Anwendung einer nested-Polymerasekettenreaktion zur Diagnose von Chlamydia-pneumoniae-Infektionen und weiteren atypischen Pneumonien:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2000
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| Beschreibung: | Freiburg (Breisgau), Univ., Diss., 2002 (Nur beschränkt für den Austausch) |
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4
-
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 9
1.1
CHLAMYDIA PNEUMONIAE: MIKROBIOLOGISCHE CHARAKTERISIERUNG 9
1.2 EPIDEMIOLOGIE 10
1.3 PATHOGENESE 10
1.4 DIAGNOSTISCHE MOEGLICHKEITEN 12
1.4.1 ZELLKULTUR 13
1.4.2 SEROLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 13
1.4.3 DNA-NACHWEIS: POLYMERASEKETTENREAKTION 14
1.5 THERAPIEKONZEPTE 16
2 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 17
2.1 ETABLIEREN EINER NPCR ZUM NACHWEIS VON C.
PNEUMONIAE 17
2.2 UNTERSUCHUNG VON PATIENTENPROBEN 17
2.3 ENTWICKLUNG EINER MULTIPLEX-PCR FUER ATYPISCHE PNEUMONIEERREGER 17
3 MATERIAL UND METHODEN 18
3.1 GERAETE 18
3.2 REAGENZIEN 18
3.3 PUFFERLOESUNGEN 19
3.4 ENZYME 19
3.5 VERWENDETE KITS 19
3.6 PATIENTENPROBEN 19
3.7 ZELLKULTUR
20
3.8 SEROLOGIE
21
3.9 NESTED PCR
21
3.9.1 DNA-PRAEPARATION
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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-
5
-
3.9.2 POLYMERASEKETTENREAKTION 22
3.9.3 AGAROSE-GELELEKTROPHORESE 24
3.9.4 ZYKLISCHE SEQUENZIERUNG 25
3.9.5 KONTROLLEN 26
3.10 MULTIPLEX-PCR MIT C.
PNEUMONIAE,
M.
PNEUMONIAE UND L. PNEUMOPHILA 27
4 ERGEBNISSE 29
4.1 ETABLIERUNG EINER NPCR ZUM NACHWEIS VON
C. PNEUMONIAE 29
4.1.1 OPTIMIERUNG DER REAKTIONSPARAMETER 29
4.1.2 VERSUCHSREIHEN MIT KUENSTLICH INFIZIERTEN SPUTEN " 29
4.2
C. PNEUMONIAE-PCR MIT AUFGEARBEITETEN PATIENTENPROBEN 31
4.3 ERGEBNISSE VON ZELLKULTUR UND SEROLOGIE 34
4.4 KLINISCHE DATEN PCR POSITIVER PATIENTEN 35
4.5 ZWEI FALLBEISPIELE 38
4.6 ENTWICKLUNG EINER MULTIPLEX-PCR FUER ATYPISCHE PNEUMONIEERREGER 39
5 DISKUSSION 42
5.1 ETABLIERUNG EINER NPTR ZUM NACHWEIS VON C.
PNEUMONIAE 42
5.1.1 EMPFINDLICHKEIT 42
5.1.2 INHIBITION 43
5.1.3 AUFARBEITUNG 44
5.1.4 SEQUENZIERUNG VERSUS PCR-EIA 44
5.1.5 KONTAMINATION 45
5.2 C.
PNEUMONIAE-YCR MIT AUFGEARBEITETEN PATIENTENPROBEN 45
5.2.1 ERGEBNISSE DER ZELLKULTUR 45
5.2.2 ERGEBNISSE DER SEROLOGIE 46
5.2.3 VERGLEICH DER UNTERSUCHTEN MATERIALIEN 48
-
6
-
5.2.4 KLINISCHE DATEN PCR-POSITIVER PATIENTEN 48
5.2.5 FALLBEISPIELE 51
5.3 ENTWICKLUNG EINER MULTIPLEX-PCR FUER ATYPISCHE PNEUMONIEERREGER 51
5.4 DIE NESTED PCR: VORTEILE UND GEFAHREN 53
6 ZUSAMMENFASSUNG 56
7 LITERATURVERZEICHNIS 57
8 ANHANG 64
8.1 DANKSAGUNG 64
8.2 LEBENSLAUF 65 |
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