Effekt von Sauerstoffradikalen auf die Endothelin-1-Synthese:
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1999
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG.
L.L.ENDOTHELIN
.
5
1.1.1.
ISOFORMEN
DES
ENDOTHELINS
.
6
1.1.2.
ENDOTHELINBIOSYNTHESE
.
8
1.1.3.
ENDOTHELIN-L-MRNA
.
8
1.1.4.
ENDOTHELINFREISETZUNG
.
9
1.1.5.
INHIBITION
DER
ENDOTHELINFREISETZUNG
.
9
1.1.6.
SYNTHESE
UND
ELIMINATION
.
10
1.1.7.
ENDOTHELINREZEPTOR
.
10
1.1.8.
EIGENSCHAFTEN
VON
ENDOTHELIN-1
.
12
1.1.9.
KARDIOVASKULAERE
WIRKUNG
VON
ENDOTHELIN-1
.
13
1.1.10.
RENALE
WIRKUNG
.
14
1.1.11.
NEUROENDOKRINE
WIRKUNG
.
14
1.2.
STICKSTOFFMONOXID
.
15
1.3.
SAUERSTOFFRADIKALE
.
16
1.4.
FRAGESTELLUNG
.
18
2.
MATERIAL UND
METHODIK.
_
.
_
.
_
.
_
_
.19
2.1.
ENDOTHELZELLGEWINNUNG
.
19
2.2.
VORBESCHICHTEN
DER
ZELLKULTURFLASCHEN
.
21
2.3.
KONTROLLE
DES
ZELLWACHSTUMS
.
21
2.4.
ZELLPASSAGIERUNG
.
22
2.5.
EINFRIEREN
UND
AUFTAUEN
VON
ZELLEN
.
22
2.6.
ZELLAUSSAAT
FUER
VERSUCHE
.
23
2.7.
ZELLZAEHLUNG
.
24
2.7.1.
PRINZIP
DER
ZELLZAEHLUNG
.
24
2.7.2
DURCHFUEHRUNG
DER
ZELLZAEHLUNG
.
24
2.8.
BESTIMMUNG
VON
ENDOTHELIN-1
.
26
2.9.
BESTIMMUNG
VON
ENDOTHELIN-L-MRNA
.
27
2.9.1.
GEWINNUNG
DER
MRNA
.
27
2.9.2.
RNA-AUFTRENNUNG,
NORTHERN
BLOT
.
28
2.9.3.
MEGA
PRIME
.
29
INHALTSVERZEICHNIS
2.9.4.
HYBRIDISIERUNG
DER
NORTHERN
BLOTS
.
30
2.9.5.
WASCHEN
DER
BLOTS
.
30
2.9.6.
AUSWERTUNG
.
31
2.10.
VERWENDETE
SUBSTANZEN
.
32
2.11.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
32
3.
ERGEBNISSE.
33
3.1.
WIRKUNG
VON
XANTHINOXIDASE
AUF
DIE
EXTRAZELLULAERE
ENDOTHELIN-1
KONZENTRATION
.
33
3.1.1.
EFFEKT
VON
XANTHIN
/
XANTHINOXIDASE
AUF
DIE
ENDOTHELIN-1-KONZENTRATION
.
33
3.1.2.
AUSWIRKUNG
VON
INDOMETACIN
AUF
DIE
DURCH
XANTHIN
/
XANTHINOXIDASE
INDUZIERTE
REDUKTION
DER
ENDOTHELIN-1-KONZENTRATION
.
34
3.1.3.
AUSWIRKUNG
VON
N-Q-NITRO-L-ARGININ
AUF
DEN
ENDOTHELIN-1
VERMINDERNDEN
EFFEKT
VON
SAUERSTOFFRADIKALEN
.
35
3.1.4.
AUSWIRKUNG
VON
XANTHIN
UND
HARNSAEURE
AUF
DIE
ENDOTHELIN
1
-KONZENTRATION
.
36
3.1.5.
KOMPETETIVE
HEMMUNG
DER
XANTHINOXIDASE
DURCH
OXIPURINOL
.
37
3.1.6.
