Untersuchungen zur Freisetzung von Plasminogenaktivator-Inhibitor-1 und Leptin aus menschlichen subkutanen und omentalen Fettzellen in Suspensionskultur:
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG.
9
1.1.
ADIPOSITAS
UND
METABOLISCHES
SYNDROM
.
9
12.
DIE
FETTZELLE:
PATHOPHYSIOLOGISCHE
ASPEKTE.
.
10
13.
DAS
FETTGEWEBE
ALS
ENDOKRINES
UND
PARAKRINES
ORGAN
.
12
1.4.
PLASMINOGENAKTIVATOR
INHIBITOR-1
(PAI-1)
.
13
1.4.1.
BIOCHEMISCHE
EIGENSCHAFTEN
VON
PAI-1
.
13
1.4.2.
WIRKUNGEN
VON
PAI-1
.
14
1.4.3.
PAI-1-SYNTHESE
.
15
1.4.4.
REGULATION
DER
PAI
1
-SYNTHESE
UND
-FREISETZUNG.
.
16
13.LEPTIN
.
17
1.5.1.
LEPTINPRODUKTION
UND-WIRKUNGEN
.
17
1.5.2.
REGULATION
DER
LEPTINPRODUKTION.
.
18
1.6.
FRAGESTELLUNGEN.
20
2.
MATERIAL
.
21
2.1.
TECHNISCHE
INSTRUMENTE
.
21
22.
MATERIALIEN.
22
23.
CHEMIKALIEN.
22
2.4.
ZELLKULTURMEDIEN
UND
-ZUSAETZE.
.
23
23.
ENZYME
UND
ANTIKOERPER
.
24
2.6.
PRIMER.
24
2.7.
KULTURMEDIUM.
24
3.
METHODEN
.
25
3.1.
ISOLIERUNG
UND
INKUBATION
HUMANER
FETTZELLEN
.
25
3.1.1.
GEWINNUNG
DER
FETTGEWEBSPROBEN
.
25
3.1.2.
ISOLIERUNG
DER
REIFEN
FETTZELLEN
.
25
3.1.3.
BESTIMMUNG
DER
FETTZELLGROESSE
.
26
3.1.4.
BESTIMMUNG
DER
FETTZELLZAHL
.
26
3.1.5.
BERECHNUNG
DES
FETTZELLVOLUMENS
.
27
3.1.6.
INKUBATION
DER
FRISCH
ISOLIERTEN
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR
.
27
3.2.
BIOCHEMISCHE
UND
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
.
27
3.2.1.
BESTIMMUNG
DER
LDH-AKTIVITAET
IM
ZELLKULTURMEDIUM
.
27
3.2.2.
PAI-1
PROTEINBESTIMMUNG
IM
ZELLKULTURMEDIUM
.
28
3.2.3.
LEPTINPROTEINBESTIMMUNG
IM
ZELLKULTURMEDIUM.
.
31
3.2.4.
ISOLIERUNG
DER
ZYTOPLASMATISCHEN
RNA
AUS
ISOLIERTEN
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR.
31
3.2.5.
REVERSE
TRANSKRIPTION
VON
GESAMT-RNA
.
32
3.2.6.
SEMIQUANTITATIVE
PCR
.
33
33.
ELEKTROPHORETISCHE
METHODEN
.
35
3.3.1.
HORIZONTALE
AGAROSEGEL-ELEKTROPHORESE
UNTER
DENATURIERENDEN
BEDINGUNGEN
.
35
3.3.2.
HORIZONTALE
AGAROSEGEL-ELEKTROPHORESE
UNTER
NATIVEN
BEDINGUNGEN.
.
35
3.4.
AUSWERTUNG
UND
STATISTIK.
.
37
4.
ERGEBNISSE
.
38
4.1.
KLINISCHE
CHARAKTERISTIKA
DER
ADIPOESEN
UND
SCHLANKEN
PATIENTEN
.
38
43.
MORPHOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
DER
ISOLIERTEN
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR
.
38
4.2.1.
UNTERSUCHUNG
DER
FETTZELLGROESSE
UND
DES
FETTZELLVOLUMENS
.
