMMLOESUNGEN,
MEDIEN
UND
WEITERE
LOESUNGEN
17
2.4
ENZYME,
DNA-MOLEKULARMASSEN-MARKER
UND
LOADING
SOLUTION
21
2.5
KOMMERZIELLE
KITS
22
2.6
GERAETE
UND
VERBRAUCHSMATERIAL
23
2.7
COMPUTERPROGRAMME
24
INHALTSVERZEICHNIS
II
3.
METHODEN
25
3.1
STAMMHALTUNG
UND
KONSERVIERUNG
VON
E.
COLI
UND
P.
AERUGINOSA
25
3.2
HERSTELLUNG
VON
TRANSFORMATIONS-KOMPETENTEN
VON
E.
COLI
UND
P.
AERUGINOSA-ZELLEN
27
3.3
TRANSFORMATION
IN
SUPERKOMPETENTE
E.
COLI
XL
1
-BLUE
DURCH
HITZESCHOCK
28
3.4
ELEKTRO-TRANSFORMATION
IN
P.
AERUGINOSA
28
3.5
MINI-PLASMID-PRAEPARATION
29
3.6
AGAROSEGEL-ELEKTROPHORETISCHE
ANALYSE
DER
DNA
29
3.7
PRAEPARATION
VON
PHAGE
(| CTX-DNA
30
3.8
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
30
3.9
PRAEPARATION
VON
YYULTRAPURE
"
PLASMID-DNA
MIT
YYQIAGEN
PLASMID
MIDI
KIT
"
33
3.10
BESTIMMUNG
VON
REINHEIT
UND
KONZENTRATION
DER
DNA
34
3.11
VERDAU
VON
DNA
MIT
RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN
34
3.12
EXTRAKTION
DER
DNA
AUS
AGAROSE-GEL
35
3.13
LIGATION
VON
LINEARISIERTER
PLASMID-DNA
MIT
INSERT-DNA
DURCH
DEN
YYRAPID
DNA
LIGATION
KIT
"
36
3.14
SEQUENZIERUNG
VON
PCR-PRODUKTEN
39
3.15
DNA-MUTAGENISIERUNG
DURCH
YYQUIKCHANGE
SITE-DIRECTED
MUTAGENESIS
KIT
"
41
3.16
BESTIMMUNG
DER
SS-GALACTOSIDASE
43
3.17
PROTEINIDENTIFIZIERUNG
DURCH
SDS-PAGE
44
4.
ERGEBNISSE
47
4.1
KOMPATIBILITAET
VON
PROMOTOR-TESTPLASMID
PME4510
UND
EXPRESSIONSPLASMID
PHALO
NACH
KOTRANSFORMATION
IN
E.
COLI
XL
1
-BLUE
UND
P.
AERUGINOSA
PAO
1
S-LAC
47
4.2
KLONIERUNG
DER
PUTATIVEN
PROMOTOREN
PO,
P
P
,
P
F
UND
PV
IN
DAS
PROMOTOR
T
ESTPLASMID
PME45
10
49
4.3
KLONIERUNG
VON
| CTX-ORF34
IN
DIE
EXPRESSIONSPLASMIDE
PHALO
UND
PUCPKS
59
4.4
KOTRANSFORMATION
DER
REPORTERPLASMIDE
PMEPO,
PMEPP,
PMEPP
UND
PMEPR
JEWEILS
MIT
PHA34
IN
KOMPETENTE
ZELLEN
VON
E.
COLI
XL
1
-BLUE
UND
P.
AERUGINOSA
PAO
1
S-LAC
65
4.5
PROMOTORAKTIVITAET
VON
PMEPO,
PMEPP,
PMEPRUND
PMEPR
BZW.
DEREN
MUTANTEN
NACH
KOTRANSFORMATION
MIT
PHA34
DURCH
DEN
SS-GALACTOSIDASE-TEST
67
INHALTSVERZEICHNIS
4.6
UNTERSUCHUNG
VON
REGULATORSEQUENZEN
IN
| CTX-SPAETEN-PROMOTOREN
DURCH
MUTAGENESE-DNA-VARIANTEN
69
4.7
UNTERSUCHUNG
DES
GENPRODUKTS
(GP)
ORF34
IN
DER
SDS-PAGE
72
5.
DISKUSSION
74
5.1
DISKUSSION
DER
EINGESETZEN
METHODEN
74
5.2
AKTIVITAET
DER
SPAETEN
PROMOTOREN
PO,
P
P
,
P
F
UND
PV
75
5.3
EXPERIMENTELLER
NACHWEIS
DER
ERFORDERNIS
DER
BEIDEN
KONSENSUS-SEQUENZEN
IN
SPAETEN
PROMOTOREN
VON
| CTX
76
5.4
UNTERSUCHUNG
DER
EXPRESSION
DES
| CTX-ORF34
77
5.5
SCHLUSSFOLGERUNGEN
78
6.
ZUSAMMENFASSUNG
80
7.
SUMMARY
83
8.
LITERATURVERZEICHNIS
86
9.
ANHANG
100
9.1
DIE
VERWENDETEN
PRIMER
ZUR
AMPLIFIKATION,
SEQUENZIERUNG
UND
MUTAGENISIERUNG
100
III |
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