Entwicklung und Anwendung eines immunchemischen Schnelltestverfahrens zum Multimykotoxinnachweis:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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| Veröffentlicht: |
2001
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I
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
2
SCHRIFTTUM
2
2.1
MYKOTOXINE
2
2.1.1
ALLGEMEINES
2
2.1.2
AFLATOXINE
2
2.1.3
OCHRATOXINE
3
2.1.4
FUMONISINE
4
2.1.5
TRICHOTHECENE
4
2.2
IMMUNCHEMISCHE
SCHNELLTESTS
ZUM
NACHWEIS
VON
MYKOTOXINEN
UND
ANDEREN
NIEDERMOLEKULAREN
SUBSTANZEN
IN
LEBENSMITTELN
6
2.2.1
ALLGEMEINES
6
2.2.2
METHODISCHE
GRUNDLAGEN
7
2.2.3
SCHNELLTEST-SYSTEME
9
2.2.3.1
DIPSTICK
ODER
TESTSTREIFENTEST
9
2.2.3.2
IMMUNCHROMATOGRAPHISCHER
TEST
12
2.2.3.3
AGGLUTINATIONSTEST
13
2.2.3.4
ROEHRCHENTEST
13
2.2.3.5
IMMUNFILTRATIONSTEST
14
2.3
MULTITOXINTESTS
FUER
MYKOTOXINE
19
II
3
EIGENE
UNTERSUCHUNGEN
21
3.1
MATERIALIEN
UND
GERAETE
21
3.1.1
CHEMIKALIEN
UND
BIOCHEMIKA
21
3.1.2
MYKOTOXINE
21
3.1.3
IMMUNREAGENZIEN
21
3.1.4
PUFFER
UND
LOESUNGEN
24
3.1.5
GERAETE
25
3.1.6
SONSTIGES
25
3.2
ENTWICKLUNG
EINES
ENZYMIMMUNOLOGISCHEN
MULTI-SCHNELLTESTS
(IMMUN
FILTRATIONSTEST)
FUER
DEN
SIMULTANEN
NACHWEIS
WICHTIGER
LEIT-MYKOTOXINE
26
3.2.1
ERARBEITUNG
VON
EINZELTESTS
FUER
DIE
LEIT-MYKOTOXINE
26
3.2.1.1
TESTAUFBAU
26
3.2.1.2
BESCHICHTUNG
UND
ABSAETTIGUNG
DER
TESTMEMBRAN
27
3.2.1.3
TESTDURCHFUHRUNG
28
3.2.1.4
VISUELLE
TESTAUSWERTUNG
UND
ERMITTLUNG
DER
NACHWEISGRENZEN
29
3.2.1.5
VERSUCHE
ZUR
OPTIMIERUNG
DER
NACHWEISEMPFINDLICHKEIT
30
3.2.1.5.1
ERMITTLUNG
EINER
GEEIGNETEN
FESTPHASE
30
3.2.1.5.2
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
IMMUNREAGENZIENKONZENTRATION
31
3.2.1.6
ERGEBNISSE
31
3.2.1.6.1
ERMITTLUNG
EINER
GEEIGNETEN
FESTPHASE
31
3.2.1.6.2
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
IMMUNREAGENZIENKONZENTRATION
33
3.2.1.6.3
NACHWEISGRENZEN
DER
TESTS
UNTER
OPTIMIERTEN
BEDINGUNGEN
33
IN
3.2.2
INTEGRATION
DER
EINZELTESTS
IN
EIN
MULTITESTSYSTEM
FUER
DEN
SIMULTANEN
NACHWEIS
VON
SIEBEN
LEIT-MYKOTOXINEN
39
3.2.2.1
HERSTELLUNG
EINER
TOXIN-ENZYMKONJUGATMISCHUNG
AUS
SIEBEN
EINZEL
REAGENZIEN
39
3.2.2.1.1
DURCHFUEHRUNG
39
3.2.2.1.2
ERGEBNISSE
40
3.2.2.2
HERSTELLUNG
EINER
HALTBAREN
TOXIN-ENZYMKONJUGATMISCHUNG
DURCH
GEFRIERTROCKNEN
40
3.2.2.2.1
DURCHFUEHRUNG
41
3.2.2.2.2
ERGEBNISSE
42
3.2.2.3
ERSTELLUNG
EINER
INTEGRIERTEN
NEGATIVKONTROLLE
FUER
DAS
MULTITESTSYSTEM
47
3.2.2.3.1
DURCHFUEHRUNG
47
3.2.2.3.2
ERGEBNISSE
48
3.2.2.4
VERSUCHE
ZUR
ANWENDBARKEIT
KOMMERZIELLER
SUBSTRATLOESUNGEN
IM
MULTI
TESTSYSTEM
49
3.2.2.4.1
DURCHFUEHRUNG
49
3.2.2.4.2
ERGEBNISSE
SO
3.3
VERSUCHE
ZUR
ANWENDBARKEIT
DES
MULTITESTSYSTEMS
FUER
DEN
NACHWEIS
VON
MYKOTOXINEN
IN
GETREIDE
UND
SAND
52
3.3.1
NACHWEIS
VON
MYKOTOXINEN
IN
KUENSTLICH
KONTAMINIERTEN
GETREIDEPRODUKTEN
52
3.3.1.1
PROBENVORBEREITUNG
UND
PROBENEXTRAKTION
52
3.3.1.2
TESTDURCHFUEHRUNG
52
3.3.1.3
ERGEBNISSE
53
IV
3.3.2
NACHWEIS
VON
MYKOTOXINEN
IN
KUENSTLICH
KONTAMINIERTEN
SANDPROBEN
54
3.3.2.1
PROBENVORBEREITUNG
UND
PROBENEXTRAKTION
54
3.3.2.2
TESTDURCHFUEHRUNG
54
3.3.2.3
ERGEBNISSE
54
3.4
ORIENTIERENDE
VERSUCHE
ZUR
WEITEREN
VEREINFACHUNG
UND
VERKUERZUNG
DES
TESTABLAUFS
55
3.4.1
DURCHFUEHRUNG
55
3.4.2
ERGEBNISSE
56
3.S
VERSUCHE
ZUR
HALTBARKEIT
DER
BESCHICHTETEN
MEMBRANEN
56
3.5.1
DURCHFUEHRUNG
56
3.5.2
ERGEBNISSE
56
4
DISKUSSION
57
4.1
AUSWAHL
DER
MYKOTOXINE
58
4.2
ERSTELLUNG
DES
IMMUNFILTRATIONSTESTS
60
4.3
ANWENDBARKEIT
DES
IMMUNFILTRATIONSTESTS
63
5
ZUSAMMENFASSUNG/SUMMARY
65
6
LITERATURVERZEICHNIS
69 |
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