Expression und Regulation von Matrixmetalloproteinasen in der Schilddrüse:
Gespeichert in:
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| Veröffentlicht: |
2002
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| Beschreibung: | Leipzig, Univ., Diss., 2002 |
| Beschreibung: | 81 Bl. Ill., graph. Darst. : 30 cm |
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INHALT
ABKUERZUNGEN
1. EINLEITUNG 1
1.1. MATRIXMETALLOPROTEINASEN 1
1.1.1. MMPS UND TUMOREN 2
1.1.2. REGULATION VON MMPS 4
1.2. TIMPS 5
1.3. IN DER ARBEIT UNTERSUCHTE MMPS UND TIMPS 6
1.4. ZIEL DER ARBEIT 9
2. MATERIAL UND METHODEN 11
2.1. GEWINNUNG, TRANSPORT UND LAGERUNG DER GEWEBE 11
2.2. ZELLKULTUR 11
2.2.1. VERDAU DES GEWEBES 11
2.2.2. SEPARATION DER ZELLEN 11
2.2.3. TRYPSINIEREN, PASSAGIEREN, ZELLZAHLBESTIMMUNG 12
2.3. STIMULATIONSVERSUCHE 13
2.4. RNA-PRAEPARATION 13
2.5. DNA-ERSTSTRANGSYNTHESE 14
2.6. REVERSE TRANSKRIPTASE-POLYMERASE KETTENREAKTION (RT-PCR) 15
2.6.1. PRINZIP 15
2.6.2. SEMIQUANTITATIVE PCR 16
2.6.3. NORMALISIERUNG DER PROBEN MIT HILFE EINES HETEROLOGEN
MULTISTANDARDS 17
2.6.4. QUANTIFIZIERUNG VON CDNA MIT HILFE EINES INTERNEN HOMOLOGEN
KOMPETITORS 19
2.6.5. QUANTIFIZIERUNG DES HOMOLOGEN INTERNEN KOMPETITORS 19
2.6.6. PRIMER UND REAKTIONSBEDINGUNGEN , 21
2.6.7. PIPETTIERSCHEMA 24
2.6.8. RICHTLINIEN ZUR VERMEIDUNG VON KONTAMINATION DER PROBEN 25
2.7. AGAROSEGELELEKTROPHORESE UND QUANTIFIZIERUNG DER PCR- PRODUKTE 26
2.7.1. PUFFER 26
2.7.2. AGAROSEGELELEKTROPHORESE 26
2.8. RESTRIKTIONSVERDAU 27
2.9. ISOLIERUNG VON DNA-FRAGMENTEN AUS AGAROSEGELEN 27
2.10. SEQUENZIERUNG DER DNA 27
2.11. ELISA 27
2.12. ZYMOGRAPHIE 28
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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2.13. STATISTIK
29
3. ERGEBNISSE 30
3.1. CHARAKTERISIERUNG DER ZELLINIEN 30
3.2. RESTRIKTIONSVERDAU 31
3.3. HERSTELLUNG DER INTERNEN HOMOLOGEN KOMPETITOREN 32
3.3.1. SYNTHESE 32
3.3.2. QUANTITATIVE BESTIMMUNG DER KOMPETITOREN 32
3.3.3. VERDUENNUNGSREIHE 36
3.3.4. KOMPETITIVE PCR MIT KOMPETITOR UND TARGET 37
3.3.5. ZYKLUSABHAENGIGE KOMPETITIVE PCR 38
3.4. BESTIMMUNG VON MMP- UND TIMP-CDNA UND PROTEIN 39
3.4.1. MMP-1 40
3.4.2. TIMP-1 44
3.4.3. MMP-1/TIMP-1 KOMPLEX 47
3.4.4. MMP-3 48
3.4.5. MMP-2 49
3.4.6. MMP-9 52
3.4.7. MT1-MMP 54
3.4.8. TIMP-2 55
3.4.9. TIMP-3 57
4. DISKUSSION 59
5. ZUSAMMENFASSUNG 70
LITERATUR 73
DANKSAGUNG
EIGENSTAENDIGKEITSERKLAERUNG |
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