Lokaler Gentransfer in vivo mit Kollagenschwämmen als Träger für Genvektoren: Etablierung eines Tiermodells
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
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2001
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | München, Univ., Tierärztliche Fak., Diss., 2001 |
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1
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1.
EINLEITUNG
2.
SCHRIJ
SOELL
1
3
2.1
G
RUNDLAGEN
DER
G
ENTHERAPIE
3
2.2
V
EKTORSYSTEME
5
2.2.1
V
IRALE
V
EKTORSYSTEME
5
2.2.2
N
ICHTVIRALE
V
EKTORSYSTEME
7
2.3
REPORTERGENE
UND
DEREN
NACHWEIS
11
2.3.1
LUCIFERASE
(P-LUC)
11
2.3.2
SS-GALAKTOSIDASE
(SS-GAL)
11
2.3.3
E
NHANCED
G
REEN
F
LUORESCENT
P
ROTEIN
(EGFP)
12
2.4
G
ENTHERAPIE
IN
DER
T
IERMEDIZIN
13
2.4.1
ANWENDUNGSGEBIETE
13
2.4.2
T
HERAPIE
13
2.4.3
S
CHLUSSFOLGERUNGEN
15
23
K
OLLAGEN
-
ALS
T
RAEGER
FUER
A
RZNEISTOFFE
UND
Z
ELLEN
UND
DESSEN
V
ERWENDUNG
IN
DER
W
UNDHEILUNG
18
2.5.1
VORKOMMEN,
SYNTHESE,
HERSTELLUNG,
STRUKTUR
UND
RESORPTION
VON
KOLLAGEN
18
2.5.2
V
ERHALTEN
IN
DER
G
EWEBEKULTUR
19
2.5.3
F
UNKTION
IM
O
RGANISMUS
19
2.5.4
A
NWENDUNGSFORMEN
UND
E
INSATZGEBIETE
20
2.5.5
N
EBENWIRKUNGEN
23
2.5.6
WEITERE
E
RGEBNISSE
23
2.6
W
ACHSTUMSFAKTOREN
IN
DER
W
UND
-
UND
K
NOCHENHEILUNG
24
2.6.1
T
HEORETISCHE
G
RUNDLAGEN
24
2.6.2
T
HERAPEUTISCHE
M
OEGLICHKEITEN
UND
G
RENZEN
26
2.6.3
PRAKTISCHE
ASPEKTE
28
2.7
H
AUTREKONSTRUKTION
IN
DER
PLASTISCHEN
C
HIRURGIE
30
3.
EIGENE
UNTERSUCHUNGEN
3.1
Z
IELSETZUNG
32
32
3.2
U
NTERSUCHUNGSGUT
UND
M
ETHODEN
33
3.2.1
PLASMID
-DNA-P
RAEPARATION
YYM
AXI
-P
REP
"
33
3.2.1.1
P
LASMID
-DNA-P
RAEPARATION
FUER
P-LUC
33
3.2.1.2
P
LASMID
-DNA-P
RAPARATION
FUER
B
-G
AL
33
3.2.1.3
P
LASMID
-DNA-P
RAPARATION
FUER
EGFP
33
3.2.1.4
MESSUNG
DER
DNA-KONZENTRATION
34
3.2.1.5
AGAROSE
-G
EL
H
ERSTELLUNG
UND
E
LEKTROPHORESE
34
3.2.2
S
CHWAMMHERSTELLUNG
/
V
ORBEREITUNG
ZUR
B
ESTUECKUNG
UND
B
ESTUECKUNG
MIT
DNA
35
_
N
_
INHALTSVERZEICHNIS
3.2.2.1
K
LASSISCHE
S
CHWAMMHERSTELLUNG
/
V
ORBEREITUNG
ZUR
B
ESTUECKUNG
35
3.2.2.1.1
S
CHWAMMHERSTELLUNG
/V
ORBEREITUNG
ZUR
B
ESTUECKUNG
NACH
S
CHERER
36
3.2.2.2
S
CHWAMMBESTUECKUNG
MIT
DNA
UND
ENDGUELTIGE
V
ORBEREITUNG
FUER
DIE
O
PERATION
36
3.2.23
G
LEICHZEITIGE
S
CHWAMMVORBEREITUNG
UND
B
ESTUECKUNG
37
3.2.2.3.
