In-vitro-Untersuchungen zu 5-Aminolävulinsäure-induzierter Protoporphyrin-IX-Fluoreszenz in Plattenepithelkarzinomzellen des Mund-Rachen-Kehlkopf-Bereichs:
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2001
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1.
EINLEITUNG
.
4
1.1
ENTWICKLUNG
DER
PHOTODYNAMISCHEN
DIAGNOSTIK
.
4
1.1.1
PHOTODYNAMISCHE
DIAGNOSTIK
MIT
HILFE
VON
SYNTHETISCH
HERGESTELLTEN
PORPHYRINEN
.
4
1.1.2
PHOTODYNAMISCHE
DIAGNOSTIK
MIT
HILFE
VON
5-ALA-INDUZIERTEM
PROTOPORPHYRIN
IX
.
5
1.2
HAEMBIOSYNTHESE
.
7
1.3
TUMORSPEZIFITAET
VON
5-ALA-INDUZIERTEM
PROTOPORPHYRIN
IX
.
9
1.
4
ZIELSETZUNG
UND
FRAGESTELLUNGEN
.
10
2.
MATERIAL
UND
METHODE
.
13
2.1
KULTIVIERUNG
DER
ZELLEN
.
13
2.1.1
ZELLINIEN
.
13
2.1.2
SUBKULTIVIERUNG
.
14
2.1.3
TRYPANBLAU-AUSSCHLUSSTEST
.
14
2.1.4
KONSERVIERUNG
UND
AUFTAUEN
.
15
2.2
MESSUNG
DER
ZELLULAEREN
FLUORESZENZINTENSITAET
.
15
2.2.1
MESSPRINZIP:
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
15
2.2.2
MESSUNGEN
MIT
DEM
FACSCALIBUR
.
17
2.3
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
5-ALA-INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX-FLUORESESZENZ
.
19
2.3.1
ZEITABHAENGIGKEIT
DER
5-ALA-INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX
FLUORESZENZ
.
19
2.3.2
KONZENTRATIONSABHAENGIGKEIT
DER
5-ALA-INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX-FLUORESZENZ
.
19
2.4
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
ZEIT
UND
KONZENTRATIONSABHAENGIGEN
5-ALA-HEXYLESTER-INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX-FLUORESZENZ
.
21
2.5
FLUORESZENZMIKROSKOPISCHE
DARSTELLUNG
DER
ZFI
.
24
2.6
BIOMETRIE
.25
2.6.1
AUSWERTUNG
DER
MESSERGEBNISSE
.
25
2.6.2
STATISTIK
.
25
3.
ERGEBNISSE
.
27
3.1
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
MESSUNG
DER
5-ALA-INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX-FLUORESZENZ.
27
3.1.1
ZEITABHAENGIGKEIT
DER
5-ALA-INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX
FLUORESZENZ.
27
3.1.2
KONZENTRATIONSABHAENGIGKEIT
DER
5-ALA-INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX-FLUORESZENZ.
32
3.1.3
VERGLEICH
DER
ZEIT
UND
KONZENTRATIONSABHAENGIGKEIT
DER
5-ALA-INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX-FLUORESZENZ.
36
3.2
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
MESSUNG
DER
5-ALA-HEXYLESTER
INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX-FLUORESZENZ
.
38
3.2.1
ZEITABHAENGIGKEIT
DER
5-ALA-HEXYLESTER-INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX-FLUORESZENZ.
38
3.2.2
KONZENTRATIONSABHAENGIGKEIT
DER
5-ALA-HEXYLESTER-INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX-FLUORESZENZ
.
41
3.3
VERGLEICH
DER
5-ALA
UND
5-ALA-HEXYLESTER-INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX-FLUORESZENZ.
43
3.4
VITALITAET
.
45
3.5
FLUORESZENZMIKROSKOPISCHE
DARSTELLUNG
DER
ZFI
.
45
4.
DISKUSSION
.
50
4.1
METHODIK
.
50
4.1.1
TRYPANBLAU-AUSSCHLUSSTEST
.
50
4.1.2
FLUORESZENZMIKROSKOPIE
.
51
4.1.2.1
IDENTIFIZIERUNG
DER
ROTFLUORESZENZ
ALS
PROTOPORPHYRIN-IX
FLUORESZENZ
.
51
4.1.3
DURCHFLUSSZYTOMETRIE.
52
4.1.4
VERSUCHSPROTOKOLLE
.
53
4.1.4.1
INKUBATIONSMEDIUM
.
53
4.1.4.2
UNTERSUCHUNGSPARAMETER:
INKUBATIONSZEIT
UND
5-ALA/5-ALA
HEXYLESTER-KONZENTRATION
DER
INKUBATIONSLOESUNG.
54
4.2
ERGEBNISSE.
55
4.2.1
VITALITAET
.
55
4.2.2
FLUORESZENZMIKROSKOPISCHE
DARSTELLUNG
DER
ZELLULAEREN
PROTOPORPHYRIN-IX-FLUORESZENZ
.
56
4.2.3
ZEIT
UND
KONZENTRATIONSABHAENGIGKEIT
DER
5-ALA-INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX-FLUORESZENZ
.
57
4.2.4
IN-VITRO-UNTERSUCHUNGEN
ZUR
5-ALA-HEXYLESTER-INDUZIERTEN
PROTOPORPHYRIN-IX-FLUORESZENZ
.
62
4.2.5
KLINISCHE
BEDEUTUNG
DER 5-ALA-ESTER
.
65
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
66
6.
LITERATURVERZEICHNIS
.
69
7.
ABKUERZUNGEN
.
85
8.
DANKSAGUNG
9.
LEBENSLAUF |
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