Unterschiedliche Expression von Oberflächenantigenen auf T-Lymphozyten von Patienten mit kolorektalen Karzinomen:
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1. INHALTSVERZEICHNIS
1. INHALTSVERZEICHNIS 3
2. ABKUERZUNGEN 6
3. EINLEITUNG 7
3.1. DAS KOLOREKTALE KARZINOM 7
3.2. IMMUNSYSTEM 7
3.3.
BEKAEMPFUNG VON TUMORZELLEN: ADOPTIVE IMMUNTHERAPIE 8
3.4. RESISTENZ DES KOLOREKTALEN KARZINOMS GEGENUEBER DER ADOPTIVEN
IMMUNTHERAPIE 11
3.5. TUMORZELLEN VON KOLOREKTALEN KARZINOMEN SEZEMIEREN IMMUNSUPPRESSIVE
FAKTOREN 12
3.6.
OBERFLAECHENANTIGENE DER T-ZELLEN 12
4. HERLEITUNG EINER AUFGABENSTELLUNG 15
4.1. TEIL 1 15
4.2. TEIL 2 16
4.3.
TEIL 3 16
5. MATERIAL UND METHODEN 18
5.1.
GERAETE 18
5.2. DATENERFASSUNG UND DATENAUSWERTUN^ 18
5.3. CHEMIKALIEN 18
5.4. ANTIKOERPER 18
5.5. LOESUNGEN 19
5.6. PATIENTEN/PROBANDEN 20
5.6.1. TUMORPATIENTEN 20
5.6.2. KLASSIFIKATIONEN KOLOREKTALER KARZINOME 21
5.6.2.1. TNM-KLASSIFIKATION FUER KOLOREKTALE KARZINOME 21
5.6.2.2. DUKES-KLASSIFIKATION UND WEITERE EINTEILUNG BEZUEGLICH
METASTASIERUNG 21
5.6.3. KONTROLLGRUPPE 21
5.6.3.1. TEIL 1 21
5.6.3.2. TEIL 2 UND 3 22
5.7. METHODENANGABEN 23
5.7.1. FICOLL-DICHTEGRADIENTENZENTRIFUGATION 23
5.7.2. ZELLKULTUR 24
5.7.3. DURCHFLUSSZYTOMETRIE/FACS-ANALYSE 25
5.7.3.1. GRUNDLAGEN 25
3
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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5.7.3.2. MEHRFACHFLUORESZENZANALYSE 26
5.8. STUDIENAUFBAU 26
5.8.1. TEIL 1 26
5.8.2. TEIL 2 26
5.8.3. TEIL 3 27
5.8.3.1. ZELLKULTUR DER TUMORPATIENTEN 27
5.8.3.2. ZELLKULTUR DER KONTROLLGRUPPE 28
5 9.
VERSUCHSPROTOKOLL 29
5.9.1. ISOLIERUNG DER ZELLEN 29
5.9.2. PROTOKOLL FUER DIREKT MARKIERTE ANTIKOERPER 29
5.9.3. PROTOKOLL FUER INDIREKT MARKIERTE ANTIKOERPER 30
5.9.4. ZELLEN WASCHEN 30
5.10. STATISTIK UND EINSATZ STATISTISCHER VERFAHREN 31
5.10.1. MANN-WHITNEY-WILCOXON-TEST 32
5.10.2. JONCKHEERE-TEST 32
5.10.3. SPEARMAN-RANG-KORRELATIONSTEST 32
5.10.4. VARIANZANALYSE 33
5.10.5. KOVARIANZANALYSE 34
5.10.6. BOXPLOT 34
6. ERGEBNISSE 35
6.1. VERGLEICH DER KONTROLLGRUPPEN AUS TEIL 1 (BUFFY COATS) UND TEIL 2
(FRISCHBLUT) 35
6.2. TAG 0: VERGLEICH TUMOR/KONTROLLGRUPPE 37
6.2.1. TAG 0: VERGLEICH T-ZELLEN VON TUMOR- UND KONTROLLGRUPPE: PROZENT