1
S
CHWAMMVORBEREITUNG
MIT
PEI
UND
B
ESTOCKUNG
MIT
L
UC
-DNA
37
3.2.23.2
S
CHWAMMVORBEREITUNG
MIT
PEI
UND
B
ESTUECKUNG
MIT
EGFP
-DNA
37
3.2.23.3
S
CHWAMMVORBEREITUNG
MIT
PEI
UND
B
ESTUECKUNG
MIT
L
UC
-DNA
UND
P
OLYMER
/3
K
OMPONENTEN
-S
CHWAMM
38
3.2.2.4
DIREKTE
B
ESTUECKUNG
38
3.2.2.4.1
MIT
LUC-DNA
38
3.2.2.4.2
MIT
EGFP-DNA
38
3.2.3
S
CHWAMME
IN
DER
Z
ELLKULTUR
38
3.2.4
O
PERATION
39
3.2.4.1
OP-P
LAN
/
VERSUCHSPLAN
39
3.2.4.2
V
ERSUCHSTIERE
41
3.2.43
S
CHWAMMIMPLANTATION
'
42
3.2.4.3.1
V
ORBEREITUNG
DER
V
ERSUCHSTIERE
42
3.2.43.2
VORVERSUCHE
42
3.2.43.3
OP
V
ORBEREITUNG
43
3.2.43.4
A
NAESTHESIE
43
3.2.43.5
OP-DURCHFUEHRUNG
44
3.2.4.4
E
UTHANASIE
44
3.2.5
N
ACHWEISVERFAHREN
45
3.2.5.1
LUCIFERASE
-N
ACHWEIS
45
3.2.5.1.1
P
ROBENENTNAHME
UND
-A
UFBEREITUNG
IM
T
IERVERSUCH
45
3.2.5.1.2
N
ACHWEIS
IM
T
IERVERSUCH
MIT
M
ICROPLATE
S
CINHLLATION
&
L
UMINESCENCE
COUNTER
46
3.2.5.1.3
N
ACHWEIS
IN
DER
Z
ELLKULTUR
MIT
M
ICROPLATE
S
CINTILLATION
&
L
UMINESCENCE
COUNTER
46
3.2.5.1.4
P
ROTEINTEST
47
3.2.5.1.5
N
ACHWEIS
IM
T
IERVERSUCH
MIT
W
ESTERN
-B
LOT
47
3.2.5.1.6
N
ACHWEIS
IM
T
IERVERSUCH
MITTELS
I
MMUNFLUORESZENZ
48
3.2.S.2
B
-G
ALAKTOSIDASE
-N
ACHWEIS
IM
T
IERVERSUCH
48
3.2.5.2.1
H
ISTOLOGIE
48
3.2.S.2.
1.1
K
LASSISCHER
N
ACHWEIS
48
3.2.5.2.1.2
M
ODIFIZIERTER
N
ACHWEIS
49
3.2.S.2.2
I
MMUNFLUORESZENZ
49
3.2.5.23
F
ARBTEST
MIT
ANSCHUEBENDEM
P
ROTEINTEST
49
3.2.53
EGFP-NACHWEIS
IM
TIERVERSUCH
50
3.2.5.3.1
H
ISTOLOGIE
50
3.2.5.4
S
TANDARD
-H
ISTOLOGIE
50
3.2.5.5
S
TATISTISCHE
A
USWERTUNG
UND
D
OKUMENTATION
50
33.
