Wechselwirkung zwischen Blutplättchen, Zellen eines kleinzelligen Lungenkarzinoms und Endothel unter kontrollierten Strömungsbedingungen:
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2001
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| Beschreibung: | München, Techn. Univ., Diss., 2002 |
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I. EINLEITUNG.5
1.1 SYSTEMISCHE ABNORMALITAETEN DER HAEMOSTASE BEI MALIGNEN ERKRANKUNGEN.5
1.2 THROMBOZYTEN UND HAEMATOGENE METASTASIERUNG.6
1.3 TUMORZELLADHAESION UND DEREN BLOCKADE.8
1.4 FRAGESTELLUNG. 9
2. MATERIAL UND METHODE.10
2.1 STAUPUNKT-ADHAESIO-AGGREGOMETER ALS EXPERIMENTELLES
STROEMUNGSMODELL.10
2.1.1 AUFBAU DES STAUPUNKT-ADHAESIO-AGGREGOMETERS (SPAA).10
2.1.2 STROEMUNGSEXPERIMENTE MIT DEM SPAA UND IHRE DOKUMENTATION.13
2.2 FRAEPARATION DER IM SPAA VERWENDETEN ZELLEN.15
2.2.1 PRAEPARATION UND KULTIVIERUNG VON ENDOTHELZELLEN.15
2.2.2 PRAEPARATION UND KULTIVIERUNG VON SCLC-ZELLEN.17
2.3 PRAEPARATION VON PLASMAPROBEN.18
2.3.1 HERSTELLUNG VON PLAETTCHENREICHEM PLASMA (PRP).18
2.3.2
HERSTELLUNG VON PLAETTCHENARMEN PLASMR(PPP)
.
2.4 AGGREGOMETER (APACT) ALS EXPERIMENTELLES AGGREGATIONSMODELL.18
2.4.1 AUFBAU DES AP ACT (AUTOMATED PLATELET AGGREGATION AND COAGULATION
TRACER) 18
2.4.2 VERSUCHE IM AGGREGOMETER.19
2.5 VERSUCHE IN STASE. 20
2.5.1 V ERSUCHSANORDNUNG. 20
2.5.2 VERSUCHSAUSWERTUNG.21
2.6 EINSATZ VON ADP-SCAVENGER UND ENTZUENDUNGSMEDIATOREN.21
2.6.1 ZUGABE VON ADP-SCAVENGER ZUM PRP.21
2.6.2 INKUBATION VON ENDOTHELZELLEN MIT ENTZUENDUNGSMEDIATOREN.21
2.7 BLOCKADE VON MEMBRANREZEPTOREN AN ENDOTHEL- UND SCLC-ZELLEN.22
2.7.1 INKUBATION DES PLASMAS MIT RGDS.22
2.7.2 INKUBATION DER ENDOTHEL-ZELLEN MIT ANTIKOERPERN.22
2.8 IMMUNOBLOT/-ZYTOCHEMIE VON MEMBRANREZEPTOREN.22
2.8.1 IMMUNZYTOCHEMIE DER SCLC-ZELLEN AUF INTEGRIN ANB,SS3.22
2.8.2 IMMUNOBLOT DER SCLC-ZELLEN AUF INTEGRIN AM,,SS3.23
2.8.3 IMMUNZYTOCHEMIE DER ENDOTHELZELLEN AUF P-SELEKTIN 23
2.9 BILDGEBENDE DOKUMENTATION. 23
2.9.1 DUNKELFELDMIKROSKOPIE/VIDEOPRINT.23
2.9.2 PHASENKONTRASTMIKROSKOPIE (PHAKO).24
2.9.3 TRANSMISSIONS-ELEKTRONENMIKROSKOPIE (TEM).24
2.9.4 RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE.25
2.10 STATISTIK.- 25
2
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3. ERGEBNISSE
26
3.1 EINFLUSS VON SCLC-ZELLEN AUF DIE AGGREGATION VON BLUTPLAETTCHEN IM
AGGREGOMETER
(APACT).26
3.1.1 TUMORZELL-INDUZIERTE PLAETTCHEN-AGGREGATION (TCIP-AGGREGATION) IM
APACT. 26
