Das BPLF1-Gen des Epstein-Barr-Virus:
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Regensburg
2002
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INHALTSVERZEICHNIS
I
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
.I
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.III
ZUSAMMENFASSUNG
. VII
1 EINLEITUNG
.1
1.1 DAS EPSTEIN-BARR-VIRUS.1
1.1.1 DIE ENTDECKUNG DES EPSTEIN-BARR-VIRUS.1
1.1.2 DIE ASSOZIATION DES EPSTEIN-BARR-VIRUS MIT WEITEREN ERKRANKUNGEN
DES
MENSCHEN.2
1.2 DIE BIOLOGIE DER EBV-INFEKTION.4
1.2.1 MODEL DER EBV-INFEKTION IM MENSCHEN.4
1.2.2 STRUKTUR UND ORGANISATION DES EPSTEIN-BARRVIRUS.5
1.2.3 DER INFEKTIONSZYKLUS DES EPSTEIN-BARR-VIRUS.7
1.3 ZIELSETZUNG.17
2 MATERIAL UND METHODEN.18
2.1 BIOLOGISCHES MATERIAL.18
2.1.1 BAKTERIENKULTUR.18
2.1.2 ZELLLINIEN.;.19
2.1.3 ANTIKOERPER UND SEREN.20
2.2 OLIGO-DESOXYNUKLEOTIDE.20
2.3 PLASMIDE UND COSMIDE.23
2.4 ZELLKULTUR.24
2.4.1 SUSPENSIONSKULTUR UND ADHAERENTE ZELLEN.24
2.4.2 INDUKTION DER LYTISCHEN REPLIKATION VON EBV.25
2.4.3 TRANSIENTE TRANSFEKTION VON ADHAERENTEN COS7-ZELLEN MITTELS
CALCIUM-
PHOSPHAT-PRAEZIPITATION.26
2.5 ALLGEMEINE METHODEN.27
2.5.1 BAKTERIEN UND DNA.28
2.5.2 POLYMERASE-KETTENREAKTION.34
2.6 SPEZIELLE METHODEN.43
2.6.1 NORTHEMBLOT ANALYSEN.43
2.6.2 HERSTELLUNG VON CDNA MITTELS SMART
YY
PCR CDNA-SYNTHESE SYSTEMS49
2.6.3 EXPRESSION UND ANALYSE VON PROTEINEN.51
2.6.4 HERSTELLUNG BPLF1 -SPEZIFISCHER ANTIKOERPER.59
3 ERGEBNISSE
.60
3.1 DAS BPLFL-GEN.60
3.1.1 DAS BPLF 1 -GEN - EINE DATENBANK-ANALYSE.60
3.1.2 NACHWEIS DER TRANSKRIPTIONEILEN AKTIVITAET DES BPLFL-GENS.62
3.1.3 SYNTHESE DER BPLFL-CDNA.69
3.1.4 UEBERPRUEFUNG DES SPLEISSENS DURCH TRANSIENTE TRANSFEKTION.72
3.2 DAS BPLFL-PROTEIN.78
3.2.1 DAS BPLFL-PROTEIN - EINE DATENBANK-ANALYSE.78
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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INHALTSVERZEICHNIS N
3
.
2.2 DER INDIREKTE NACHWEIS DES BPLF1-PROTEINS DURCH WESTEMBLOT-ANALYSEN
MIT VERSCHIEDENEN HUMANEN PATIENTENSEREN.82
3
.
2.3 NACHWEIS DES BPLF1-PROTEINS MIT HILFE EINES POLYKLONALEN
KANINCHENSERUMS.92
4 DISKUSSION.95
4.1 DER LESERAHMEN BPLF1- EIN SPAETES GEN DES EPSTEIN-BARR-VIRUS.95
4.2 DAS BPLFL-PROTEIN - EINE TEGUMENTKOMPONENTE.102
LITERA TUR VERZEICHNIS.110
ANHANG
.122
A.L. HOMOLOGIEVERGLEICH DER BPLFL-NUKLEINSAEURESEQUENZ AUS DEN
VIRUS-STAEMMEN
M-ABA UND B95-8. 122
A.2. NUKLEINSAEURESEQUENZ DES BPLFL-CDNA-ABSCHNITTES AUS DEM VIRUS-STAMM
P3HR-1.136
A.3. SEKUNDAERSTRUKTUREN DES BPLFL-PROTEINS
.137
A.4. AUSGANGSPLASMIDE.
.139
A.5. PLASMIDE ZUR HERSTELLUNG VON IN VITRO-TRANSKRIBIERTEN RNASONDEN.
.140
A. 6. EXPRESSIONSPLASMIDE
.141
A. 7. PLASMIDE FUER DIE HOMOLOGE REKOMBINATION ZUR HERSTELLUNG EINES
REKOMBINANTEN
EBV.142
DANKSAGUNG
144 |
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