Molekularbiologische Mutationsanalyse von vier Patienten mit metachromatischer Leukodystrophie:
Saved in:
| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Book |
| Language: | German |
| Published: |
2001
|
| Subjects: | |
| Online Access: | Inhaltsverzeichnis |
| Item Description: | Kiel, Univ., Diss., 2001 |
| Physical Description: | VIII, 64 S. Ill., graph. Darst. : 21 cm |
Staff View
MARC
| LEADER | 00000nam a2200000 c 4500 | ||
|---|---|---|---|
| 001 | BV013984516 | ||
| 003 | DE-604 | ||
| 007 | t | ||
| 008 | 011023s2001 gw ad|| m||| 00||| ger d | ||
| 016 | 7 | |a 962772909 |2 DE-101 | |
| 035 | |a (OCoLC)49313740 | ||
| 035 | |a (DE-599)BVBBV013984516 | ||
| 040 | |a DE-604 |b ger |e rakddb | ||
| 041 | 0 | |a ger | |
| 044 | |a gw |c DE | ||
| 049 | |a DE-355 | ||
| 084 | |a 610 |2 sdnb | ||
| 100 | 1 | |a Hermann, Stefanie |d 1975- |e Verfasser |0 (DE-588)12323106X |4 aut | |
| 245 | 1 | 0 | |a Molekularbiologische Mutationsanalyse von vier Patienten mit metachromatischer Leukodystrophie |c vorgelegt von Stefanie Hermann |
| 264 | 1 | |c 2001 | |
| 300 | |a VIII, 64 S. |b Ill., graph. Darst. : 21 cm | ||
| 336 | |b txt |2 rdacontent | ||
| 337 | |b n |2 rdamedia | ||
| 338 | |b nc |2 rdacarrier | ||
| 500 | |a Kiel, Univ., Diss., 2001 | ||
| 650 | 4 | |a Leukodystrophy | |
| 650 | 4 | |a Molecular biology | |
| 650 | 4 | |a Mutations | |
| 655 | 7 | |0 (DE-588)4113937-9 |a Hochschulschrift |2 gnd-content | |
| 856 | 4 | 2 | |m DNB Datenaustausch |q application/pdf |u http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=009572543&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |3 Inhaltsverzeichnis |
| 943 | 1 | |a oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-009572543 | |
Record in the Search Index
| _version_ | 1807772520441446400 |
|---|---|
| adam_text |
SEITE
IV
INHALTSVERZEICHNIS
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
VI
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
VI
1
EINLEITUNG
1
1.1.
METACHROMATISCHE
LEUKODYSTROPHIE
1
1.2.
DIE
LYSOSOMALE
ARYLSULFATASE
A
3
1.3.
STRUKTUR
DER
ARYLSULFATASE
A
5
1.4.
GENETISCHE
GRUNDLAGE
DER
ARYLSULFATASE
A
6
2
PROBLEMSTELLUNG
7
3
MATERIAL
UND
METHODEN
9
3.1.
MATERIAL
_
9
3.1
1.
GERATE
9
3.1.2.
EDV
9
3.1.3.
MATERIALIEN
ZUM
ARBEITEN
MIT
BAKTERIEN,
PHAGEN
UND
EUKARYONTISCHEN
ZELLEN
10
3.1.6.
MATERIALIEN
FUER
DAS
SCREENING
_
10
3.1.5.
ENZYME
10
3.1.6.
NUKLEOTIDE
10
3.1.7
RADIOAKTIVE
SUBSTANZEN
10
3.1.8.
CHEMIKALIEN
10
3.1.9.
VEKTOREN,
BAKTENENSTAEMME
UND
EUKARYONTISCHE
ZELLEN
11
3.1.10.
MEDIEN
ZUR
ANZUCHT
VON
BAKTERIEN
UND
EUKARYONTISCHEN
ZELLEN
11
3.1.11
STANDARDLOESUNGEN
11
3.2.
METHODEN
12
3.2.1.
ALLGEMEINE
METHODEN
ZUM
ARBEITEN
MIT
DNA
UND
RNA
12
3.2.1.1.
PRAEPARATION
GENOMISCHER
DNA
AUS
KULTIVIERTEN
HUMANEN
FIBROBLASTEN
BZW.
LTK'
-
UND
BHK
ZELLEN
12
3.2.1.2.
PRAEPARATION
TOTALER
RNA
AUS
KULTIVIERTEN
HUMANEN
FIBROBLASTEN
BZW.
LTK'
-
UND
BHK-ZELLENL3
3.2.1.3.
KLASSISCHE
MINIPRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
13
3.2.1.4.