38
4.2.2.
UNTERSUCHUNG
DER
FETTZELLZAHL
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
KULTIVIERUNGSDAUER
.
39
4.2.3.
UNTERSUCHUNG
DER
FETTZELLGROESSE
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
INKUBATIONSDAUER.
.
40
43.
LAKTAT-DEHYDROGENASE-AKTIVITAET
ALS
MARKER
DER
FETTZELLVITALITAET.
.
42
4.4.
PAI-L-FREISETZUNG
AUS
SUBKUTANEN
UND
OMENTALEN
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR.
.
44
4.4.1.
UNTERSUCHUNG
DER
PAI-L-FREISETZUNG
IN
DAS
KULTURMEDIUM
AUS
SUBKUTANEN
UND
OMENTALEN
FETTZELLEN
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
KULTIVIERUNGSDAUER.
.
44
4.4.2.
VERGLEICH
DER
PAI-1
FREISETZUNG
AUS
SUBKUTANEN
UND
OMENTALEN
FETTZELLEN
ZWISCHEN
ADIPOESEN
UND
SCHLANKEN
PATIENTEN.
.
45
4.4.3.
KORRELATION
ZWISCHEN
PAI-1-KONZENTRATION
UND
FETTZELLVOLUMEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR
.
46
4.4.4.
EFFEKT
VON
TNF-A
AUF
DIE
PAI-L-FREISETZUNG
SUBKUTANER
UND
OMENTALER
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR.
47
4.4.5.
EFFEKT
VON
TGF-SSL
AUF
DIE
PAI-1-FREISETZUNG
SUBKUTANER
UND
OMENTALER
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR
VON
ADIPOESEN
UND
SCHLANKEN
PATIENTEN.
.
48
4.4.6.
EFFEKT
VON
SS-ADRENOREZEPTOR-AGONISTEN
AUF
DIE
PAI-1
FREISETZUNG
SUBKUTANER
UND
OMENTALER
FETTZELLEN
ADIPOESER
PATIENTEN.
.
50
4.4.7.
EFFEKT
VON
SUBSTANZEN,
DIE
INTRAZELLULAERES
CAMP
STEIGERN,
AUF
DIE
PAI-1-FREISETZUNG
SUBKUTANER
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR.
53
4.5.
LEPTINFREISETZUNG
AUS
SUBKUTANEN
UND
OMENTALEN
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR
.
55
4.5.1.
UNTERSUCHUNG
DER
LEPTINFREISETZUNG
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
KULTURDAUER.
.
55
4.5.2.
DEPOT-SPEZIFISCHE
FREISETZUNG
VON
LEPTIN
.
55
4.5.3.
KORRELATION
ZWISCHEN
LEPTINKONZENTRATION
UND
FETTZELLVOLUMEN
IM
KULTURMEDIUM
.
56
4.5.4.
GESCHLECHTS-SPEZIFISCHE
LEPTINFREISETZUNG.
.
57
4.5.5.
WIRKUNG
VON
TNF-A
AUF
DIE
LEPTINFREISETZUNG
AUS
SUBKUTANEN
UND
OMENTALEN
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR.
57
4.5.6.
WIRKUNG
VON
TGF-SSL
AUF
DIE
LEPTINFREISETZUNG
AUS
SUBKUTANEN
UND
OMENTALEN
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR.
59
5.
DISKUSSION
.
61
5.1.
MORPHOLOGIE
UND
FUNKTION
ISOLIERTER
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR.
.
61
52.
PAI-L-FREISETZUNG
AUS
MENSCHLICHEN
SUBKUTANEN
UND
OMENTALEN
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR
.
62
5.2.1.
REGULATION
DER
PAI-L-FREISETZUNG
AUS
SUBKUTANEN
UND
OMENTALEN
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR
.
63
53.
LEPTINFREISETZUNG
AUS
MENSCHLICHEN
SUBKUTANEN
UND
OMENTALEN
FETTZELLEN
IN
SUSPENSIONSKULTUR
.
65
6.
ZUSAMMENFASSUNG
.
69
7.
LITERATURVERZEICHNIS
.
71 |
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