Einfluß von Glukose, TGF beta und Angiotensin II auf die Apoptosevon humanen Endothelzellen:
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1999
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INHALT
SEITE
1
EINLEITUNG
1
1.1
PATHOPHYSIOLOGIE
DER
ATHEROSKLEROSE
1
1,2
MOEGLICHE
FORMEN
DES
ZELLTODES
3
1.2.1
APOPTOSE
3
1.2.2
NEKROSE
4
1
.2.3
DIE
SIGNALTRANSDUKTION
DER
APOPTOSE
5
1.2.3.1
CASPASE-PROTEASEN
5
1.2.3.2
TYROSINPHOSPHORYLIERUNG
6
1,3
EINFLUSS
VON
PROATHEROSKLEROTISCHEN
FAKTOREN
AUF
DIE
APOPTOSE
7
1.3.1
DIABETES
MELLITUS
7
1.3.2
ANGIOTENSIN
II
7
1.4
EINFLUSS
VON
ANTIATHEROSKLEROTISCHEN
FAKTOREN
AUF
DIE
APOPTOSE
12
1.4.1
STICKSTOFFMONOXID
(NO)
12
1.4.1.1
BILDUNG
VON
NO
12
1.4.1.2
FUNKTIONEN
VON
NO
13
1.4.1.3
MECHANISMEN
DER
NO-FUNKTIONEN
UND
SIGNALTRANSDUKTION
13
1.4.1.4
PRO-APOPTOTISCHEN
EFFEKTE
UND
NEKROSE
DURCH
NO
14
1.4.1.5
ANTIAPOPTOTISCHE
EFFEKTE
VON
NO
14
1.4.2
TGF
SS
15
1.4.3
DIE
SCHUBSPANNUNG
1
5
2
FRAGESTELLUNG
17
3
MATERIAL
18
3,1
CHEMIKALIEN
18
3,2
GERAETE
UND
ZUSATZMATERIAL
19
4
METHODEN
20
4.1
ZELLKULTUR
20
4.2
APOPTOSENACHWEISE
20
4.2.1
DNA-FRAGMENTIERUNG
(SANDWICH-ELISA)
20
4.2.2
DNA-ISOLATION
21
4.2.3
MARKIERUNG
DER
DNA-FRAGMENTE
MIT
KLENOW-ENZYM
UND
21
[
32
P]DCTP
J
4.3
ZELLVIABILITAETSNACHWEIS
21
4.4
NEKROSENACHWEIS
22
4,5
METHODEN
ZUR
PROTEINANALYSE
22
4.5.1
PROTEINISOLATION
22
4.5.2
BESTIMMUNG
DER
PROTEINKONZENTRATION
22
4.5.3
AUFTRENNUNG
VON
PROTEINEN
IN
SDS-POLYACRYLAMIDGELEN
22
4.5.4
TRANSFER
VON
PROTEINEN
(WESTERN
BLOT)
23
I
NHALT
SEITE
4.5.4.1
SEMIDRY-BLOTTING
23
4.5.4.2
WET-BLOTTING
23
4.5.5
IMMUNFAERBUNG
VON
WESTERN
BLOTS
24
4.5.6
STRIPPING
UND
REPROBING
DER
MEMBRAN
24
4.6
SHEAR
STRESS
25
5
ERGEBNISSE
26
5,1
GLUKOSE
26
5.1.1
NACHWEIS
DER
APOPTOSEINDUKTION
DURCH
GLUKOSE
26
5.1.2
ZEITABHAENGIGKEIT
DER
APOPTOSEINDUKTION
DURCH
GLUKOSE
28
5.1.3
EFFEKT
DER
FCS-DEPLETION
UND
ZUSAETZLICHER
GLUKOSEINKUBATION
29
5.2
TGF
B
31
5,3
ANGIOTENSIN
II
33
5.3.1
NACHWEIS
DER
APOPTOSEINDUKTION
DURCH
ANG
N
33
5.3.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
DURCH
ANG
N
INDUZIERTEN
APOPTOSE
35
5.3.2.1
BEDEUTUNG
DER
TYROSINPHOSPHORYLIERUNG
3
5
5.3.2.1.1
EFFEKTE
VON
PAO
36
5.3.2.1.2
EFFEKTE
VON
GENISTEIN
36
5.3.3
EINFLUSS
VON
SHEAR
STRESS
AUF
DIE
APOPTOSE
5.3.3.1
EINFLUSS
VON
SHEAR
STRESS
AUFFCS-DEPLETIERTE
39
ENDOTHELZELLEN
5.3.3.2
EINFLUSS
VON
SHEAR
STRESS
AUF
PAO-INDUZIERTE
APOPTOSE
39
5.3.3.3
EINFLUSS
VON
SHEAR
STRESS
AUF
DIE
39
TYROSINPHOSPHORYLIERUNG
UND
DIE
MAP-KINASEN-AKTIVITAET
5.3.3.4
ZEITABHAENGIGKEIT
DER
SHEAR
STRESS-EFFEKTE
42
6
DISKUSSION
44
6,1
GLUKOSE
44
6,2
EINFLUSS
VON
TGF
SS
AUF
DIE
APOPTOSE
45
6.3
ANGIOTENSIN
II
46
6.3.1
APOPTOSEINDUKTION
DURCH
ANG
II
46
6.3.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
DURCH
ANG
II
INDUZIERTEN
APOPTOSE
47
6.3.3
SHEAR
STRESS-EFFEKTE
AUF
DIE
APOPTOSEINDUKTION
48
6.3.4
ZEITABHAENGIGKEIT
DER
SHEAR
STRESS-EFFEKTE
49
7
ZUSAMMENFASSUNG
51
8
ZITATE
53 |
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