MINIPRAEPARATION
NACH
QIAGEN-STANDARDPROTOKOLL
13
3.2.1.6.
MIDI-/MAXIPRAEPARATION
NACH
QIAGEN
14
3.2.1.7.
PRAEZIPITATION
MIT
ETHANOL
14
3.2.1.8.
EXTRAKTION
MIT
PHENOL,
PHENOL/CHLOROFORM
UND
CHLOROFORM
14
3.2.1.9.
BESTIMMUNG
VON
DNA
BZW.
RNA
KONZENTRATIONEN
14
3.2.1.10. SPALTUNG
VON
DNA
DURCH
RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN
15
3.2.1
11.
DNA-REINIGUNG
UEBER
SEPHADEX
G-50
SAEULEN
15
3.2.1.12.
LIGATION
15
3.2.1.13.
AUFFULLEN
VON
3
'
-ZURUECKLIEGENDEN
ENDEN
16
3.2.2.
TRANSFORMATION
VON
PLASMID-DNA
IN
CHEMISCH
KOMPETENTE
E.
COLI-BAKTENEN
16
3.2.2.1
HERSTELLUNG
VON
KOMPETENTEN
BAKTERIEN
FUER
KLASSISCHE
TRANSFORMATION.
16
3.2.2.2.
TRANSFORMATION
CHEMISCH
KOMPETENTER
BAKTERIEN
17
3.2.2.3.
KOLONIE-HYBRIDISIERUNG
17
3.2
3.
ELEKTROPHORESE-TECHNIKEN
18
3.2
3.1.
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
ZUR
AUFTRENNUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
18
3.2.3.2.
ISOLIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
AUS
AGAROSE-GELEN
18
3.2.3
3.
AGAROSE-FORMALDEHYD-GELELEKTROPHORESE
VON
RNA
18
3.2.3
4
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
19
3.2.4.
HYBRIDISIERUNGSTECHNIKEN
20
3.2.4.1.
SOUTHERN-BLOT
(ZUR
HYBRIDISIERUNG
VON
DNA)
20
3.2.4.2.
NORTHERN-BLOT
(ZUR
HYBRIDISIERUNG
VON
RNA)
20
3.2.4.3.
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
21
3.2.4.4.
HYBRIDISIERUNG
VON
SOUTHEM-BLOTS
(DNA)
UND
NORTHEM-BLOTS
(RNA)
21
3.2.5.
DNA-AMPLIFIKATION
MIT
DER
TAQ-POLYMERASE
_
22
3.2.5.1
PCR
(POLYMERASE-CHAIN-REACTION)
22
SEITE
V
3.2.5.2.
REINIGUNG
DER
PCR-FRAGMENTE
22
3.2.6.
SEQUENZIERUNG
_
23
3.2.7.
IN-VITRO-MUTAGENESE
23
3.2.7.1.
EINZELSTRANG-DNA-PRAEPARATION
23
3.2.7.2
IN-VITRO-MUTAGENESE
24
3.2.8.
ARBEITEN
MIT
EUKARYONTISCHEN
ZELLEN
25
3.2.8.1
ZELLKULTUR
25
3.2.8
2.
AUFTAUEN
UND
EINFRIEREN
VON
ZELLEN
25
3.2.8
3.
TRANSIENTE
TRANSFEKTION
VON
BHK-ZELLEN
MIT
LIPOFECTAMINEYY
_
26
3.2.8.4.
STABILE
TRANSFEKTION
VON
LTK-ZELLEN
MIT
LIPOFECTAMINEYY
26
3.2.8.5.
ERNTEN
DER
ZELLEN
26
3.2.9.
PROTEINBESTIMMUNGEN
27
3.2.9.1.
BCA-ASSAY.
27
3.2
9.2.
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
BRADFORD
27
3.2.9.3
ASA-BESTIMMUNG
DURCH
INDIREKTEN
ELISA
27
3.2.10.
ENZYMAKTIVITATSBESTIMMUNGEN
28
3.2
10.1.
ASA-AKTIVITAETSBESTIMMUNG
_
28
3.2.10.2
SS-HEXOSAMINIDASE-AKTIVITAETSBESTIMMUNG
28
3.2.11.
FAERBUNGEN
28
3.2.11.1.
X-GAL-FAERBUNG
MIT
PCMVSS
TRANSFIZIERTER
ZELLEN
IN
SITU
(FUER
DIE
OPTIMIERUNG
DER
TRANSFEKTIONSEFFIZIENZ)
28
3.2.12.
INDIREKTE
IMMUNFLUORESZENZ
VON
KULTURZELLEN
29
3.2.13.