HEMMUNG
DER
XANTHINOXIDASE
DURCH
DESFERRIOXAMIN
.
38
3.1.7.
WIRKUNG
VON
RADICALSCAVENGEM
AUF
DEN
EFFEKT
VON
XANTHIN
/
XANTHINOXIDASE
AUF
DIE
ENDOTHELIN-1-SYNTHESE
.
39
3.1.8.
REDUKTION
DES
XANTHIN
/
XANTHIOXIDASE
EFFEKTS
DURCH
SUPEROXID-DISMUTASE
/
CATALASE
.
40
3.2.
BESTIMMUNG
DER
ENDOTHELIN-1-KONZENTRATION
UNTER
DURCH
WASSERSTOFF
PEROXID
ERZEUGTEM
OXIDATIVEN
STRESS
.
41
3.2.1.
KONZENTRATIONSABHAENGIGER
EFFEKT
VON
WASSERSTOFFPEROXID
AUF
DIE
ENDOTHELIN-1-SYNTHESE
NACH
4
STUNDEN
.
41
3.2.2.
KONZENTRATIONSABHAENGIGER
EFFEKT
VON
WASSERSTOFFPEROXID
AUF
DIE
ENDOTHELIN-1-SYNTHESE
NACH
24
STUNDEN
.
42
3.2.3.
AUSWIRKUNG
VON
CATALASE
AUF
DEN
EFFEKT
VON
WASSERSTOFFPEROXID
AUF
DIE
ENDOTHELIN-1-KONZENTRATION
.
43
3.2.4.
AUSWIRKUNG
VON
RADICALSCAVENGEM
AUF
DIE
DURCH
WASSER
STOFFPEROXID
INDUZIERTE
REDUKTION
DER
ENDOTHELIN-1-KONZENTRATION
.
44
-2
INHALTSVERZEICHNIS
3.3.
AUSWIRKUNG
VON
SAUERSTOFFRADIKALEN
AUF
DIE
ENDOTHELIN-1
KONZENTRATION
IN
ZELLFREIEM
KULTURMEDIUM
.
45
3.3.1.
AUSWIRKUNG
VON
SAUERSTOFFRADIKALEN
AUF
NATIVES
ENDOTHELIN-1
.
45
3.3.2.
AUSWIRKUNG
VON
SAUERSTOFFRADIKALEN
AUF
SYNTHETISCHES
ENDOTHELIN.47
3.4.
AUSWIRKUNG
AUF
DIE
ENDOTHELIN-1
-SYNTHESE
VON
DURCH
NADH
/
NADH
OXIDASE
ERZEUGTEN
SAUERSTOFFRADIKALEN
.
48
3.4.1.
REDUKTION
DER
ENDOTHELIN-1-KONZENTRATION
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
NADH-KONZENTRATION
.
49
3.4.2.
REDUKTION
DER
ENDOTHELIN-1-KONZENTRATION
DURCH
NADH
/
NADH-OXIDASE
.
.50
3.5.
AUSWIRKUNG
VON
OXIDATIVEM
STRESS
AUF
DIE
ENDOTHELIN-1
UND
ENOS-MRNA-SYNTHESE
.
51
3.5.1.
AUSWIRKUNG
VON
OXIDATIVEM
STRESS
AUF
DIE
ENDOTHELIN
1
-MRNA-SYNTHESE
.
51
3.5.2.
AUSWIRKUNG
VON
OXIDATIVEM
STRESS
AUF
DIE
ENDOTHELIALE
STICKSTOFFMONOXIDSYNTHASE-MRNA
.
53
4.
DISKUSSION.
55
5.
ZUSAMMENFASSUNG
_
.64
6.
ABKUERZUNGEN.YY.YYYY65
7.
MASSEINHEITEN.YY.YY.YY.YYYY.YY.YY.YY.YY.YY.66
8.
LITERATURVERZEICHNIS
.,.YY.YY.YY.
M
.
.67
9.
DANKSAGUNG.
-------------
.
_
.
_
_
.79
10.
LEBENSLAUF.
-
_
.
_
.
_
.
_
.YY.YYYYYY80
11.
ERKLAERUNG.YY.YY.YY.YY.YY81
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