Molekulare Analyse der Interaktion von Chemotaxinrezeptoren menschlicher neutrophiler Granulozyten mit heterotrimeren GTP-bindenden Proteinen:
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2000
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4
1 INHALTSVERZEICHNIS 4
2 ABKUERZUNGEN 6
3 EINLEITUNG
7
3.1 SIGNALUEBERTRAGUNG IM MEHRZELLIGEN ORGANISMUS 7
3.2 CHEMOTAKTISCH WIRKSAME SIGNALMOLEKUELE 8
3.3 G-PROTEIN-GEKOPPELTE REZEPTOREN 10
3.4 G-PROTEINE 11
3.5 FRAGESTELLUNG 15
4 MATERIAL UND METHODEN
16
4.1 MATERIALLISTE 16
4.2 METHODEN 17
5 ERGEBNISSE
25
5.1 WIRKUNG VERSCHIEDENER GUANIN- UND ADENINNUKLEOTIDE AUF DIE BASALE
BINDUNG VON [
35S]GTP[S] AN PLASMAMEMBRANEN HUMANER
NEUTROPHILER GRANULOZYTEN 25
5.2 EINFLUSS DES FILTERMATERIALS AUF DIE DETEKTION DER BINDUNG VON
[
35S]GTP[S] AN PLASMAMEMBRANEN HUMANER NEUTROPHILER GRANULOZYTEN 25
5.3 WIRKUNG VON GDP AUF DIE AGONIST-STIMULIERTE BINDUNG VON
[
35S]GTP[S] AN PLASMAMEMBRANEN HUMANER NEUTROPHILER GRANULOZYTEN 27
5.4 EINFLUSS VON DI- UND MONOVALENTEN KATIONEN AUF DIE BASALE UND DIE
AGONIST-STIMULIERTE BINDUNG VON [
35S]GTP[S] AN PLASMAMEMBRANEN
HUMANER NEUTROPHILER GRANULOZYTEN 31
5.5 BESTIMMUNG DER IL-8-STIMULIERTEN GTPASE-AKTIVITAET IN PLASMAMEMBRANEN
UND GRANULA HUMANER NEUTROPHILER GRANULOZYTEN 47
5.6 WIRKUNG VON IL-8 AUF DEN ZEITVERLAUF DER GTP-HYDROLYSE IN
PLASM
AMEMBRANEN HUMANER NEUTROPILER GRANULOZYTEN 47
5.7 WIRKUNG VON IL-8 AUF DIE HYDROLYSE VON GTP IN PLASMAMEMBRANEN
HUMANER NEUTROPHILER GRANULOZYTEN 47
5.8 WIRKUNG VON IL-8 AUF DIE KINETISCHEN PARAMETER DER GTPASE-AKTIVITAET
IN
PLASMAMEMBRANEN HUMANER NEUTROPHILER GRANULOZYTEN 51
5.9 VERGLEICH DER WIRKUNG VON FMET-LEU-PHE, IL-8 ODER C5A AUF DIE
BINDUNG
VON [
35S]GTP[S] AN PLASMAMEMBRANEN HUMANER NEUTROPHILER GRANULOZYTEN 52
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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5
5.10 VERGLEICH DER WIRKUNG VON IL-8, NAP-2 ODER GRO/MGSA AUF DIE BINDUNG
VON [
35S]GTP[S] AN PLASMAMEMBRANEN HUMANER NEUTROPHILER GRANULOZYTEN 52
5.11 ZEITVERLAUF DER BASALEN UND DER DURCH FMET-LEU-PHE, IL-8 ODER C5A
STIMULIERTEN BINDUNG [
35S]GTP[S] AN PLASMAMEMBRANEN HUMANER
NEUTROPHILER GRANULOZYTEN 56
5.12 AKTIVIERUNG VON G-PROTEINEN DURCH ANAPHYLATOXINE DES
KOMPLEMENTFAKTORS
C5: EIN VERGLEICH ZWISCHEN NATIVEM UND REKOMBINANTEM C5A UND SEINEM
FRAGMENT C5ADES ARG 60
5.13 VERGLEICH DER WIRKUNG VON NATIVEM C5A ODER C5ADES ARG AUF DIE
BINDUNG VON
[
35S]GTP[S] AN PLASMAMEMBRANEN HUMANER LEUKAEMIEZELLEN (HL-60) 70
5.14 UNTERSUCHUNG EINER MOEGLICHEN ADDITIVEN WIRKUNG VON IL-8 UND
FMET-LEU-PHE AUF DIE BINDUNG VON [
35S]GTP[S] AN UND DIE HYDROLYSE VON
[Y
32P]GTP DURCH PLASMAMEMBRANEN HUMANER NEUTROPHILER GRANULOZYTEN 72
\
6 DISKUSSION
77
6.1 DER [
35S]GTP[S]-BINDUNGSASSAY: EINE METHODE ZUR UNTERSUCHUNG
VON REZEPTOR-G-PROTEIN-INTERAKTIONEN IN GEREINIGTEN PLASMAMEMBRANEN
HUMANER NEUTROPHILER GRANULOZYTEN 77
6.2 AKTIVIERUNG VON G-PROTEINEN IN PLASMAMEMBRANEN HUMANER NEUTROPHILER
GRANULOZYTEN DURCH INTERLEUKIN 8 81
6.3 AKTIVIERUNG VON G-PROTEINEN DURCH ANAPHYLATOXINE DES
KOMPLEMENTFAKTORS C5: EIN VERGLEICH ZWISCHEN NATIVEM UND
REKOMBINANTEM C5A UND,SEINEM FRAGMENT C5ADES AIG 82
6.4 CHARAKTERISIERUNG DER AN DER DURCH CHEMOTAXINE AKTIVIERTEN
SIGNALTRANSDUKTION
IN HUMANEN NEUTROPHILEN GRANULOZYTEN BETEILIGTEN G-PROTEINE 84
7 ZUSAMMENFASSUNG 86
8 LITERATURVERZEICHNIS
87
9 EIGENE PUBLIKATIONEN
100
10 DANKSAGUNG
101 |
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