METABOLISCHE
MARKIERUNG
_
29
3.2.12.1
PULSE/CHASE
VERSUCHE
AN
STABIL
BZW.
TRANSIENT
TRANSFIZIERTEN
ZELLEN
(BHK
BZW.
LTK
-ZELLEN)
_
29
3.2.12.2.
IMMUNPRAEZIPITATION
VON
LYSOSOMALEN
ENZYMEN
AUS
ZELLEN
30
3.2.12.3.
FLUOROGRAPHIE
31
4
ERGEBNISSE
32
4.1.
RNA-ANALYSE
DER
FAMILIE
V.
32
4.2.
IDENTIFIZIERUNG
DER
MUTATIONEN
32
4.2.1
PCR-AMPLIFIKATION
DER
DNA
DES
ASA-GENS
33
4.2
2.
IDENTIFIZIERUNG
DER
MUTATIONEN
DURCH
SEQUENZIERUNG
_
33
43.
VERIFIZIERUNG
DER
MUTATIONEN
DURCH
IN-VITRO-MUTAGENESE
UND
TRANSIENTE
TRANSFEKTION
IN
BHK-ZELLEN
39
4.3.1
IN-VITRO-MUTAGENESE
39
4.3.2.
TRANSIENTE
TRANSFEKTION
IN
BHK-ZELLEN
41
4.3.2.1.
ASA-AKTIVITAETSBESTIMMUNG
DER
HUMANEN
ASA
IN
TRANSFIZIERTEN
BHK-ZELLEN
42
4.3.2.2.
BESTIMMUNG
DER
SPEZIFISCHEN
AKTIVITAET
DURCH
ELISA
43
4.4.
UNTERSUCHUNGEN
DER
ASA-BIOSYNTHESE
DER
MUTIERTEN
ENZYME
DURCH
PULSE/CHASE
VERSUCHE
UND
IMMUNPRAEZIPITATION
45
4
4.1.
PULSE/CHASE
IN
DEN
TRANSFIZIERTEN
ZELLINIEN
45
4
4.2.
IMMUNPRAEZIPITATION
46
5
DISKUSSION
48
6
ZUSAMMENFASSUNG
53
7
LITERATUR
55
8
ANHANG
61
I.
SEQUENZIERUNGSPRIMER
IM
EINZELNEN:
61
II.
FUER
DIE
MUTAGENESE
UND
TRANSFEKTION
VERWENDETE
PLASMIDE:
62
1
PBEH/PALTER:
62
2.
PCDNA3:
62
DANKSAGUNG
63
LEBENSLAUF
_
64 |
| any_adam_object | 1 |
| author | Hermann, Stefanie 1975- |
| author_GND | (DE-588)12323106X |
| author_facet | Hermann, Stefanie 1975- |
| author_role | aut |
| author_sort | Hermann, Stefanie 1975- |
| author_variant | s h sh |
| building | Verbundindex |
| bvnumber | BV013984516 |
| ctrlnum | (OCoLC)49313740 (DE-599)BVBBV013984516 |
| discipline | Medizin |
| format | Book |
| fullrecord | <?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?><collection xmlns="http://www.loc.gov/MARC21/slim"><record><leader>00000nam a2200000 c 4500</leader><controlfield tag="001">BV013984516</controlfield><controlfield tag="003">DE-604</controlfield><controlfield tag="007">t</controlfield><controlfield tag="008">011023s2001 gw ad|| m||| 00||| ger d</controlfield><datafield tag="016" ind1="7" ind2=" "><subfield code="a">962772909</subfield><subfield code="2">DE-101</subfield></datafield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(OCoLC)49313740</subfield></datafield><datafield tag="035" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">(DE-599)BVBBV013984516</subfield></datafield><datafield tag="040" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-604</subfield><subfield code="b">ger</subfield><subfield code="e">rakddb</subfield></datafield><datafield tag="041" ind1="0" ind2=" "><subfield code="a">ger</subfield></datafield><datafield tag="044" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">gw</subfield><subfield code="c">DE</subfield></datafield><datafield tag="049" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">DE-355</subfield></datafield><datafield tag="084" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">610</subfield><subfield code="2">sdnb</subfield></datafield><datafield tag="100" ind1="1" ind2=" "><subfield code="a">Hermann, Stefanie</subfield><subfield code="d">1975-</subfield><subfield code="e">Verfasser</subfield><subfield code="0">(DE-588)12323106X</subfield><subfield code="4">aut</subfield></datafield><datafield tag="245" ind1="1" ind2="0"><subfield code="a">Molekularbiologische Mutationsanalyse von vier Patienten mit metachromatischer Leukodystrophie</subfield><subfield code="c">vorgelegt von Stefanie Hermann</subfield></datafield><datafield tag="264" ind1=" " ind2="1"><subfield code="c">2001</subfield></datafield><datafield tag="300" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">VIII, 64 S.