E
RGEBNISSE
51
3.3.1
O
PERATION
UND
KLINISCHE
B
EOBACHTUNG
DER
T
IERE
51
3.3.2
E
RGEBNISSE
DER
P
ROBENENTNAHME
UND
A
UFBEREITUNG
51
3.3.3
E
RGEBNISSE
DES
L
UCIFERASENACHWEISES
53
3.3.3.1
LUCIFERASETEST
MIT
ANSCHUEBENDEM
P
ROTEINTEST
53
3.33.1.1
IN
DER
Z
ELLKULTUR
MIT
ANSCHLIEBENDEM
P
ROTEINTEST
53
3.33.2
BEIM
W
ESTERN
-B
LOT
59
3.3.33
DURCH
I
MMUNFLUORESZENZ
59
3.3.4
E
RGEBNISSE
DES
B
-G
AL
N
ACHWEISES
59
33.4.1
KLASSISCHER
N
ACHWEIS
59
33.4.2
MODIFIZIERTER
N
ACHWEIS
59
3.3.43
F
AERB
-
UND
P
ROTEINTEST
59
_
21
_
INHALTSVERZEICHNIS
3.3.5
E
RGEBNISSE
DES
EGFP-N
ACHWEISES
60
3.3.5.1
H
ISTOLOGIE
60
3.3.6
E
RGEBNISSE
DER
S
TANDARD
-H
ISTOLOGIE
60
3.3.7
Z
USAMMENFASSUNG
ALLER
V
ERSUCHSREIHEN
65
4,
DISKUSSION
_
66
4.1
D
ISKUSSION
DER
V
ERSUCHSDURCHFUEHRUNG
66
4.2
D
ISKUSSION
DER
N
ACHWEISVERFAHREN
68
43
S
CHLUSSFOLGERUNG
UND
A
USBLICK
70
S.
ZUSAMMENFASSUNG
_
_Z3
6,
SUMMARY
_
Z5
7.
ANHAENGE
_
ANHANG
1:
PLASMID-DNA-PRAEPARATION
YYMAXI-PREP
"
76
FUER
P-LUC
BZW.
SS-GAL
DNA
76
EGFP-DNA-P
RAEPARATION
79
A
NHANG
2:
DNA-M
ESSUNG
80
A
NHANG
3:
A
GAROSE
-G
EL
H
ERSTELLUNG
UND
E
LEKTROPHORESE
82
A
NHANG
4:
KLASSISCHE
S
CHWAMMHERSTELLUNG
84
A
NHANG
5:
S
CHWAMMHERSTELLUNG
NACH
S
CHERER
87
A
NHANG
6:
S
CHWAMMBESTUECKUNG
MIT
DNA
UND
ENDGUELTIGE
V
ORBEREITUNG
DES
S
CHWAMMS
ZUR
OP
89
A
NHANG
7:
GLEICHZEITIGE
S
CHWAMMVORBEREITUNG
UND
-B
ESTUECKUNG
90
A
NHANG
8:
S
CHWAEMME
IN
DER
Z
ELLKULTUR
92
A
NHANG
9:
S
CHWAMMIMPLANTATION
/M
AUS
94
S
CHWAMMIMPLANTATION
/R
ATTE
97
A
NHANG
10:
H
OMOGENISIEREN
DES
S
CHWAMMS
UND
IHN
UMGEBENDES
G
EWEBE
98
A
NHANG
11:
L
UCIFERASE
-N
ACHWEIS
101
A
NHANG
12:
P
ROTEINTEST
103
A
NHANG
13:
W
ESTERN
-B
LOT
/P
ROTEIN
-B
LOTTING
104
A
NHANG
14:
I
MMUNFLUORESZENZNACHWEIS
107
A
NHANG
15:
KLASSISCHER
B
-G
ALAKTOSIDASE
N
ACHWEIS
109
A
NHANG
16:
MODIFIZIERTER
B
-G
ALAKTOSIDASE
N
ACHWEIS
111
IY
-------------------------------------
INHALTSVERZEICHNIS
A
NHANG
17:
B
-G
ALAKTOSIDASE
F
ARBNACHWEIS
114
8.
LITERATURVERZEICHNIS
116
9.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
126
10.
VERZEICHNIS
DER
TABELLEN
UND
ABBILDUNGEN
128
11.
DANKSAGUNG
129
12.
LEBENSLAUF
130 |
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