37
6.2.2. TAG 0: VERGLEICH T-ZELLEN VON TUMOR- UND KONTROLLGRUPPE: MITTLERE
FLUORESZENZ 39
6.2.3. TAG 0: VERGLEICH CD4+-T-ZELLEN VON TUMOR- UND KONTROLLGRUPPE:
PROZENT 40
6.2.4. TAG 0: VERGLEICH CD8
+-T-ZELLEN VON TUMOR- UND KONTROLLGRUPPE: PROZENT 41
6.3. TAG 7 UND TAG 14: VERGLEICH TUMOR/KONTROLLGRUPPE 42
6.3.1. CD40LIGAND (CD40L/CD154): 42
6.3.1.1. CD4
+-T-ZELLEN UND CD40L (CD154) 44
6.3.1.2. CD8
+-T-ZELLEN UND CD40L (CD154) 44
6.3.2. T-ZELL-REZEPTOR O/SS 45
6.3.3. CD49D AUF CD8
+-T-ZELLEN 46
6.3.4. TAG 7: DARSTELLUNG ALLER UNTERSUCHTEN ANTIGENE: PROZENT 47
6.3.5. TAG 7: DARSTELLUNG ALLER UNTERSUCHTEN ANTIGENE: MITTLERE
FLUORESZENZ 49
6.3.6. TAG 14: DARSTELLUNG ALLER UNTERSUCHTEN ANTIGENE: PROZENT 50
6.3.7. TAG 14: DARSTELLUNG ALLER UNTERSUCHTEN ANTIGENE: MITTLERE
FLUORESZENZ 52
6.4. UNTERSUCHUNG DER TUMORGRUPPEN 53
6.4.1. TAGO 53
6.4.2. TAG 7 UND TAG 14 54
6.4.2.1. T-ZELL-REZEPTOR OC/SS 54
6.4.2.2. CD49D 55
6.4.3. JONCKHEERE-TEST 55
6.5.
KULTIVIERUNG DER T-ZELLEN MIT VERSCHIEDENEN SEREN 56
6.5.1. MITTLERE FLUORESZENZ VON CD3: TUMORPATIENTEN UND KONTROLLGRUPPE
56
6.5.2. TUMORPATIENTEN: ALLE UNTERSUCHTEN OBERFLAECHENANTIGENE 58
6.5.3. KONTROLLGRUPPE: ALLE UNTERSUCHTEN OBERFLAECHENANTIGENE 59
6.6. ALTERSKORRELATIONEN 60
6.6.1. CD95 (FAS) 60
4
7. DISKUSSION 62
7.1. KURZE ZUSAMMENFASSUNG DER ERGEBNISSE 62
7.2.
AUSWAHL EINER KONTROLLGRUPPE 62
7.3.
FAS-EXPRESSION AUF T-ZELLEN STEIGT MIT DEM ALTER 63
7
.
4
.
PHAENOTYP TAG 0 64
7
.
5
.
STIMULATION VON T-ZELLEN MIT ANTI-CD3 UND 11-2 65
7.6.
TIL ODER PBL? 66
7.7.
T-ZELL-REZEPTOR A/SS 66
7.8. CD40LIGAND (CD40L) 68
7.9.
CD40LIGAND: BEDEUTUNG FUER YYCROSS-PRIMING", DENDRITISCHE ZELLEN UND
11-12 69
7.10.
CD49D, BESTANDTEIL DES INTEGRIN VLA-4 71
7.11. KULTIVIERUNG DER T-ZELLEN MIT VERSCHIEDENEN SEREN 73
7.11.1. CD3: BESTANDTEIL DER T-ZELL-REZEPTOR 73
7.11.2. FETALES KAELBERSERUM ODER AUTOLOGES TUMORSERUM? 74
8
. ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK 76
8.1. ZUSAMMENFASSUNG
76
8.2. BISPEZIFISCHE ANTIKOERPER: EIN AUSBLICK 76
9. LITERATUR 78
10. ANHANG
92
10.1. EIDESSTATTLICHE ERKLAERUNG 92
10.2. LEBENSLAUF
93
10.3. DANKSAGUNG
94
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