3.1.2 ADP-INDUZIERTE PLAETTCHEN-AGGREGATION IM APACT.27
3 .1.3 EINFLUSS VON ADP-SCAVENGER AUF DIE TCIP-AGGREGATION.29
3.1.4 EINFLUSS VON SCLC-ZELL-UEBERSTAND AUF DIE PLAETTCHENAGGREGATION.32
3.2 EINFLUSS VON SCLC-ZELLEN AUF DIE ADHAESION VON BLUTPLAETTCHEN IM
STAUPUNKT-
ADHAESIO-AGGREGOMETER (SPAA).33
3.2.1 TUMORZELL-INDUZIERTE PLAETTCHEN-ADHAESION (TCIP-ADHAESION) AN
IMMOBILISIERTEM
FIBRINOGEN.33
3.2.2 BLOCKADE DER TCIP-ADHAESION AN IMMOBILISIERTEM FIBRINOGEN.35
3.2.3 TCIP-ADHAESION AN HUMANEN ENDOTHELZELLEN (HUVEC).36
3.2.4 BLOCKADE DER TCIP-ADHAESION AN HUVEC.38
3.3 EINFLUSS VON SCLC-ZELLEN AUF DIE ADHAESION VON BLUTPLAETTCHEN UNTER
STATISCHEN
BEDINGUNGEN (STASE).38
3.3.1 SCLC-ZELL-INDUZIERTE PLAETTCHEN-ADHAESION AN IMMOBILISIERTEM
FIBRINOGEN.38
3.3.2 SCLC-ZELL-INDUZIERTE PLAETTCHEN-ADHAESION AN HUVEC.38
3.4 YYROLLEN" UND ADHAESION VON SCLC-ZELLEN AN HUVEC IM SPAA.39
3.4.1 YYROLLEN" UND ADHAESION AN UNSTIMULIERTEN HUVEC.39
3.4.2 YYROLLEN" VON SCLC-ZELLEN AN IL-LSS-STIMULIERTEN HUVEC.40
3.4.3 ADHAESION VON SCLC-ZELLEN AN IL-1 SS-STIMULIERTEN HUVEC.42
3.5 ADHAESION VON SCLC-ZELLEN AN VERSCHIEDENEN OBERFLAECHEN IN STASE.45
3.5.1 ADHAESION VON SCLC-ZELLEN AN IMMOBILISIERTEM FIBRINOGEN.45
3.5.2 ADHAESION VON SCLC-ZELLEN AN UNSTIMULIERTEN HUVEC.46
3.5.3 ADHAESION VON SCLC-ZELLEN AN STIMULIERTEN HUVEC.46
3.6 OBERFLAECHEN-REZEPTOREN UND DIE ADHAESION VON SCLC-ZELLEN AN HUVEC.47
3.6.1 IMMUNZYTOCHEMIE/IMMUNOBLOT ZUR DARSTELLUNG DES INTEGRIN ANB,SS3.47
3.6.2 BLOCKADE DES MEMBRANREZEPTORS INTEGRIN AM,,SS
3
MIT RGDS IM SPAA.48
3.6.3 IMIPUNZYTOCHEMIE ZUR DARSTELLUNG VON P-SELEKTIN AUF HUVEC.49
3.6.4 SPEZIFISCHE BLOCKADE VON P-SELEKTIN AN HUVEC IM SPAA.49
3.6.5 SPEZIFISCHE BLOCKADE VON P-SELEKTIN AN HUVEC IN STASE.50
3.6.6 UNSPEZIFISCHE BLOCKADE DER SELEKTINE AN HUVEC IM SPAA.51
3.6.7 UNSPEZIFISCHE BLOCKADE DER SELEKTINE AN HUVEC IN STASE.52
3.6.8 BLOCKADE VON ICAM-1 AN HUVEC IM SPAA 52
3
4. DISKUSSION.54
4.1 TUMORZELL-INDUZIERTE PLAETTCHEN-AGGREGATION (TCIP-AGGREGATION).54
4.2 TUMORZELL-INDUZIERTE PLAETTCHEN-ADHAESION (TCIP-ADHAESION) UND
TUMORZELL-
PLAETTCHEN-INTERAKTION UNTER STASE UND FLOW.60
4.2.1 TCIP-ADHAESION UND TUMORZELL-PLAETTCHEN-INTERAKTION UNTER STASE.61
4.2.2 TCIP-ADHAESION UND TUMORZELL-PLAETTCHEN-INTERAKTION UNTER FLOW IM
SPAA.62
4.3 ADHAESION VON SCLC-ZELLEN IN ABWESENHEIT VON PLAETTCHEN AN ENDOTHEL
UNTER STASE
UND FLOW.65
5. ZUSAMMENFASSUNG. 74
6. BIBLIOGRAPHIE.76
4 |
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