Untersuchungen zur Beteiligung eines Anionen-Austauschtransportsystems an der Freisetzung von Cortisol aus bovinen Nebennierenrindenzellen:
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2000
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INHALTSVERZEICHNIS
A. EINLEITUNG 1
1.0 BIOLOGISCHE MEMBRANEN UND DEREN TRANSPORTSYSTEME 2
2.0 TRANSPORTSYSTEME HYDROPHOBER ORGANISCHER ANIONEN UND KATIONEN
DER KONTRALUMINALEN UND LUMINALEN MEMBRAN DES PROXIMALEN
NIERENTUBULUS 5
2.1 SULFAT/OXALAT-TRANSPORTER 6
2.2 NA
+/DICARBOXYLAT- COTRANSPORTER 6
2.3 PARAAMINOHIPPURSAEURE- TRANSPORTER 6
3.0 KLONIERUNG DES RENALEN CONTRALUMINALEN PAH-TRANSPORTERS 8
4.0 TRANSPORT VON CORTICOSTEROIDEN UEBER DEN CONTRALUMINALEN PAH-
TRANSPORT 9
5.0 IDENTIFIKATION EINES MULTISPEZIFISCHEN TRANSPORTPROTEINS DER LEBER
(OATP) MIT SUBSTRATSPEZIFITAET FUER STEROIDE 10
6.0 PRODUKTION UND AUSSCHUETTUNG VON STEROIDHORMONEN IN DER
NEBENNIERENRINDE 11
6.1 REGULATION DER BIOSYNTHESE DER STEROIDHORMONE 11
7.0 ZIELSETZUNG DER VORLIEGENDEN ARBEIT 13
B MATERIAL UND METHODEN 14
1.0 CHEMIKALIEN 14
1.1 QUELLE DER BENUTZTEN CHEMIKALIEN 14
2.0 ZELLKULTURMEDIEN UND LOESUNGEN 15
2.1 ZELLKULTURMEDIEN FUER NNR- ZELLEN 15
2.2 STIMULATIONSMEDIEN FUER NNR-ZELLEN 16
2.3 LOESUNGEN FUER OOZYTEN 16
2.4 LOESUNGEN ZUR RNA / MRNA-ISOLIERUNG 17
3.0 NEBENNIEREN 18
3.1 BEZUG, ENTNAHME, TRANSPORT , 18
3.2 PRAEPARATION DER NEBENENIERENRINDE 18
3.3 ZAEHLUNG UND BEGUTACHTUNG DER ZELLEN 19
3.4 KULTIVIERUNG DER NEBENNIERENRINDENZELLEN 20
3.5 STIMULATION DER ZELLEN 20
3.6 HORMONBESTIMMUNGEN 22
3.7 RNA-ISOLIERUNG AUS NNR-ZELLKULTUR 24
4.0 OOZYTEN 27
4.1 TIERHALTUNG 27
4.2 OOZYTENPRAEPARATION 27
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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4.3 VORBEREITUNG DER MRNA FUER DIE INJEKTION 28
4.4 MIKROINJEKTION 28
4.5 UPTAKE EXPERIMENTE IN
XENOPUS LAEVIS
OOZYTEN 29
5.0 STATISTIK 29
C ERGEBNISSE
30
1.0 HORMONBESTIMMUNGEN - CORTISOL
30
1.1 CORTISOLFREISETZUNG DURCH UNSTIMULIERTE ZELLEN 30
1.2 STIMULATION DER CORTISOLFREISETZUNG DURCH ACTH 31
1.3 AUSWIRKUNGEN VON SUBSTRATMANGEL AUF DIE STIMULIERBARKEIT 33
1.5 EFFEKT VON PROBENECID AUF VERSCHIEDENE STEROIDSYNTHESE-PRODUKTE 41
1.6 EFFEKT VON APALCILLIN AUF DIE ACTH- STIMULIERTE
CORTISOLAUSSCHUETTUNG -
43
1.7 EFFEKT VON SUBSTRATEN DES RENALEN PAH- TRANSPORTERS AUF DIE
CORTISOLAUSSCHUETTUNG
44
1.8 TETRAETHYLAMMONIUM (TEA)
49
2.0 HORMONMESSUNGEN - ALDOSTERON 50
2.1 STIMULATION DER ALDOSTERONAUSSCHUETTUNG DURCH ACTH 50
2.2 ZEITABHAENGIGKEIT DER ALDOSTERONAUSSCHUETTUNG NACH ZUGABE VON
PROBENECID ZUM ACTH- HALTIGEN INKUBATIONSMEDIUM 51
2.3 EINFLUSS UNTERSCHIEDLICHER PROBENECIDKONZENTRATIONEN AUF DIE
ACTH-STIMULIERTE ALDOSTERONAUSSCHUETTUNG 52
2.4 EINFLUSS VON PROBENECID AUF DIE ALDOSTERONAUSSCHUETTUNG NICHT
ACTH-STIMULIERTER ZELLEN 53
3.0 HORMONBESTIMMUNGEN - ANDROSTENDION 54
3.1 STIMULATION DER ANDROSTENDIONAUSSCHUETTUNG DURCH ACTH UND
PROBENECID
34
3.2 EINFLUSS UNTERSCHIEDLICHER PROBENECIDKONZENTRATIONEN AUF DIE
ACTH-STIMULIERTE ANDROSTENDIONAUSSCHUETTUNG 55
4.0 EXPRESSION EINES PROBENECID- HEMMBAREN PAH- TRASNSPORTS IN
OOZYTEN VON XENOPUS LAEVIS NACH INJEKTION VON MRNA AUS
RINDEMEBENNIERENZELLEN 56
D. DISKUSSION 58
E. ZUSAMMENFASSUNG
67
F. LITERATURVERZEICHNIS
69 |
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