Molekulargenetische Analyse des Pax6-Gens in der Ausprägung okularer Strukturen:
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|---|---|
| Format: | Thesis Book |
| Language: | German |
| Published: |
Göttingen
Cuvillier
2001
|
| Edition: | 1. Aufl. |
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| Physical Description: | 140 S. Ill., graph. Darst. : 21 cm |
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1.1
DIE
AUSBILDUNG
ZELLULAERER
VIELFALT
IM
ZENTRALEN
NERVENSYSTEM
.
2
1.2
DIE
AUSBILDUNG
NEURONALER
VIELFALT
IN
DER
RETINA
.
4
1.3
DAS
ZUSAMMENSPIEL
ZELLEXTEMER
SIGNALE
UND
DER
INTRINSISCHEN
VORLAEUFER
ZELLKOMPETENZ
STEUERT
DIE
SPEZIFIZIERUNG
RETINALER
ZELLTYPEN
.
6
1.4
DIE
AUFRECHTERHALTUNG
DES
VORLAEUFERZELLSTATUS
.
8
1.5
VORLAEUFERZELLHETEROGENITAET
.
9
1.6
ZELLAUTONOME
FAKTOREN
IN
DER
DETERMINATION
DES
RETINALEN
ZELLSCHICKSALS
.
10
1.7
HINWEISE
AUF
DIE
MOLEKULARE
GRUNDLAGE
RETINALER
VORLAEUFERZELLIDENTITAET.
.
12
1.8
ZIELSETZUNG
.
15
2.
ERGEBNISSE
2.1
PAX6
IST
WAEHREND
DER
GESAMTEN
RETINOGENESE
IN
RETINALEN
VORLAEUFERZELLEN
EXPRIMIERT
.
16
2.2
DER
SCHRITT
VOM
NEUROEPITHEL
DES
AUGENBLAESCHENS
ZUR
RETINALEN
VORLAEUFER
ZELLIDENTITAET
IST
ABHAENGIG
VON
EINER
FRUEHEN
PHASE
DER
PAX6-AKTIVITAET
.
18
2.3
KONDITIONALE
INAKTIVIERUNG
VON
PAX6
.
20
2.4
KONSTRUKTION
EINER
TRANSGENEN
MAUSLINIE
MIT
RETINASPEZIFISCHER
CRE-AKTIVITAET
.
22
2.5
DAS
A-CRE-TRANSGEN
DIRIGIERT
SPEZIFISCHE
CRE-AKTIVITAET
IN
ALLEN
VORLAEUFER
ZELLEN
DER
DISTALEN
NEURORETINA
.
24
2.6
KONDITIONALE
INAKTIVIERUNG
VON
PAX6
IN
RETINALEN
VORLAEUFERZELLEN
.
29
2.7
ERHALTUNG
RETINALER
VORLAEUFERZELLIDENITAET
NACH
PAXB-INAKTIVIERUNG
.
30
2.8
PAX6
KONTROLLIERT
DIE
AKTIVIERUNG
RETINOGENER
BHLH-TRANSKRIPTIONS
FAKTOREN
IN
SUBPOPULATIONEN
RETINALER
VORLAEUFERZELLEN
.
35
INHALTSVERZEICHNIS
2.9
DIE
BHLH-TRANSKRIPTIONSFAKTOREN
NGN2
UND
MASHL
DEFINIEREN
ZWEI
NICHT
UEBERLAPPENDE
PAX6-POSITIVE
RETINALE
VORLAEUFERZELL-POPULATIONEN,
AUS
DENEN
BIPOLARZELLEN
HERVORGEHEN
.
37
2.10
PAX6
BINDET
UND
AKTIVIERT
DEN
RETINALEN
ENHANCER
VON
NGN2,
IN
VITRO
UND
IN
VIVO
.
40
2.11
INITIATION
DER
NEUROGENESE
IN
DER
PAX6-DEFIZIENTEN
RETINA
.
44
2.12
PAX6
IST
IN
GEWEBEAUTONOMER
UND
DOSISABHAENGIGER
WEISE
ESSENTIELL
FUER
DIE
AUSBILDUNG
DER
IRIS
.
45
2.13
DIE
INAKTIVIERUNG
VON
PAX6
IN
RETINALEN
VORLAEUFERZELLEN
FUEHRT
ZUR
AUS
SCHLIESSLICHEN
DIFFERENZIERUNG
VON
AMAKRINZELLEN
.
47
2.14
NEUROTRANSMITTER-PHAENOTYPEN
UND
SUBTYP-SPEZIFIZIERUNG
DER
AUS
PAX6
DEFIZIENTEN
RETINALEN
VORLAEUFERZELLEN
HERVORGEHENDEN
AMAKRINZELLEN
.
51
2.15
TRANSGENE
KARTIERUNG
DES
ZELLSCHICKSALS
PAX6-DEFIZIENTER
RETINALER
VORLAEUFERZELLEN
.
55
3.
DISKUSSION
3.1
FRUEHE
UND
SPAETE
PHASEN DER
PAX6-AKTIVITAET
IN
DER
DETERMINATION
DER
RETINA
.
