Untersuchungen zur Entstehung, Lokalisation und Wirkung von fragmentiertem Phosphatidylcholin (FPC) im Menschen:
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INHALT
1 EINLEITUNG_ 6
1.1 PLAETTCHEN-AKTIVIERENDER FAKTOR (PAF)_
6
1.2 PAF UND WEITERE BIOAKTIVE LIPIDE_10
1.2.1 ENTDECKUNG VON PAF-VERWANDTEN LIPIDEN_ IO
1.2.2 PAF-AEHNLICHE LIPIDE _ IO
1.2.3 LIPIDPEROXIDATION _
11
1.2.4 STRUKTUR-WIRKUNGS-BEZIEHUNG PAF-AEHNLICHER LIPIDE_13
1.2.5 EXISTIEREN PAF-AEHNLICHE LIPIDE IN VIVO?_
15
1.3 FRAGESTELLUNG_;_
17
2 METHODEN _ 18
2.1 MATERIALIEN_
18
2.1.1 LOESUNGEN _ IS
2.2 MESSUNG VON FP
C _
19
2.2.1 MODIFIZIERTE LIPIDEXTRAKTION_
19
2.2.2 DERIVATISIERUNG MIT FLUORESZENZMARKER_20
2.2.3 FESTPHASENEXTRAKTION DER DERIVATE_20
2.2.4 ISOLIERUNG VON FPC MITTELS SILICA-HPLC_21
2.2.5 QUANTIFIZIERUNG VON FPC MITTELS RP-HPLC -_22
2.2.6 SYNTHESE DES INTERNEN STANDARDS L-PALMITOYL-2-SUBEROYL-PC_24
2.2.7 KONZENTRATIONSBESTIMMUNG DES INTERNEN STANDARDS MITTELS GC_26
2.3 MESSUNG DER BIOLOGISCHEN AKTIVITAET_27
2.3.1 LIPIDEXTRAKTION_ 27
2.3.2 FESTPHASENEXTRAKTION_ 28
2.3.3 ISOLATION [
3
H] SEROTONIN-MARKIERTER KANINCHENTHROMBOZYTEN_28
2.3.4 BIOASSAY_ 29
2.4 CHROMATOGRAPHISCHE CHARAKTERISIERUNG DER BIOLOGISCHEN AKTIVITAET_30
2.5 MESSUNG DER PHOSPHOLIPASE A
2
_31
2.6 MESSUNG DER PAF-ACETYLHYDROLASE AKTIVITAET_32
2.7 MESSUNG VON LOOHS_
33
2.8 MESSUNG DES PHOSPHATGEHALTS VON PHOSPHOLIPIDEN_33
2.9 FRAKTIONIERUNG VON PLASMA_ 34
2.9.1 PLASMAGEWINNUNG _
34
2.9.2 THROMBOZYTEN_
34
2.9.3 LIPOPROTEINE_
35
2.9.4 MESSUNG' VON ALBUMIN_
37
2.9.5 MESSUNG VON CHOLESTEROL_
37
2.9.6 MESSUNG VON APO AL UND B_ 38
2.10 FRAKTIONIERUNG VON LEBERGEWEBE_ 38
2.10.1 LEBERHOMOGENAT_ 38
2.10.2 SUBZELLULAERE FRAKTIONEN_ 39
2.11 GEWINNUNG VON ALVEOLAERER LAVAGE UND VON TYP II ZELLEN_39
2.11.1 PRAEPARATION VON ALVEOLAERER LAVAGE_
39
2.11.2 PRAEPARATION VON TYP II ZELLEN_
40
2.12 PROTEINBESTIMMUNG NACH BRADFORD_
41
2.13 OXIDATION VON TYP II ZELLEN MIT H
2
0
2
_ 41
2.14 VITAMIN E-DEPLETIONSVERSUCHE_
41
2.15 TIEREXPERIMENTE_ 42
2.16 UNTERSUCHUNGEN AM MENSCHEN_
43
2.16.1 GENEHMIGUNG DER ETHIK-KOMMISSION_
43
2.16.2 RAUCHER_ 43
2.16.3 HERZCHIRURGISCHE OPERATION_ 44
2.16.4 INTENSIVPATIENTEN_
45
2.16.5 APACHE II (KNAUS ET AL.
F 1985)_ 47
2.17 STATISTIK_ 48
2
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3 ERGEBNISSE_ 50
3.1 LOKALISATION VON FPC_50
3.1.1 THROMBOZYTEN_50
3.1.2 PLASMA _50
3.1.3 PARENCHYMATOESES GEWEBE_52
3.2 BIOLOGISCHE AKTIVITAET VON FPC_55
3.3 FPC BEI OXIDATIVEM STRESS IN BIOLOGISCHEN SYSTEMEN_56
3.3.1 EINFLUSS VON TABAKRAUCH_56
3.3.2 EINFLUSS VON H202_58
3.3.3 VITAMIN E-MANGEL_
59
3.4 FPC UNTER KLINISCHEN BEDINGUNGEN_61
3.4.1 HERZCHIRURGISCHE OPERATION_61
3.4.2 INTENSIVPATIENTEN _64
4 DISKUSSION_ 74
4.1 MOEGLICHE LOKALISATIONSORTE VON FPC IM PLASMA_74
4.2 FPC UND BIOLOGISCHE AKTIVITAET_75
4.3 FPC UND OXIDATIVER STRESS_79
4.4 FPC UND SYSTEMISCHE INFLAMMATION_82
5 ZUSAMMENFASSUNG_ 86
6 ANHANG _ 94
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