Nachweis von minimaler Resterkrankung im Knochenmark von Neuroblastompatienten mittels RT-PCR für Tyrosinhydroxylase mRNA und Immunfluoreszenz:
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2001
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
8
2
DER
BIOLOGISCHE
HINTERGRUND:
DAS
NEUROBLASTOM
10
2.1
DEFINITION
10
2.2
EPIDEMIOLOGIE
10
2.3
REGRESSION
11
2.4
ZELLULAERE
CHARAKTERISTIKA
11
2.5
ONKOGENESE
12
2.6
DIAGNOSE
13
2.7
PRIMAERTUMOREN
UND
METASTASEN
13
2.8
STADIENEINTEILUNG
14
2.9
THERAPIE
15
2.10
PROGNOSE
16
3
MATERIALIEN
17
3.1
HERKUNFT
VON
CHEMIKALIEN
UND
ENZYMEN
17
3.2
PUFFER
UND
MEDIEN
18
3.3
GERAETE
20
4
METHODIK
21
4.1
TYROSINHYDROXYLASE
21
4.2
PYRUVATDEHYDROGENASE
22
4.3
NEUROBLASTOMPATIENTEN
22
4.4
NEGATIVKONTROLLEN
23
4.5
VERDUENNUNGSREIHE
24
5
ZELLKULTUR
25
5.1
ZELLLINIE
25
5.2
ZELLKULTURTECHNIK
25
6
ARBEITEN
MIT
RNA
UND
DNA
26
6.1
VORBEHANDLUNG
VON
GERAETEN
UND
LOESUNGEN
26
6.2
RNA-EXTRAKTION
26
6.3
RNA-GELELEKTROPHORESE
27
6.4
BESTIMMUNG
DER
KONZENTRATION
EINER
RNA-LOESUNG
29
6.5
REVERSE
TRANSKRIPTION/
CDNA-SYNTHESE
29
6.6.1
PCR/THMRNA
30
6.6.2
NESTED
PCR/
THMRNA
32
6.7
PCR/
PDHMRNA
33
6.8
DNA-GELELEKTROPHORESE
34
6.9.1
SEQUENZIERUNG
35
6.9.2
SEQUENZIER-GEL
37
7
INDIREKTE
IMMUNFLUORESZENZ
38
8
ERGEBNISSE
40
8.1.
RT-PCR
ALS
NACHWEIS
FUER
NEUROBLASTOMZELLEN
40
8.2.
NEGATIVKONTROLLEN
43
8.3.
VERDUENNUNGSREIHE
43
8.4.
VERGLEICH
VON
IF
UND
RT-PCR
BEI
NEUROBLASTOMPATIENTEN
44
9
DISKUSSION
48
10.
ZUSAMMENFASSUNG
58
11
LITERATURVERZEICHNIS
61
12.
LEBENSLAUF
70
5 |
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