59
3.2
DIE
INAKTIVIERUNG
VON
PAX6
FUEHRT
ZUR
VOLLSTAENDIGEN
BESCHRAENKUNG
DES
RETINOGENETISCHEN
POTENTIALS
AUF
EIN
EINZIGES,
DER
NORMALERWEISE
DEN
RETINALEN
VORLAEUFERZELLEN
OFFENSTEHENDEN
ZELLSCHICKSALE
.
60
3.3
PAX6
KONTROLLIERT
DAS
RETINOGENETISCHE
POTENTIAL
RETINALER
VORLAEUFERZELLEN
63
3.4
EIN
WAEHREND
DER
GESAMTEN
RETINOGENESE
DEN
RETINALEN
VORLAEUFERZELLEN
UN
TERLIEGENDES
MOLEKULARES
MOTIV
.
69
3.5
DIE
ERLANGUNG
RETINALER
VORLAEUFERZELLIDENTITAET
.
72
4.
MATERIALIEN
UND
METHODEN
4.1
ABKUERZUNGEN
UND
SYMBOLE
.
76
4.2
MATERIALIEN
4.2.1
PLASMIDE
.
77
4.2.2
PLASMIDKONSTRUKTE
.
77
4.2.3
DNA-LAENGENSTANDARDS
.
80
4.2.4
BAKTERIENSTAEMME
.
80
INHALTSVERZEICHNIS
4.2.5
ANTIBIOTIKA:
.
80
4.2.6
NAEHRMEDIEN:
.
80
4.2.7
PUFFER
UND
LOESUNGEN
.
81
4.2.8
CHEMIKALIEN
.
83
4.2.9
RADIOCHEMIKALIEN
.
84
4.2.10
ENZYME
.
84
4.2.11
SONSTIGE
MATERIALIEN
.
84
4.3
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
4.3.1
TRANSFORMATION
VON
E.
COLI
.
85
4.3.2
ISOLIERUNG
VON
PLASMID-DNA
AUS
E.
COLI
.
86
4.3.3
ENZYMATISCHE
MANIPULATION
VON
DNA
.
88
4.3.4
ISOLIERUNG,
AUFREINIGUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
.
91
4.3.5
GENOTYPISIERUNG
DURCH
SOUTHERN-TRANSFER
95
4.3.6
GENOTYPISIERUNG
DURCH
PCR
.
97
4.3.7
ELEKTROPHORETISCHE
GELRETARDATIONSEXPERIMENTE
MIT
RADIOAKTIV
MAR
KIERTEN
DOPPELSTRAENGIGEN
OLIGONUKLEOTIDEN
.
97
4.4
EMBRYOLOGISCHE
UND
ZELLBIOLOGLSCHE
METHODEN
4.4.1
ERZEUGUNG
TRANSGENER
MAEUSE
MITTELS
MIKROINJEKTION
.
99
4.4.2
MAEUSE
UND
EMBRYONEN
.
100
4.4.3
INJEKTIONEN
.
100
4.4.4
TRANSFEKTION
VON
COS-7
UND
373-ZELLEN
.
100
4.4.5
TRANSFEKTION
VON
HUEHNEREMBRYONEN
MITTELS
IN
OVO-ELEKTROPORATION
.
101
4.5
HISTOLOGIE
4.5.1
EINBETTEN
VON
EMBRYONEN
UND
GEWEBEN
IN
PARAFFIN
.
102
4.5.2
ANFERTIGEN
VON
GEFRIERSCHNITTEN
.
102
4.5.3
IMMUNHISTOCHEMIE
.
103
4.5.4
IN-SITU-HYBRIDISIERUNG
MIT
RADIOAKTIV
MARKIERTEN
CRNA-SONDEN
.
105
4.5.5
IN-SITU-HYBRIDISIERUNG
MIT
DIGOXIGENIN-MARKIERTEN
CRNA-SONDEN
.
107
4.5.6
HISTOLOGISCHER
NACHWEIS
DER
ZELLPROLIFERATION
.
109
4.5.7
HISTOLOGISCHER
NACHWEIS
VON
APOPTOSE
.
109
4.5.8
HISTOCHEMISCHER
NACHWEIS
VON
SS-GALACTOSIDASEAKTIVITAET
.
110
4.5.9
HISTOCHEMISCHER
NACHWEIS
VON
ALKALISCHER
PHOSPHATASE
AKTIVITAET
.
111
INHALTSVERZEICHNIS
4.5.10
KONTRASTFAERBUNG
HISTOLOGISCHER
SCHNITTE
MIT
NEUTRALROT
.
112
4.5.11
HAEMATOXYLIN-EOSIN-FAERBUNG
HISTOLOGISCHE
SCHNITTE
.
113
4.5.12
DOKUMENTATION
UND
AUSWERTUNG
HISTOLOGISCHER
PRAEPARATE
.
114
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
115
6.
LITERATURVERZEICHNIS
.
116
7.
PUBLIKATIONEN
.
137
8.
DANKSAGUNG
.
138
9.
LEBENSLAUF
.
140 |
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