Die Rolle der Toll-like-Rezeptoren bei entzündlichen Erkrankungen:
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
ZUSAMMENFASSUNG
.
1
2.
EINLEITUNG
.
3
2.1.
LPS
.
3
2.2.
LPS-REZEPTOREN
.
3
2.2.1.
CDU
.
3
2.2.1.1.
LPS-INDUZIERTE
SIGNALTRANSDUKTION
VIA
CD14
.
4
2.2.2.
TOLL-LIKE
RECEPTORS
(TLRS)
.
4
2.2.2.1.
AKTIVIERUNG
UND
LIGANDEN
DER
TLRS
.
5
2.2.2.2.
DER
LPS-REZEPTORKOMPLEX
.
6
2.2.2.3.
DIE
TLR-VERMITTELTE
SIGNALTRANSDUKTION
.
7
2.2.2.4.
BEDEUTUNG
DER
TLRS:
STELLUNG
INNERHALB
DER
ANGEBORENEN
IMMUNANTWORT
.
9
2.3.
LPS-EFFEKTE
.
9
2.3.1.
LOKALE
LPS-EFFEKTE:
ENTZUENDUNG
.
9
2.3.1.1.
ENTZUENDUNGSZELLEN:
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
ALS
VERTRETER
DES
MONONUCLEAR
PHAGOCYTE
SYSTEMS
(MPS)
.
9
2.3.1.2.
SEZEMIERTE
MEDIATOREN
UND
ENTZUENDUNG
.
10
2.3.2.
ANTIPHLOGISTIKA
.
11
2.3.2.1.
NICHT
STEROIDALE
ANTIINFLAMMATORISCH
WIRKENDE
PHARMAKA
(NSAIDS)
.
11
2.3.2.2.
GLUKOKORTIKOIDE
.
12
2.4.
GENERALISIERTE
LPS-INFEKTIONEN:
GRAM-NEGATIVE
SEPSIS
.
12
2.4.1.
BEDEUTUNG
DER
SEPSIS
.
12
2.4.2.
DIAGNOSE
.
13
2.4.2.1.
SIRS-KRITERIEN
ACCP-KRITERIEN
.
13
2.4.2.2.
SEPSISMARKER
.
14
2.4.3.
ENTSTEHUNG
DER
SEPSIS:
BETEILIGTE
ZELLEN,
MEDIATOREN,
PATHOPHYSIOLOGISCHE
KASKADEN
14
2.5.
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
.
16
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
17
INHALTSVERZEICHNIS
3.1.
MATERIAL
.
17
3.1.1.
CHEMIKALIEN
.
17
3.1.2.
PRIMER
.
17
3.1.3.
ANTIKOERPER
.
18
3.1.4.
ENZYME
UND
KITS
.
18
3.1.5.
NAEHRMEDIEN
UND
LOESUNGEN
FUER
DIE
ZELLKULTUR
.
19
3.1.6.
VERWENDETE
ZELLSYSTEME
UND
DEREN
KULTIVIERUNG
.
19
3.1.6.1.
PRIMAERZELLEN
.
;.
.
19
3.1.6.1.1.
PRIMAERE
HUMANE
MONOZYTEN
.
19
3.1.6.1.2.
HUMANE
DIFFERENZIERTE
MAKROPHAGEN
.
20
3.1.6.2.
PERMANENTE
ZELLINIEN
.
20
3.1.6.2.1.U937
.
20
3.1.6.2.2.
RAW
264.7
.
20
3.2.
METHODEN
.
21
3.2.1.
INKUBATIONS-PROTOKOLL
.
21
3.2.2.
RNEASY,
PRAEPARATION
VON
GESAMT-RNA
.
21
3.2.3.
RNASE-FREIE
DNASE-BEHANDLUNG
.
21
3.2.4.
PCR
.
22
3.2.5.
ONE-STEP-PCR
.
22
3.2.6.
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
ANALYSE
VON
OBERFLAECHEN-PROTEINEN
.
23
3.2.7.
INDIREKTE
IMMUNFLUORESZENZ
.
23
3.2.8.
ELISA
.
24
3.2.9.
CDNA-^MRYS
.
25
3.2.10.
ANALYSE
VON
SEPSISPATIENTEN
.
26
3.2.11.
KLINISCHE
DATEN
.
26
3.2.12.
STATISTIK
.
27
4.
ERGEBNISSE
.
28
INHALTSVERZEICHNIS
4.1.
NACHWEIS
LPS-INDUZIERTER
PROINFLAMMATORISCHER
ZYTOKINE
.
