In-vitro-Untersuchungen zur kombinierten adenoviralen p53-Gentherapie und Paclitaxel-Carboplatin-Chemotherapie an Zellinien des Ovarialkarzinoms:
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INHALTSVERZEICHNIS:
SEITE
INHALTSVERZEICHNIS
M
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
V
1.
EINLEITUNG
1
1.1.
DAS
OVARIALKARZINOM
1
1.2.
DIE
CHEMOTHERAPIE
DES
OVARIALKATZINOMS
2
1.3.
DIE
GENTHERAPIE
ALS
THERAPIEFORM
ZUR
BEKAEMPFUNG
VON
TUMORZELLEN
3
1.4.
DAS
P53-GEN
4
1.5.
BERECHNUNGEN
VON
DOSIS-WIRKUNGSBEZIEHUNGEN
MITTELS
COMPUTER-
6
SOFTWARE
1.6.
FRAGESTELLUNG
UND
ZIEL
DER
VORLIEGENDEN
ARBEIT
7
2.
MATERIAL
&
METHODEN
8
2.1.
ZELLKULTUR
UND
VERWENDETE
ZELLINIEN
8
2.2.
ADENOVIRALE
VEKTOREN
FUER
DEN
GENTRANSFER
10
2.3.
BESTIMMUNG
DES
VIRUSTITERS
11
2.3.1.
VIRUSTITERBESTIMMUNG
MITTELS
CPE-ASSAY
ICYTOPATHIC
EFFECT
ASSAY)
11
2.3.2.
VIRUSTITERBESTIMMUNG
MITTELS
PHOTOMETRISCHER
MESSUNG
[O.DJ
12
2.4.
BESTIMMUNG
DER
TRANSDUKTIONSEFFIZIENZ
DURCH
X-GAL-STAINING
12
2.5.
CHEMOTHERAPEUTIKA
16
2.6.
MTT-ASSAY
UND
CHEMOSENSITIVITAET
18
2.6.1.
DER
MTT-ASSAY
18
2.6.2.
TESTUNG
DER
CHEMOSENSITIVITAET
19
2.7.
GENTRANSFER
VON
P53/GAL
MIT
UND
OHNE
ZUSATZ
VON
CHEMOTHERAPEUTIKA
20
2.7.1.
GENTRANSFER
VON
P53/GAL
OHNE
CHEMOTHERAPEUTIKA
20
2.7.2.
GENTRANSFER
VON
P53/GAL
IN
KOMBINATION
MIT
CHEMOTHERAPEUTIKA
20
2.8.
AUSWERTUNG
DER
DATEN
DES
MTT-ASSAYS
21
2.8.1.
BERECHNUNG
DER
PROZENTUALEN
INHIBITION
21
2.8.2.
BERECHNUNG
VON
IC50
UND
CI
UNTER
EINSATZ
DER
SOFTWARE
CALCUSYN
22
2.9.
APOPTOSENACHWEIS
MITTELS
ANNEXIN-V-ASSAY
UND
FACSCAN
25
2.10.
RNA-ISOLIERUNG
UND
RT-PCR
29
2.10.1.
RNA-ISOLIERUNG
29
2.10.2.
RT-PCR
[REVERSE
IRANSKRIPTASE
-
POLYMERASE
CHAIN
REACTION)
30
3.
ERGEBNISSE
33
3.1.
VIRUSTITER
33
3.2.
TRANSDUKTIONSEFFIZIENZ
33
3.3.
CHEMOSENSITIVITAET
36
3.4.
GENTRANSFER
VON
P53/GAL
ALLEINE
41
3.5.
KOMBINIERTE
GEN
UND
CHEMOTHERAPIE
44
3.6.
APOPTOSEMESSUNG
58
3.7.
RT-PCR
UND
ERFOLGTER
P53
GENTRANSFER
61
4.
DISKUSSION
62
4.1.
TRANSDUKTIONSEFFIZIENZ
62
4.2.
CHEMOSENSITIVITAET
65
4.3.
P53-GENTHERAPIE
MIT
UND
OHNE
KOMBINATION
VON
CHEMOTHERAPEUTIKA
68
SEITE
5.
ZUSAMMENFASSUNG
76
6.
LITERATUR
78
7.
DANKSAGUNG
96
8.
LEBENSLAUF
97
IV |
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