</subfield><subfield code="b">Ill., graph. Darst. : 21 cm</subfield></datafield><datafield tag="336" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">txt</subfield><subfield code="2">rdacontent</subfield></datafield><datafield tag="337" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">n</subfield><subfield code="2">rdamedia</subfield></datafield><datafield tag="338" ind1=" " ind2=" "><subfield code="b">nc</subfield><subfield code="2">rdacarrier</subfield></datafield><datafield tag="500" ind1=" " ind2=" "><subfield code="a">Kiel, Univ., Diss., 2001</subfield></datafield><datafield tag="650" ind1=" " ind2="4"><subfield code="a">Leukodystrophy</subfield></datafield><datafield tag="650" ind1=" " ind2="4"><subfield code="a">Molecular biology</subfield></datafield><datafield tag="650" ind1=" " ind2="4"><subfield code="a">Mutations</subfield></datafield><datafield tag="655" ind1=" " ind2="7"><subfield code="0">(DE-588)4113937-9</subfield><subfield code="a">Hochschulschrift</subfield><subfield code="2">gnd-content</subfield></datafield><datafield tag="856" ind1="4" ind2="2"><subfield code="m">DNB Datenaustausch</subfield><subfield code="q">application/pdf</subfield><subfield code="u">http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=009572543&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA</subfield><subfield code="3">Inhaltsverzeichnis</subfield></datafield><datafield tag="943" ind1="1" ind2=" "><subfield code="a">oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-009572543</subfield></datafield></record></collection> |
| genre | (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content |
| genre_facet | Hochschulschrift |
| id | DE-604.BV013984516 |
| illustrated | Illustrated |
| indexdate | 2024-08-19T00:10:22Z |
| institution | BVB |
| language | German |
| oai_aleph_id | oai:aleph.bib-bvb.de:BVB01-009572543 |
| oclc_num | 49313740 |
| open_access_boolean | |
| owner | DE-355 DE-BY-UBR |
| owner_facet | DE-355 DE-BY-UBR |
| physical | VIII, 64 S. Ill., graph. Darst. : 21 cm |
| publishDate | 2001 |
| publishDateSearch | 2001 |
| publishDateSort | 2001 |
| record_format | marc |
| spelling | Hermann, Stefanie 1975- Verfasser (DE-588)12323106X aut Molekularbiologische Mutationsanalyse von vier Patienten mit metachromatischer Leukodystrophie vorgelegt von Stefanie Hermann 2001 VIII, 64 S. Ill., graph. Darst. : 21 cm txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Kiel, Univ., Diss., 2001 Leukodystrophy Molecular biology Mutations (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=009572543&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
| spellingShingle | Hermann, Stefanie 1975- Molekularbiologische Mutationsanalyse von vier Patienten mit metachromatischer Leukodystrophie Leukodystrophy Molecular biology Mutations |
| subject_GND | (DE-588)4113937-9 |
| title | Molekularbiologische Mutationsanalyse von vier Patienten mit metachromatischer Leukodystrophie |
| title_auth | Molekularbiologische Mutationsanalyse von vier Patienten mit metachromatischer Leukodystrophie |
| title_exact_search | Molekularbiologische Mutationsanalyse von vier Patienten mit metachromatischer Leukodystrophie |
| title_full | Molekularbiologische Mutationsanalyse von vier Patienten mit metachromatischer Leukodystrophie vorgelegt von Stefanie Hermann |
| title_fullStr | Molekularbiologische Mutationsanalyse von vier Patienten mit metachromatischer Leukodystrophie vorgelegt von Stefanie Hermann |
| title_full_unstemmed | Molekularbiologische Mutationsanalyse von vier Patienten mit metachromatischer Leukodystrophie vorgelegt von Stefanie Hermann |
| title_short | Molekularbiologische Mutationsanalyse von vier Patienten mit metachromatischer Leukodystrophie |
| title_sort | molekularbiologische mutationsanalyse von vier patienten mit metachromatischer leukodystrophie |
| topic | Leukodystrophy Molecular biology Mutations |
| topic_facet | Leukodystrophy Molecular biology Mutations Hochschulschrift |
| url | http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=009572543&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA |
| work_keys_str_mv | AT hermannstefanie molekularbiologischemutationsanalysevonvierpatientenmitmetachromatischerleukodystrophie |