28
4.1.1.
REGULATION
DER
TRANSKRIPTION
.
28
4.1.1.1.
HUMANE
MONOZYTENZELLINIE
U937
.
28
4.1.1.2.
HUMANE
PRIMAERE
MONOZYTEN
UND
IN
VITRO
DIFFERENZIERTE
MAKROPHAGEN
.
30
4.1.2.
PROTEINSEKRETION
.
32
4.2.
NACHWEIS DER
TLR2
UND
TLR4-REZEPTOREXPRESSION
.
33
4.2.1.
IMMUNHISTOCHEMISCHER
NACHWEIS
VON
TLR2
UND
TLR4
AUF
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
.
33
4.2.2.
UNTERSUCHUNG
DES
EXPRESSIONSMUSTERS
VON
TLRS
AUF
ANDEREN
MONONUKLEAEREN
ZELLEN
(PBMCS)
.
35
4.2.3.
QUANTIFIZIERUNG
DER
TLR4-REZEPTOREXPRESSION
WAEHREND
DER
IN
VITRO
DIFFERENZIERUNG.
36
4.2.4.
TRANSKRIPTIONELLE
REGULATION
DER
TLR-REZEPTOREN
UND
DES
EXTRAZELLULAEREN
ADAPTERPROTEINS
MD-2
IM
VERLAUF
DER
IN
VITRO
DIFFERENZIERUNG
.
37
4.2.5.
LPS-INDUZIERTE
REGULATIONEN
DER
REZEPTORTRANSKRIPTION
.
38
4.2.6.
LPS-INDUZIERTE
REGULATIONEN
DER
REZEPTOREXPRESSION
.
41
4.3.
INHIBITOREN
DER
LPS-INDUZIERTEN
GENEXPRESSION
.
42
4.3.1.
INHIBITION
DER
LPS-INDUZIERTEN
EXPRESSION
PROINFLAMMATORISCHER
ZYTOKINE
DURCH
GLUKOKORTIKOIDE
.
42
4.3.1.1.
EFFEKTE
VON
GLUKOKORTIKOIDEN
AUF
DIE
LPS-INDUZIERTE
SEKRETION
PROINFLAMMATORISCHER
PROTEINE
.
43
4.3.2.
INHIBITION
DER
LPS-INDUZIERTEN
MRNA-EXPRESSION
PROINFLAMMATORISCHER
ZYTOKINE
DURCH
NS
AIDS
.
44
4.3.3.
INHIBITION
DER
LPS-INDUZIERTEN
MRNA-EXPRESSION
ANDERER
AM
ENTZUENDUNGSGESCHEHEN
BETEILIGTER
GENE
DURCH
NSAIDS
.
46
4.4.
REGULATIONEN
DER
TLR2
UND
TLR4
BEI
SEPSIS
.
47
4.4.1.
KLINISCHE
STUDIE:
EINSCHLUSSKRITERIEN,
KLINISCHE
PARAMETER
BEI
SEPSIS
.
47
4.4.2.
KLINISCHE
STUDIE:
TLR2,
TLR4
UND
MD-2
GENEXPRESSION
BEI
SEPSIS
.
48
4.4.3.
KLINISCHE
STUDIE:
ZYTOKIN
MRNA-EXPRESSION
BEI
SEPSIS
.
49
INHALTSVERZEICHNIS
4.4.4.
KLINISCHE
STUDIE:
UEBERTRAGUNG
DER
REZEPTOR
MRNA-DATEN
AUF
DAS
REZEPTORPROTEIN.
51
4.4.5.
ZEITABHAENGIGKEIT
DER
ERHOEHTEN
TLR4
UND
MD-2
MRNA-EXPRESSION
BEI
SEPSIS
.
52
4.4.6.
KLINISCHE
STUDIE:
TLR4
MRNA-EXPRESSION
UND
MORTALITAET
.
54
4.4.7.
KLINISCHE
STUDIE:
EFFEKT
EINER
IN
VITRO
STIMULATION
AUF
DIE
REZEPTORBESTANDTEILE
.
57
4.4.8.
KLINISCHE
STUDIE:
EFFEKT
DER
IN
VITRO
STIMULATION
AUF
DIE
ZYTOKINEXPRESSION
.
59
4.4.9.
KLINISCHE
STUDIE:
KORRELATIONEN
BEI
SEPSIS
.
61
5.
DISKUSSION
.
64
6.
LITERATURVERZEICHNIS
.
78
7.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
92
LEBENSLAUF
.
96 |
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